酒精对人牙周膜细胞RANKL/OPG基因表达的影响

目的 研究酒精对人牙周膜细胞RANKL和OPG表达的影响.方法 酶消化法结合组织块法分离培养人牙周膜细胞,取4-6代细胞,在0.05 mol/L、0.10 mol/L、0.20 mol/L等不同浓度酒精环境下培养6、12、24、48h,RT-PCR检测RANKL、OPG mRNA的表达.采用SPSS 18.0软件包,对数据进行单因素方差分析.结果 0.05 mol/L、0.10 mol/L、0.20 mol/L浓度实验组RANKL mRNA表达量均高于对照组,具有统计学差异(P＜0.05),并且随着酒精浓度的升高,RANKL mRNA表达逐渐升高.0.05 mol/L、0.10 mol/L、0.20mol/L浓度实验组OPG mRNA表达量均低于对照组,具有统计学差异(P＜0.05),并且随着酒精浓度的升高,OPG mRNA的表达逐渐下降.结论 不同浓度的酒精可以影响人牙周膜细胞中RANL和OPG mRNA表达,在牙周炎骨吸收中起促进作用.

中药双黄补对人牙周膜细胞在玉米醇溶蛋白支架材料上黏附生长及增殖的影响

目的 研究中药双黄补对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)在玉米醇溶蛋白(Zein)支架材料上黏附生长及增殖的影响,探讨双黄补-Zein作为一种复合支架材料应用于牙周组织工程的可行性.方法 采用组织块法体外培养HPDLCs,水提醇沉法制备双黄补煎液,溶剂浇铸/粒子沥滤法制备Zein支架,制备Zein支架浸提液并用其配制50、100、150、200、500、1 000 μg/mL浓度的双黄补培养液.分别设不同浓度双黄补组、Zein支架浸提液组及细胞对照组.MTT法检测各组对HPDLCs增殖的影响;根据MTT检测结果,选取佳浓度(100 μg/mL)双黄补作为实验组,10% FBS的DMEM培养液作为对照组,倒置相差显微镜及扫描电镜观察双黄补对HPDLCs在Zein支架材料上细胞形态的影响.结果 与Zein支架浸提液组及细胞对照组比较,不同浓度双黄补均能促进HPDLCs的增殖,且以100 μg/mL浓度的双黄补促增殖作用明显(P<0.01);Zein支架浸提液组与细胞对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),但其细胞增殖率为正值;形态学观察结果显示HPDLCs在Zein支架上生长良好,且在双黄补作用下Zein支架上的HPDLCs数目较多,形态较好.结论 双黄补能促进HPDLCs在Zein支架上的黏附生长及增殖.双黄补-Zein作为一种复合支架材料应用于牙周组织工程具有可行性.

牙龈卟啉单胞菌感染对人牙周膜细胞的增殖与成骨分化及炎性因子的影响

目的 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porph yromonas gingivalis,P.gingivalis)感染对人牙周膜细胞(hPDLCs)的增殖、成骨分化及白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎性因子表达的影响.方法 选择2016年1月-2017年6月通过临床取材获得并培养在医院因正畸减数治疗拔除的12～26岁受试者的健康前磨牙25颗进行研究.分离与培养hPDLCs,实验组加入P.gingivalis培养,对照组未加入P.gingivalis.观察两组细胞形态学变化;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测P.gingivalis对hPDLCs增殖的影响;分另别将hPDLCs和P.gingivalis感染的hPDLCs进行矿化诱导,提取RNA,检测Runx2、IL-6、IL-8、TNF-α mRNA表达的差异.结果 P.gingivalis可侵入hPDLCs并得以存活,并使细胞形态发生改变;P.gingivalis感染hPDLCs1-7d后,对hPDLCs细胞增殖并未产生影响.矿化诱导21d后,形成矿化结节.经逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测P.gingivalis感染的hPDLCs中Runx2 mRNA的表达受到抑制,而IL-6、IL-8、TNF-α等炎性因子mRNA相对表达量均高于对照组(P＜0.05).结论 P.gingivalis对hPDLCs的增殖未发现有抑制作用;但可影响成骨分化功能及促炎性因子的表达水平.

