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艾塞那肽溶液的稳定性考察
采用高效液相色谱法(HPLC)和圆二色谱法(CD)考察了pH值、温度、糖类化合物和锌离子等对艾塞那肽溶液稳定性的影响.结果表明,当磷酸盐缓冲液(PBS) pH值为4.0、7.4时,37℃放置10d时艾塞那肽降解了18％和77％;pH 7.4 PBS于25℃放置10d时,艾塞那肽降解了33％,4℃放置10d则无明显降解.添加与药物质量比为1∶1的海藻糖或蔗糖、或添加低浓度锌离子可使艾塞那肽溶液的热变性温度从72.8℃分别提高至94.9、83.0和85.0℃.本研究表明pH值偏中性或温度升高,会使艾塞那肽稳定性降低,而添加海藻糖、蔗糖或锌离子可提高其稳定性.
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Ⅱ型胶原蛋白的热稳定性、圆二色性和红外光谱研究
目的 以蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白为材料,分析Ⅱ型胶原蛋白的热稳定性、圆二色性和红外光谱特性.方法 采用限制性酶解法分离蓝鲨软骨Ⅱ型胶原蛋白,通过SDS-PAGE、DSC、CD、IR分析Ⅱ型胶原蛋白的相对分子质量、热变性温度、二级结构特征和红外光谱特征.结果 蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白是由相对分子质量为130 kDa的α1链构成；蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白的热变性温度为40.5℃,[Na+]和[H+]改变了胶原蛋白的热稳定性；蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白在3411、3008、1648、1549 cm-1有红外特征性吸收峰；蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白以β-折叠为主,占主链的36.9％,接近于全β型三级结构,[H+]将改变Ⅱ型胶原蛋白的二级结构元件构成,使其β-折叠消失,出现少量的α-螺旋,Ⅱ型胶原蛋白肽链转变成无规卷曲.结论 蓝鲨Ⅱ型胶原蛋白是典型的纤维状蛋白质,具有作为生物功能物质的优良生物化学特性.
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枝化状聚乙二醇对牛跟腱Ⅰ型胶原结构与构象稳定性的影响
目的 观察枝化状聚乙二醇对牛跟腱Ⅰ型胶原结构与构象稳定性的影响.方法 以牛跟腱Ⅰ型胶原为原料,以枝化状聚乙二醇为交联剂,在有效交联的前提下,通过测定羟脯氨酸含量观察聚乙二醇交联对胶原酶解稳定性的影响,采用示差扫描量热法(DSC)观察胶原热变性温度,采用圆二色光谱法(CD)观察聚乙二醇对胶原三螺旋构象稳定性的影响.结果 枝化状聚乙二醇交联组24 h降解率为26.79%,而对照组则达97.39%,两者比较差异有统计学意义(P＜0.05).交联组热变性温度为(79.1±1.2)℃,与对照组(68.6±1.9)℃比较,差异有统计学意义(P＜0.05);CD谱测定特征性吸收峰差异无统计学意义(P＞0.05).结论 枝化状聚乙二醇可显著提高其热变形温度和抗酶性分解能力,而对其三螺旋结构与构象无明显不利影响,是较理想的生物高分子交联剂,可有望用于胶原分子的交联改性.
