多壁碳纳米管对DNA的体外氧化损伤研究

目的 观察多壁碳纳米管(multi-walled nanotubes,MWCNTs)对DNA超螺旋构型的影响和氧化损伤.方法 选择不同浓度多壁碳纳米管(50 ～ 500 μg/ml)与pBR322质粒DNA及小牛胸腺DNA(ct-DNA)作用,采用质粒DNA凝胶电泳和圆二色谱分析.结果 多壁碳纳米管能够引起pBR322质粒DNA的损伤,其DNA损伤率(16％～42％)呈剂量-反应关系,多壁碳纳米管高浓度(500 μg/ml)时DNA降解成线性条带.在活性氧清除剂-维生素C的作用下,DNA损伤率可由45.24％降低到18.64％.多壁碳纳米管可削弱DNA碱基之间的堆积作用,导致DNA解链.结论 多壁碳纳米管可通过活性氧介导DNA损伤.

硫酸苦豆子多糖构象及抗凝血活性

目的:研究硫酸化苦豆子多糖(SAPS)溶液的构象特征以及在不同因素影响下的溶液行为,并考察其体外抗凝血活性.方法:采用刚果红法研究SAPS构象特征;通过圆二色谱(CD)研究SAPS在不同浓度、温度和添加钙离子等条件下构象的变化;并测定SAPS体外抗凝血活性.结果:刚果红试验中SAPS络合物的大吸收波长会发生红移;浓度、温度变化以及添加钙离子使SAPS构象发生变化.不同取代度的SAPS表现出不同程度的抗凝血活性.结论:SAPS具有多股螺旋结构.浓度、温度和金属离子因素均对其构象均有不同程度的影响.随着硫酸根的取代度增加,SAPS的抗凝血作用增强.

几种海洋天然产物立体结构的确定

有机化合物立体结构的确定是有机化合物结构确定的主要内容之一,许多天然产物都具有α,β-不饱和环酮、α,β-不饱和酮基侧链等结构单元,该类化合物往往可通过圆二色谱(CD)中320～350 nm n→π*跃迁、220～260 nmπ→π*跃迁的Cotton效应曲线来确定绝对构型.本文对具有α,β-不饱和环酮结构单元的化合物、具有α,β-不饱和酮基侧链的六元环类化合物、神经酰胺类化合物、具有环丙烷结构单元的脂肪链类化合物、具有双键的脂肪链类化合物的立体结构的测定方法进行了综述,希望能对这些类型化合物立体结构的确定提供一定的参考.

海洋天然产物结构解析若干立体化学问题

在天然产物结构解析中,常遇到立体化学问题(手性碳、轴不对称或面不对称).确定其立体化学不仅是天然产物化学的重要内容之一,而且对阐明分子的靶向功能具有重要意义.现代波谱技术为天然产物构型确定提供了可靠的方法.本文结合作者的研究实例,综述应用现代波谱在若干海洋天然产物结构解析中的应用实例.

天然产物绝对构型的确定方法

天然产物的物理、化学、生物及药物学性质与其绝对构型紧密相关,而天然产物绝对构型的确定一直都是天然产物化学中面临的巨大挑战,受到科研工作者的广泛关注.人们已经总结出多种确定方法,如X线单晶衍射、基于手性试剂化学反应和核磁共振(NMR)的Mosher法、光谱法(如圆二色谱)及有机合成等方法,对于不同结构特点天然产物的绝对构型确定,这些方法各有利弊.本文综述了这些常用方法的原理、优势和局限性.

Rh2(OCOCF3)4试剂在仲醇和叔醇类结构绝对构型确定中的应用

天然产物绝对构型的确定是一个令人关注的研究领域.与化合物手性中心直接相关的圆二色(circular dichroism,CD)谱法是确定溶液中手性化合物绝对构型的有效手段之一.国外文献介绍了一种通过使用过渡金属试剂Rh2(OCOCF3)4进行手性仲醇或叔醇结构绝对构型的确定方法,手性仲醇或叔醇与Rh2(OCOCF3)4络合后,其CD图谱在600～270 nm范围内有A～F6个吸收带,其中出现在350 nm处的E带可通过bulkiness规则来确定仲醇或叔醇的绝对构型.本文将对Rh2(OCOCF3)4作为辅助生色团诱导CD,确定天然产物手性仲醇或叔醇结构绝对构型的研究进行系统介绍.