牙龈卟啉单胞菌牙龈蛋白酶K对人牙周膜细胞增殖的影响

目的 探讨牙龈卟啉单胞菌牙龈蛋白酶K对人牙周膜细胞增殖的影响.方法 组织块法体外培养人牙周膜细胞,不同浓度的牙龈蛋白酶K作用于人牙周膜细胞24h,对照组为无牙龈蛋白酶K作用的人牙周膜细胞.浓度为12.5μg/ml牙龈蛋白酶K分别作用于人牙周膜细胞24、48、72、96h,对照组也培养相同的时间.采用MTT法检测人牙周膜细胞的增殖,比较实验组与对照组人牙周膜细胞增殖的变化,数据采用单因素方差分析及独立样本t检验.结果 牙龈蛋白酶K浓度在6.25～50 μg/ml时,作用24h,实验组人牙周膜细胞的增殖低于对照组;牙龈蛋白酶K浓度为12.5μg/ml,作用24～96h,实验组人牙周膜细胞的增殖低于对照组,有显著性差异.结论 牙龈卟啉单胞菌牙龈蛋白酶K可抑制体外培养的人牙周膜细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性.

淫羊藿苷抑制牙龈卟啉单胞菌超声提取物对人牙周膜细胞增殖及骨保护素表达的影响

目的 探讨不同浓度淫羊藿苷抑制牙龈卟啉单胞菌超声提取物对人牙周膜细胞增殖及骨保护素(OPG)表达的影响.方法 体外培养人牙周膜细胞,用四唑盐(MTT)法检测不同浓度淫羊藿苷(0、0.001、0.01、0.1、1 μg/ml)及50μg/ml牙龈卟啉单胞菌超声提取物,不同时间(24、48、72h)作用下人牙周膜细胞的增殖水平.用RT-PCR及Western blot检测48h人牙周膜细胞骨保护素mRNA和蛋白的表达.结果 淫羊藿苷从0.01～1μg/ml对人牙周膜细胞增殖及骨保护素mRNA和蛋白的表达有促进作用(P＜0.01),浓度为0.1μg/ml作用显著.结论 淫羊藿苷可抑制牙龈卟啉单胞菌超声提取物对人牙周膜细胞增殖及骨保护素mRNA和蛋白表达的影响,促进人牙周膜细胞增殖及骨保护素mRNA和蛋白表达.

比较间歇性和持续性牵张力对人牙周膜细胞成骨样细胞分泌活性的影响

目的本研究比较间歇性和持续性牵张力对体外培养的人牙周膜细胞成骨样细胞分泌活性的影响.方法第3～7代人牙周膜细胞,传代至附着膜上,选择以3周/分的频率间歇加力2、4、6小时和持续加力2、4、6小时,附着膜受牵张大小为1%,收集条件培养基放射免疫检测骨钙素(OCN),生化检测碱性磷酸酶(ALP).结果间歇和持续牵张力的作用对牙周膜细胞的影响不同,有一定的规律.ALP、OCN的分泌,两种力作用下都有短暂和小幅的升高,间歇力组升高幅度更大,随加力时间的延长,细胞表达这几种分子的能力下降,持续力组下降早于间歇力组,下降幅度也较后者大.结论间歇牵张力对牙周膜细胞的作用较持续力组明显和持久,提高人牙周膜细胞成骨样细胞的分泌活性.

硫化氢在模拟正畸力作用下对牙周膜细胞Runx2表达的影响

目的 模拟正畸力作用下,观察不同浓度硫化氢(Hydrogen Sulfide,H2S)对人牙周膜细胞成骨相关因子Runx2表达的影响.方法 对人牙周膜细胞分别施加5％循环张力0、6、12、24、48h,通过Real-time PCR及Western blot检测成骨因子Runx2的基因及蛋白表达;观察加力与不加力时不同浓度H2S对Runx2基因表达的影响.并通过Western blot检测p38-MAPK信号蛋白的变化.结果 加力后Runx2基因表达升高,在加力24 h时高;不论加力与否,H2S浓度为50 μM时促进成骨因子Runx2升高作用明显;加力24 h,H2S浓度为50 μM时,检测信号蛋白p38-MAPK磷酸化水平明显升高.结论 在模拟正畸力作用下,H2S可引起人牙周膜细胞成骨因子Runx2表达升高,并且p38-MAPK信号通路参与H2S引起人牙周膜细胞成骨因子Runx2表达升高这一过程.

