首页 > 文献资料
-
蓝莓花色苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用初探
目的 观察蓝莓花色苷对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,初步探讨其作用机制.方法 将100只SD大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组和蓝莓花色苷给药低、中、高3个剂量组(50、100和200 mg/kg·d).假手术组只分离右侧的颈总动脉、颈内动脉和颈外动脉,但不阻断血流.实验组采用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注模型,观察蓝莓花色苷对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能缺损评分、脑组织含水量的影响.取大鼠右侧脑组织,检测氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Elisa法检测脑组织中匀浆中核因子kappa B(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1(IL-1)和白细胞介素6(IL-6)水平,Western blotting法检测热休克蛋白70 (HSP70)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达水平.结果 与模型组比较,蓝莓花色苷各剂量组可降低大鼠神经功能缺损评分(P ＜0.01),减少脑组织含水量(P＜0.05),提高SOD活性,降低MDA含量(P＜0.05),降低NF-KB、TNF-α、IL-1和IL-6水平(P＜0.05);免疫印迹结果显示,蓝莓花色苷各剂量组均可增强p-Akt蛋白表达,其中中、高剂量组可明显增强HSP-70蛋白表达.结论 蓝莓花色苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有较好的保护作用,其作用机制可能通过上调p-Akt和HSP-70蛋白的表达,发挥其对神经细胞的保护作用.
-
蓝莓花色苷预处理对大鼠心肌梗死的保护作用
目的 观察蓝莓花色苷(blueberry anthocyanin,BBA)预处理对实验性急性心肌梗死大鼠心肌梗死面积,心肌肌钙蛋白-T(cTn-T)表达,Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响,探讨其干预心肌梗死的机制.方法 40只Wistar大鼠随机分为假手术组,心肌梗死模型组,BBA低、中、高剂量组,药物干预4周,末次给药30 rain后结扎左冠状动脉前降支建立心梗动物模型.24 h后,TTC检测心肌梗死面积；Western blotting方法检测心肌细胞cTn-T蛋白表达；real time PCR方法检测Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达.结果 模型组和假手术组相比,模型组心肌梗死面积显著升高(P＜0.01),心肌细胞eTn-T蛋白表达下降(P＜0.05),Bcl-2 mRNA表达下降(P＜0.05),Bax mRNA表达显著升高(P＜0.01),Bcl-2/ Bax比值显著降低(P＜0.01).BBA干预给药组和模型组相比,中剂量组心肌梗死面积低于模型组(P＜0.05),低剂量组心肌细胞cTn-T蛋白表达升高(P＜0.05),中剂量组Bcl-2 mRNA表达升高(P＜0.05),低、中剂量组Bax mRNA表达下降(P＜0.05),中剂量组Bcl-2/ Bax比值升高(P＜0.05).结论 蓝莓花色苷对心肌梗死后心肌细胞具有明确的保护作用,其机制可能与减少心肌梗死面积,上调心肌细胞cTn-T蛋白的表达,上调Bcl-2 mRNA表达、下调Bax mRNA表达,抑制心肌梗死后心肌细胞凋亡有关.
-
蓝莓花色苷对环磷酰胺致大鼠心脏损伤保护作用
目的 观察蓝莓花色苷对环磷酰胺致大鼠心脏毒性的保护作用,并探讨其作用机制.方法 雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、环磷酰胺组和蓝莓花色苷20、80 mg/kg组,连续灌胃14 d后,处死动物,其中第8天环磷酰胺组及蓝莓花色苷组大鼠腹腔注射环磷酰胺100 mg/kg;观察心肌组织病理学改变,采用自动生化分析仪测定大鼠血清酶学指标,采用试剂盒法检测心肌组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Western blot检测心肌细胞Bcl-2和Bax蛋白表达水平.结果 环磷酰胺组大鼠心脏出现心肌细胞肥大、变性坏死、凋亡及炎性细胞浸润等病理变化,而蓝莓花色苷组大鼠心脏病理变化不同程度减轻;与对照组比较,环磷酰胺组大鼠心肌细胞乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转换酶(AST)、肌酸激酶活性[分别为(314.7±9.2)、(772.5 ±18.3)、(501.5±13.6)U/L]明显升高,心肌组织SOD活性[(21.2±1.4)U/mg prot]下降,MDA含量[(171.2±12.4) μg/gprot]升高;与环磷酰胺组比较,蓝莓花色苷80 mg/kg组大鼠心肌细胞LDH、AST、肌酸激酶活性[分别为(127.7±7.4)、(411.5 ±10.3)、(268.6±8.4) U/L]明显下降,心肌组织SOD活性[(26.9±1.3) U/mg prot]升高,MDA含量[(144.9±12.8)μg/g prot]下降.结论 蓝莓花色苷对环磷酰胺致大鼠心脏毒性具有一定保护作用,作用机制可能与抗氧化有关.