光谱法研究卡比多巴与牛血清蛋白相互作用

目的 研究卡比多巴(CAR)与牛血清蛋白(BSA)相互作用的荧光猝灭类型、结合位点、结合常数、作用力类型和血清蛋白二级结构的变化情况.方法 采用紫外-可见光分光光度法、荧光光谱法和圆二色谱(CD)法等方法研究两者的相互作用,并通过计算得到相关参数.结果 通过紫外-可见分光光度法发现,在卡比多巴的作用下,BSA的大吸收峰发生了蓝移,蛋白质疏水性增强;通过荧光光谱法发现,卡比多巴导致BSA发生静态荧光猝灭.通过热力学计算得到两者结合的△G<0,△H>0,△S>0,因此其结合为自发进行的放热反应,主要相互作用力为疏水作用力.结论 CD结果表明,随着卡比多巴浓度的增加,BSA二级结构中α-螺旋的含量逐步明显减少,而β-转角、β-折叠和无规则卷曲均不同程度地增加.

CD和FT-IR法分析重组人钙调磷酸酶B亚基冻干前后与多批产品二级结构的一致性

目的 通过测定重组人钙调磷酸酶B亚基(rhCNB)的圆二色谱(CD)和傅立叶变换红外光谱(FT-IR),来研究rhCNB冻于前、后和rhCNB多批产品之间二级结构的一致性,从而确定生产工艺是否稳定,样品是否发生变性等,达到控制产品质量的目的.方法 采用CD和FT-IR光谱法分别对3批rhCNB进行蛋白质二级结构测定,并对rhCNB冻干前与冻干后样品进行了CD和FT-IR光谱法二级结构测定.结果与结论 CD和FT-IR光谱测得3批样品谱图均达到批间一致,说明样品二级结构稳定,工艺过程较稳定,产品未发生变性.rhCNB冻干前与冻干后2种图谱均无明显变化,说明冻干工艺对rhCNB的二级结构并无改变.

渗透促进剂对大鼠舌下黏膜及胰岛素舌下给药的影响

目的研究不同渗透促进剂对蛋白多肽药物舌下吸收的影响及作用机制.方法以胰岛素为模型药,考察各种渗透促进剂经正常大鼠舌下给药后降血糖的效果,以皮下注射为对照,计算胰岛素舌下给药的药理相对生物利用度(PA%);采用拉曼光谱、圆二色谱和荧光偏振实验技术考察渗透促进剂对大鼠舌下黏膜的膜脂流动性及膜蛋白构象的影响.结果一般情况下,胰岛素溶液经舌下给药后的生物利用度较低,渗透促进剂苄泽35、蛋黄卵磷脂和壳聚糖均能显著增加胰岛素溶液的降血糖作用;渗透促进剂能够影响膜脂的微观结构和膜蛋白的构象,不同渗透促进剂的影响差别较大.苄泽35、蛋黄卵磷脂和壳聚糖能够增加膜脂的流动性,并使蛋白构象趋于松散,从而提高黏膜的通透性,促进胰岛素的舌下吸收,并表现为降糖作用的增加.结论渗透促进剂可以不同程度地影响膜脂流动性和膜蛋白构象,提高胰岛素经舌下给药后的降糖效果.

一个改进的测定有机化合物绝对立体构型的方法

目的提供一个改进的测定有机化合物绝对立体构型的方法.方法利用计算机来取代将符合八区规则化合物的结构放入后四区中的手工操作.结果分别完成了4个化合物的绝对构型测定的改进工作,大大地提高了该测定工作的精确度.结论可半定量地测定带羰基的环状化合物的绝对立体构型.