H2S在模拟正畸力作用下对人牙周膜细胞内ALP表达的影响

目的 研究模拟临床正畸力的张力作用下,人牙周膜细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)在不同浓度硫化氢(H2S)的刺激下,mRNA及蛋白表达的变化.从而探索气体信号分子H2S调控牙周组织改建的机理,为进一步的临床应用研究打下基础.方法 组织块法原代培养人牙周膜细胞(hPDLCs),传代培养并进行细胞来源鉴定.以不同浓度H2S对hPDLCs处理24 h及采用基底形变加载方式对hPDLCs施加张力1、3、6h,采用qRT-PCR和Western blotting检测hPDLCs内ALP的表达变化.结果 hPDLCs内ALP的mRNA水平和蛋白水平在H2S处理24 h后及张力处理1、3、6h后均升高,且在张力作用下更为明显(P＜0.05).结论 在相对较短的时间段内,H2S可上调ALP的mRNA和蛋白水平的表达.

体外培养的人牙周膜细胞成骨样细胞表型特征的研究

目的对体外培养的人牙周膜细胞成骨样细胞的表型特征进行研究探讨.方法组织块法培养人牙周膜细胞,放射免疫法检测条件培养基中碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)的分泌活性,免疫组化法检测非分泌型的ALP和OCN的表达,原位杂交方法检测二者的mRNA水平的表达.结果人牙周膜细胞具有成骨细胞的部分表型,碱性磷酸酶在蛋白水平包括分泌和非分泌型及基因转录水平都有一定的表达,随培养时间的变化不大;而不具有成熟的成骨细胞的表型特征--骨钙素的表达,其无论是在基因和蛋白水平都没有表达.这一结果为进一步研究人牙周膜细胞在机械力作用下参与骨改建打下基础.

微RNA-146a反转牙龈卟啉单胞菌脂多糖对人牙周膜细胞成骨的抑制作用

目的 探讨微RNA-146a(microRNA-146a,miR-146a)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激下人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)成骨分化的影响及机制,为牙周组织工程学研究提供实验依据.方法 体外培养hPDLC,诱导成骨分化,将细胞分为5组:含5％胎牛血清的α-微量伊格尔培养基培养的hPDLC(非成骨分化培养组);成骨分化液培养的hPDLC(成骨分化培养组);成骨分化液+1 mg/L Pg LPS处理的hPDLC(LPS组);成骨分化液+1 mg/L Pg LPS+miR-146a模拟物处理的hPDLC(LPS+miR-146a模拟物组);成骨分化液+1 mg/L Pg LPS+miR-146a阴性对照处理的hPDLC(LPS+miR-146a阴性对照组),每组设5个复孔.通过实时荧光定量PCR和茜素红染色法分别检测成骨标志物和矿化,同时应用非放射性转录因子检测hPDLC的核提取物中核因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)p65的核活性.结果 与成骨分化培养组相比,LPS组hPDLC中Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor-2,RUNX2)和骨钙蛋白水平显著降低(P<0.05);Pg LPS可以抑制矿化能力,刺激NF-κB p65的核转录活性的表达(成骨分化培养组:1.023±0.217,LPS组:6.252±0.613,P=0.008);与LPS+miR-146a阴性对照组相比,LPS+miR-146a模拟物组第3天检测到hPDLC中除ALP(P=0.167)和RUNX2(P=0.580)外,Ⅰ型胶原(P=0.007)和骨钙蛋白mRNA(P=0.049)的表达均显著增加;第7和14天时Ⅰ型胶原、ALP、RUNX2和骨钙蛋白mRNA水平均显著增加(P<0.05),并可以增强矿化能力,同时miR-146a模拟物可显著降低Pg LPS诱导的hPDLC中NF-κB p65的核转录活性(LPS+miR-146a模拟物组:2.427±0.354;LPS+miR-146a阴性对照组:5.863±0.482,P=0.019).结论miR-146a可以通过促进hPDLC中成骨标志物的表达和抑制炎症通路,逆转Pg LPS对hPDLC成骨分化的抑制作用.