-
蓝莓花色苷对人脐静脉内皮细胞凋亡调控基因Bax、Caspase－3表达的影响
目的：探讨蓝莓花色苷对血管紧张素（ Ang）Ⅱ诱导的人脐静脉内皮细胞（ HUVEC）凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法将HUVEC常规复苏传代，建立HUVEC凋亡模型，随机分成空白对照组、AngⅡ组、蓝莓花色苷组、AngⅡ＋蓝莓花色苷组。采用MTT法检测细胞活性，通过Annexin V－FITC标记的流式细胞术检测细胞凋亡率，Western印迹蛋白免疫印迹法检测Bax、Caspase－3蛋白表达。结果与空白对照组相比，AngⅡ组Bax 和Caspase－3蛋白表达水平显著增加（P＜0．01）；与AngⅡ组相比，蓝莓花色苷组、AngⅡ＋蓝莓花色苷组Bax 和Caspase－3的蛋白表达水平明显降低（P＜0．01）。结论蓝莓花色苷对HUVEC凋亡有一定抑制作用。
-
蓝莓花色苷的研究进展
蓝莓(Blueberry),又名越桔、蓝浆果、红豆果等,为杜鹃花科(Ericaceae)越桔属(Vaccinium spp.)多年生落叶或常绿果树,呈灌木.在栽培学上,蓝莓属小浆果类果树.蓝莓共有450多种不同的品种,主要的优良品种有兔眼蓝莓、高丛蓝莓、半高丛蓝莓和矮丛蓝莓,分布于亚寒带、温带及亚热带.我国的大、小兴安岭山区有野生蓝莓,近年已进行人工驯化栽培.源生于北美洲者泛称美国蓝莓,约百年前已开始人工栽培.
-
蓝莓花色苷对过氧化氢所致血管内皮细胞损伤的保护作用
目的 观察蓝莓花色苷对过氧化氢(H2O2)所致血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制.方法 选取处于对数生长期的人静脉血管内皮细胞EVC-304,分别加入蓝莓花色苷10 μg·ml-1、20 μg·ml-1和40 μg·ml-1,培养24h后再加入H2O2100 μmol·L-1作用12 h.MTT法检测细胞存活率,Hoechst 333258染色法观察EVC-304细胞凋亡形态,试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Western blot法检测细胞内胱天蛋白酶3(Caspase-3)的表达.结果 同正常组相比,H2 O2损伤组能够明显降低细胞存活率(P＜0.01),细胞出现染色质固缩,核致密浓染,细胞核变小浓集的凋亡形态,SOD活性降低,MDA含量升高(P＜0.01),Caspase-3蛋白表达呈升高趋势.与H2O2损伤组相比,蓝莓花色苷20 μg·ml-1和40 μg·ml-1组细胞存活率明显升高(P＜0.01),凋亡细胞形态有所改善,SOD活性升高,MDA含量降低(P＜0.01),细胞内Caspase-3表达下降.结论 蓝莓花色苷对H2O2所致血管内皮细胞氧化损伤具有明显的保护作用,其机制可能与改善细胞内氧化应激水平相关.
-
蓝莓花色苷对放射性心脏损伤的保护机制研究
目的:探讨IL-1和TGF-β在放射所致心脏损伤组织中的表达变化及蓝莓花色苷干预的影响.方法:将40只大鼠随机分成空白对照组、单纯照射组、20 mg/kg蓝莓花色苷照射组、80mg/kg蓝莓花色苷照射组,每组各10只.照射前蓝莓花色苷灌胃给药,然后通过单次全胸15Gy照射剂量进行照射,照射后每天对大鼠的状态进行观察并继续灌胃.饲养8d后,对大鼠心肌酶谱指标进行检测,苏木精-伊红及Masson染色观察心肌组织病理变化,运用荧光定量PCR仪对IL-1和TGF-β相对表达量的变化进行分析.结果:与空白对照组比较,单纯照射组的苏木精-伊红及Masson染色显示心肌有一定程度的损伤,血清谷草转氨酶和磷酸肌酸激酶等心肌酶谱含量升高(P＜0.05),IL-1和TGF-β相对表达量升高(P＜0.05);与单纯照射组比较,蓝莓干预组的苏木精-伊红及Masson染色显示心肌损伤的程度轻,血清谷草转氨酶和磷酸肌酸激酶等含量低,IL-1和TGF-β相对表达量低,相关指标均高于空白对照组(P＜0.05).结论:心肌组织中IL-1和TGF-β表达升高在心肌损伤的发生机制中起到重要作用.在一定剂量范围内,蓝莓花色苷可以降低放射性心肌损伤程度,且随着剂量升高呈现正相关,其机制可能与降低IL-1和TGF-β的表达有关.
-
流式细胞术在检测细胞内活性氧中的应用
目的 流式细胞术检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的水平.方法 将新生1天20只乳鼠随机分为3组(试验组15只,阴性和阳性对照组各5只),取乳鼠海马组织制备成单细胞悬液,经蓝莓花色苷、双氧水处理后,加入二氯荧光素-双乙酸盐(DCF-DA)孵育,DCF-DA进入细胞后可被ROS氧化生成发荧光的2',7'-二氯荧光素(DCF)52,通过流式细胞仪检测DCF荧光水平的变化,同时设立阴性及阳性对照.结果 蓝莓花色苷物质可以降低H2 O2刺激诱导的胞内ROS的产生,以1μmol/L效果为明显.结论 利用流式细胞仪检测过氧化物刺激后胞内产生的活性氧是一种简单、准确、稳定的方法.
关键词： 流式细胞术 活性氧 二氯荧光素 双乙酸盐(DCF-DA) 蓝莓花色苷