咪唑斯汀与牛血清白蛋白的作用研究

目的 研究咪唑斯汀与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制和作用类型.方法 用荧光光谱法检测Stern-Volmer猝灭常数,用紫外分光光度法(UV)和圆二色谱法(CD)检测咪唑斯汀对牛血清白蛋白构象的影响.结果 用上述检测方法获得不同温度下咪唑斯汀与牛血清白蛋白的猝灭常数和热动力学参数.结论 静态猝灭是咪唑斯汀导致BSA荧光猝灭的主要原因.不同温度下计算的热动力学参数表明,咪唑斯汀与牛血清白蛋白分子间的结合力以疏水作用力为主.上述二者的结合导致BSA的构象发生改变.

甘青蒿中两个倍半萜内酯α-亚甲基γ-内酯圆二色谱的研究

目的研究甘青蒿的化学成分,并鉴定其构型.方法用圆二色谱仪研究了 2 个化合物的绝对构型.结果从甘青蒿中分得 2 个化合物:4α-羟基愈创木型-2,10(14),11(13)-三烯-12,6α-内酯(Ⅰ),2β-羟基愈创木型-3,10(14),11(13)-三烯-12,6α-内酯(Ⅱ).结论化合物Ⅰ和Ⅱ均是在 6 位以反式稠合方式使 C 环与 B 环相连.

乙酰普鲁兰纳米粒子与牛血清白蛋白的相互作用

目的 考查乙酰普鲁兰纳米粒子(PANs)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用,为研究PANs体内药代动力学特征奠定基础.方法 将不同浓度的PANs溶液和BSA溶液混合,应用荧光法和圆二色谱(CD)法考察二者间的相互作用,计算PANs与BSA结合的缔合常数(Kq),观测PANs-BSA抗尿素变性的作用.结果 PANs对BSA荧光的影响具有浓度相关性,PANs溶液(0.015～0.25mg/ml)与BSA(0.25 mg/ml)的缔合常数Kq从2.64×104增高至3.55×105;在尿素或加热条件下,PANs-BSA溶液和BSA溶液的CD光谱具有相似的变化趋势.结论 PANs对BSA的荧光光谱具有显著影响,但PANs未影响尿素和高温对BSA的变性作用.

苦豆子多糖溶液构象的研究

目的：研究苦豆子多糖溶液的构象特征以及在不同因素影响下的溶液行为。方法采用碘–碘化钾反应观察苦豆子多糖链的分支情况和刚果红试验研究构象特征；采用圆二色谱（CD）法研究在不同浓度、温度和添加钙离子等条件下苦豆子多糖构象的变化。结果碘–碘化钾反应结果显示苦豆子多糖有较长的侧链和较多的分支；刚果红试验中苦豆子多糖具有多股螺旋结构；浓度、温度以及添加金属离子使苦豆子多糖溶液构象发生变化。结论通过碘–碘化钾反应、刚果红试验和圆二色谱法的结合可更加全面地了解苦豆子多糖溶液的构象。

胶原蛋白海绵的生物特性及体内降解吸收

背景：胶原蛋白海绵适用于各种损伤创面的止血修复及残腔填充，具有广泛的临床应用和科学研究价值。目的：研究胶原蛋白海绵的生物特性及其在动物体内的生物相容性和降解情况。
　　方法：通过扫描电镜测定胶原蛋白海绵的空间结构、孔径和孔隙率，透射电镜观察其构象，圆二色谱法分析其二级结构及变性温度。在新西兰白兔脊柱侧肌肉内植入胶原蛋白海绵，组织病理切片观察海绵降解吸收情况。
　　结果与结论：胶原蛋白海绵具有疏松多孔结构，孔径分布为40-150μm，平均100μm，孔壁1μm左右，孔隙率约95.8%，具有典型的多孔材料结构，胶原具有周期性横纹区带。胶原蛋白溶液在220，206 nm处分别有一正、负峰，具有典型的胶原蛋白三螺旋结构特征；胶原蛋白海绵与胶原溶液具有相似的二级结构及热稳定性。胶原蛋白海绵植入肌肉第4周开始降解，至第12周胶原蛋白海绵可见率为20%左右；植入2周后胶原蛋白海绵周围局部组织出现异物刺激及炎症反应，随创面愈合，炎症反应逐渐减轻并消失，在整个材料植入和降解周期内无明显纤维囊结构形成，植入部位未见组织坏死情况发生。表明胶原蛋白海绵具有良好的生物活性、生物相容性及降解性能。