骨化三醇对人牙周膜细胞维生素D受体、RANKL和骨保护因子表达的调节

目的 探讨骨化三醇(又称1α,25-二羟维生素D3,以下简称VD3)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand,RANKL)和骨保护因子(osteoprotegerin,OPG)表达的调节作用及相关机制.方法 原代培养12个供体来源的hPDLC群,传代培养至第3代,分别以10-8 mol/L VD3(VD,组)和0.1%无水乙醇处理(对照组),6 d后用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测VDR、RANKL和OPG mRNA的表达水平.分析12个细胞群RANKL基因转录起始位点上游调控区DNA碱基序列.结果 VD3组与对照组相比,VDR mRNA表达水平显著上调(P=0.003),为对照组的(3.04±1.06)倍;RANKL mRNA表达水平显著升高(P=0.001),为对照组的9.82(0.75～119.18)倍;OPG mRNA表达水平为对照组的(94.48±39.15)%,P=0.136;OPG/RANKL比值显著下调(P=0.003),为对照组的10.36%(1.01%～138.00%).未发现RANKL基因上游调控区序列突变位点;-1832(m7984870,C/G)多态性位点基因型与RANKL mRNA的表达和调节之间无显著相关性.结论 在hPDLC中,VD3可以促进VDR mRNA的表达;VD3可显著上调RANKL mRNA的表达从而降低OPG/RANKL比值,而对OPG mRNA的表达水平影响较小.在VD3作用下,细胞群间RANKL mRNA表达的差异性可能与RANKL基因上游调控区碱基序列无关.

淫羊藿苷对人牙周膜细胞表达核因子κB受体激活蛋白配体和护骨因子的影响

目的 研究淫羊藿苷对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)超声提取物作用于人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)表达核因子κB受体激活蛋白配体(receptor activator nuclear factor-κB ligand,RANKL)和护骨因子的影响.方法 选取11～18岁因正畸拔除的前磨牙14颗,酶消化法培养hPDLC,取第7代hPDLC,将其分为6组,每组分别加入质量浓度为0(Pg提取物组)、0.001、0.01、0.1和1 mg/L的淫羊藿苷(不同质量浓度淫羊藿苷组)及50 mg/L的Pg超声提取物,空白对照组为单纯培养基,48 h后反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)及蛋白质印迹法检测RANKL和护骨因子的表达.用重复测量的方差分析比较各组间的差异,组间两两比较采用LSD-t检验,以单侧P＜0.05为差异有统计学意义.结果 Pg提取物组的RANKL表达(3.60±0.11)较空白对照组(1.08±0.19)上升,护骨因子表达较空白对照组降低[分别为(0.32±0.08)、(1.01±0.08)],RANKL/护骨因子比值较空白对照组显著上升[分别为(11.20±0.13)、(1.00±0.10)].0.001、0.01、0.1、1 mg/L淫羊藿苷组RANKL及护骨因子表达与空白对照组相比均有改变,0.1 mg/L淫羊藿苷组护骨因子表达(36.84±0.05)显著高于空白对照组,RANKL/护骨因子比值(0.04±0.03)显著低于空白对照组(P＜0.01).结论 质量浓度为0.1 mg/L的淫羊藿苷能够抑制Pg超声提取物对hPDLC RANKL的表达,促进护骨因子的表达.

银杏叶提取物对脂多糖作用下人牙周膜细胞增殖及分泌细胞因子的影响

目的 观察银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,GBE)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用下人牙周膜细胞(periodental ligament cell,PDLC)增殖及分泌白细胞介素(interleukin,IL)6、IL-1β及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响,为GBE在牙周病防治中的应用提供依据.方法 选取2010年5至7月在遵义医学院附属口腔医院口腔颌面外科门诊因正畸拔除的10例11 ～15岁患者的20颗前磨牙,采用改良组织块培养法体外原代培养人PDLC,实验共分5组:①阴性对照组,含10 ml/L胎牛血清的达尔伯克改良伊格尔培养基(Dulbecco's modified Eagle's medium,DMEM)培养液；②LPS组,含10 ml/L胎牛血清的DMEM培养液+100 mg/L LPS；③LPS+0.1 g/L GBE组,含10 ml/L胎牛血清的DMEM培养液+100 mg/L LPS+0.1g/L GBE；④LPS+0.01 g/L GBE组,含10 ml/L胎牛血清的DMEM培养液+100 mg/L LPS +0.01 g/L GBE;⑤LPS+地塞米松组,含10 ml/L胎牛血清的DMEM培养液+100 mg/L LPS+2 mg/L地塞米松.甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法测定GBE对LPS作用下人PDLC活性的影响,酶联免疫吸附测定法测定各组IL-6、IL-1β及TNF-α的含量,对所得结果分别进行单因素方差分析,采用LSD-t检验进行组间两两比较,检验水准为双侧α=0.05.结果 实验12、24、48及72 h,LPS+0.1 g/L GBE组的吸光度值(分别为0.30±0.03、0.33±0.02、0.34 ±0.02及0.35 ±0.02)均显著高于LPS组(分别为0.20±0.03、0.20±0.02、0.22±0.04及0.24±0.02)(P＜0.05),PDLC IL-6、IL-1 β及TNF-α的分泌量均显著低于LPS组(P＜0.05)；实验12、24、48及72 h,LPS+0.01 g/L GBE组吸光度值(分别为0.27±0.05、0.31 ±0.03、0.33±0.03及0.32 ±0.01)均显著高于LPS组(P＜0.05),PDLC IL-6、IL-1β及TNF-α的分泌量均显著低于LPS组(P＜0.05).结论 GBE对LPS作用下的人PDLC有保护作用.

17-β雌二醇对牙龈卟啉单胞菌作用下人牙周膜细胞表达白细胞介素6、8的影响

目的 观察17-β雌二醇(estradiol,E2)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg) W83作用下人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)白细胞介素(interleukin,IL)6和IL-8表达的影响.方法 原代培养hPDLC,传至第4代,分别以①10-10 mol/L E2(E21组)；②10-7 mol/L E2(E22组)；③感染复数为10∶1的Pg( Pg1组)；③感染复数为100∶1的Pg(Pg2组)；⑤感染复数为100∶1的Pg+ 10-10 mol/L E2(Pg2 +E21组)；⑥感染复数为100∶1的Pg+10-7 mol/LE2(Pg2+ E22组)处理hPDLC 12和24h;以0.1％无水乙醇为对照组,酶联免疫吸附测定法榆测细胞IL-6和IL-8蛋白的表达水平,实时荧光定量反转录聚合酶链法检测24 h mRNA水平.采用单因素方差分析比较各组IL-6、IL-8蛋白和mRNA表达水平的组间差异,小显著性差异事后比较检验进行组间差异的两两比较,采用独立样本t检验分析各组12和24 h IL-6、IL-8表达水平的差异,检验水准为双侧α=0.05.结果 Pg2组24h时IL-6蛋白表达水平[(2482.88±26.53) ng/L]显著高于Pg1组[(734.09±87.90)ng/L]、对照组[(425.8±77.25) ng/L]和12 h时的Pg2组[(1157.50±234.65) ng/L,P=0.000]；Pg2组24 h时IL-8蛋白表达水平[(4965.81±1072.55) ng/L]显著高于Pg1组[(803.51 ±162.08) ng/L,P=0.007]、对照组[(400.75±2.27) ng/L,p=0.005]和12h时的Pg2组[(1431.12 ±82.78)ng/L,P=0.001].E2对hPDLC IL-6和IL-8的表达无显著调节作用.与感染复数100∶1的Pg单独作用相比,E2和Pg联合处理24 h显著促进了hPDLC IL-6的表达水平,而未影响IL-8的表达水平:Pg2 +E21组、Pg2+ E22组IL-6 mRNA相对于磷酸甘油醛脱氢酶的表达水平(分别为0.49±0.15、0.53±0.16)显著高于Pg2组(0.19±0.06) (P =0.021,P=0.036),两组IL-6蛋白水平[分别为(5512.66±1022.07)、(6988.78±2279.13) ng/L]亦显著高于Pg2组[(3138.46±183.72) ng/L](P=0.012,P=0.000).结论 PgW83促进hPDLC IL-6和IL-8的表达呈剂量和时间依赖性；无牙周致病菌感染时E2对hPDLC IL-6和IL-8的表达无显著调节作用；而在牙周感染Pg时E2可能与Pg协同直接促进hPDLC产生IL-6,从而可能促进了牙周炎症过程.