应用圆二色谱法验证银杏内酯的绝对构型及银杏提取物的化学成分

目的 验证银杏内酯A、B的绝对构型,并对银杏提取物的化学成分进行研究.方法 应用圆二色谱法并依据Klyne内酯八区-扇形区律对银杏内酯A、B的绝对构型进行分析讨论;采用反复硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、高效液相色谱、重结晶等方法分离化学成分.1H-NMR、13C-NMR等方法进行结构鉴定.结果 从银杏提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为:芫花素(genkwanin,1)、异鼠李素(isorhamnetin,2)、山奈酚(kaempferol,3)、槲皮素(quercetin,4)、白果内酯(bflobMide,5)、银杏内酯A(ginkgolide A,6)、银杏内酯B(ginkgohde B,7)、银杏内酯C(ginkgolide C,8)、芦丁(rutin,9)、β-谷甾醇(β-sitosterol,10)、胡萝卜苷(daueosterol,11).结论 银杏内酯A、B的绝对构型与文献报道相符.

现场紫外圆二色谱薄层光谱电化学方法研究DNA在电还原过程中的构象转变

Ca2+离子对榛子过敏原Cor h1二级结构和抗原活性影响研究

目的:研究Ca2+离子对非CaBPs 蛋白类过敏原二级结构和抗原活性的影响.方法:以重组榛子主要过敏原Cor h 1为研究对象,用圆二色谱(CD)研究了系列浓度的Ca2+和EDTA各自存在情况下,不同蛋白浓度溶液中rCor h 1二级结构的变化及规律,并以榛子过敏患者血清为一抗,用ELISA实验分析了Ca2+和EDTA对rCor h 1抗原活性的影响.结果:在高浓度rCor h 1溶液中Ca2+的加入可以引起椭圆率的增加,而在低浓度的rCor h 1溶液中则引起椭圆率的降低;EDTA在高浓度和低浓度的rCor h 1溶液中均能引起rCor h 1二级结构相对含量的降低;椭圆率增加(或降低)的幅度与Ca2+、EDTA终浓度成正比.ELISA实验表明Ca2+和EDTA都能显著降低rCor h 1的抗原活性.结论:Ca2+离子可以显著影响rCor h 1的二级结构,降低其抗原活性,为非CaBPs蛋白类低致敏原的研究奠定了较好的前期研究基础.

艾塞那肽溶液的稳定性考察

采用高效液相色谱法(HPLC)和圆二色谱法(CD)考察了pH值、温度、糖类化合物和锌离子等对艾塞那肽溶液稳定性的影响.结果表明,当磷酸盐缓冲液(PBS) pH值为4.0、7.4时,37℃放置10d时艾塞那肽降解了18％和77％;pH 7.4 PBS于25℃放置10d时,艾塞那肽降解了33％,4℃放置10d则无明显降解.添加与药物质量比为1∶1的海藻糖或蔗糖、或添加低浓度锌离子可使艾塞那肽溶液的热变性温度从72.8℃分别提高至94.9、83.0和85.0℃.本研究表明pH值偏中性或温度升高,会使艾塞那肽稳定性降低,而添加海藻糖、蔗糖或锌离子可提高其稳定性.

抗菌肽Plectasin的新型体外折叠方法与活性鉴定

在体外条件下,通过体外折叠体系折叠化学合成的Plectasin,经过HPLC纯化及圆二色谱仪(CD)进行结构鉴定.以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(M RSA),耐万古霉素肠球菌(VREF)及耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)为实验菌株,用微量肉汤稀释法测定Plectasin对耐药菌的小抑菌浓度(MIC).结果:经体外折叠的Plectasin通过HPLC进行纯化,样品峰约在44.8 min出现,回收率约15％;圆二色谱鉴定显示,折叠后的Plectasin分子结构与折叠前不同,和天然构象类似;折叠活化的Plectasin对MRSA、VREF及PRSP的MIC分别为28,14,28 μg/mL.通过体外折叠体系折叠化学合成的Plectasin抗菌肽,能使其获得与天然构象相当的抗菌活性.