机械牵张力对人牙周膜细胞成骨样细胞功能的影响

人牙周膜细胞在弹性牵张力作用下核心结合因子mRNA的表达

目的探讨人牙周膜细胞在应力作用下的成骨特性及核心结合因子(corebinding factor a 1 ,cbfa1)在正畸成骨和正畸牙齿移动中的作用机制.方法体外原代培养新生 SD 大鼠颅骨成骨细胞,进行大鼠 cbfa1 cDNA 片段的克隆和序列测定,制备大鼠cbfa1 cDNA 探针.人牙周膜细胞在弹性膜上体外培养,采用体外培养细胞加载系统加载弹性牵张力.用原位杂交方法检测 cbfa1 mRNA 的表达.结果正常对照组不加力的人牙周膜细胞未检测到 cbfa1 mRNA 阳性表达,实验组加载弹性牵张力的人牙周膜细胞出现cbfa1 mRNA 阳性表达.结论弹性牵张力可以诱导人牙周膜细胞向成骨样细胞分化;cbfa1 作为转录因子是正畸成骨的调控途径之一.

周期性牵张力调节人牙周膜细胞成骨相关基因表达的研究

目的 探讨牵张力诱导体外培养的人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLC)成骨分化的基因调控机制.方法 通过体外细胞加载系统对培养的人牙周膜细胞施加12%形变率、6周/min的周期性牵张力48 h,使用点样数为96点的人骨再生基因表达谱芯片检测周期性牵张力加载组细胞成骨相关基因表达的变化.结果 HPDLC在周期性牵张力作用下有21种成骨相关基因的表达明显升高,包括10种生长因子和相关分子,10种细胞外基质和相关蛋白,1种细胞黏附分子.有2种基因表达明显下降,包括1种生长因子和相关分子,1种细胞黏附分子.结论 周期性牵张力作用于体外培养的HPDLC,可以通过调节部分成骨相关基因的表达,诱导牙周膜细胞的成骨分化.

周期性张应力对人牙周膜细胞生物学活性的影响

目的:探讨周期性张应力对体外培养的人牙周膜细胞生物活性的影响.方法:对体外培养的人牙周膜细胞施加不同大小的周期性牵张力(6%、12%、20%细胞表面拉伸率),24h后检测其对细胞的总蛋白合成、ALP活性、Col-Ⅰ和OCN分泌的影响.实验结果用SPSS 13.0进行统计分析.结果:较小的牵张力对人牙周膜细胞生物活性无显著影响,随力值的增大,牵张力能够呈强度依赖性抑制人牙周膜细胞的活性,减少总蛋白合成及ALP活性,抑制Col-Ⅰ及OCN的分泌.结论:周期性张应力可以抑制人牙周膜细胞的生物学活性,并呈强度依赖性.

转化生长因子-β1和神经生长因子对人牙周膜细胞增殖的生物学作用

目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)与神经生长因子(NGF)以及两者联用时对人牙周膜细胞(PDLC)增殖的生物学作用,为牙周损伤后修复提供理论依据.方法:采用方差分析的方法对不同浓度的TGF-β1与NGF以及两者联用时的生物学作用进行分析.结果:TGF-β1、NGF单独作用后,PDLC较对照组增殖较快(P<0.05),而两者联合作用后的增殖作用较各自单独应用的作用更显著.结论:TGF-β1、NGF两者以佳效应浓度联合应用具有协同作用.

力与炎症因子对牙周膜细胞破骨调控因子表达的影响

目的 观察力信号和炎症因子在牙周膜细胞向破骨细胞分化过程中对功能蛋白表达的影响.方法 收集因正畸治疗需要拔除的无龋前磨牙,体外培养人牙周膜细胞,分别对其施加5％基底型变量的周期性牵张力和白细胞介素(IL)-1β、-6、-23和肿瘤坏死因子(TNF)α等炎症因子刺激,Western blot检测施加刺激0、2、4、8、12、24 h后骨代谢相关调控因子骨保护素(OPG)和细胞因子κB受体激动剂配体(RANKL)的蛋白表达情况.结果 炎症因子对牙周膜细胞破骨向因子表达有促进作用,而周期性牵张力能够抑制破骨调控因子的表达,两者共同作用时破骨向因子呈现高表达状态.结论 炎症因子对破骨向调控因子有促进作用,而周期性牵张力抑制破骨的作用无法抵消这一过程.