首页 > 文献资料
-
两种提取石蜡包埋组织DNA方法的比较
从石蜡包埋组织提取组织DNA的质量是关系到PCR是否成功的关键因素之一,我们对Thomais等人提出的方法与传统酚-氯仿抽提法从石蜡包埋组织提取组织DNA进行了比较,并加以评价.
-
多普勒组织成像技术在冠心病诊断中的应用
多普勒组织成像(Doppler tissue imaging,DTI)技术于1992年由Mc Dicken等人所提出 [1],其显示方式有5种;即速度图、加速度图、能量图、频谱和M型模式.其中频谱显示模式(pulsed wave Doppler tissue imaging,PW-DTI)是目前临床上研究应用比较广泛的一种.它是直接从心肌组织提取低频、高振幅的多普勒信号,实时、定量的反映心肌运动速度和方向.其定量测定的指标有:1.心肌运动速度;2.PW-DTI的E/A比值;3.心肌运动速度阶差;4.二尖瓣环运动速度;5.时间间期.将这些指标的改变进行临床综合分析,就可对室壁的运动作出定性和定量诊断,同时来评价心功能情况.
-
认识一下老朋友,胰岛素
胰岛素的分类按胰岛素的来源分类1.动物胰岛素:是从动物的胰腺组织提取的胰岛素,纯化去掉其杂质及其他蛋白质成分而得到.当动物胰岛素注射到人体内,人体会对它们产生免疫反应,造成血糖控制不稳,少数患者免疫反应较严重,可出现皮疹、发热、全身发痒,甚至血压下降、休克等.动物胰岛素的优点就是价格便宜,患者在经济上容易接受.
-
黑素细胞移植治疗白癜风现状
2001年,Zuk等[1]以外科切除或脂肪抽吸方式获得的人或大鼠脂肪组织为研究对象,经消化离心等简单处理脂肪组织后获得一个显微镜下呈成纤维细胞形态的细胞群,称为脂肪组织提取细胞(processed lipoaspirate cells,PLA).
-
X-连锁脊柱骨骺发育不良家系孕早期产前诊断一例
2007年本实验室对1例X-连锁脊柱骨骺发育不良家系(X-linked spondyloepiphyseal dysplasia tarda,X-SEDL)进行基因诊断[1],确诊该家系的先证者(图1:I:1)为位于染色体Xp22.2的SEDL基因的4号外显子c.209G>A突变致病,其女儿(图1:Ⅱ:1)为该致病基因突变携带者(c.209G/A杂合突变).2008年,该女性携带者于妊娠19周时曾在本院对胎儿(图1:Ⅲ:1)采集的羊水细胞进行基因诊断,证实为男性胎儿伴遗传突变基因而引产.此次妊娠11周时要求在孕早期对胎儿(图1:Ⅲ:2)进行产前诊断.签署手术知情同意书后,行绒毛膜穿刺术取绒毛组织.部分绒毛组织标本经常规细胞培养、收获制片后G显带染色体核型分析.部分绒毛组织提取基因组DNA,进行Y染色体性别决定基因(sex determining region of Y chromosome,SRY)检测,判断性别,聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)条件参照文献[2].参照相关研究[1]直接PCR扩增SEDL基因4号外显子,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳、回收纯化后进行DNA序列分析.同时选择Xp22区域内位于SEDL基因附近的4个短串联重复(shorttandemrepeat,STR)位点(包括DXYS10085、DXYS10092、DXYS10093和DXYS233)进行PCR扩增检测,PCR扩增引物及反应条件见参考文献[3],进行单体型分析.
-
一种实验兔膝关节滑膜组织提取新方法
类风湿性关节炎( RA)典型病理表现之一为滑膜组织增生。成纤维样滑膜细胞( FLSs)在RA的发生、发展中发挥着重要作用。在原代FLSs体外培养过程中,滑膜组织提取成功与否是实验顺利进行的关键。以往兔膝关节滑膜组织提取大都是提起髌骨上下进行分离,在实验中我们发现将髌骨提起分离两侧及胫骨时需要将髌骨翻转,此时难以辨认关节囊内外层组织的解剖关系,致使分离困难,可能将纤维层混杂导致培养细胞纯度不高。本研究在此基础上进行改良,建立一种简单易行的提取方法并附图做详尽说明。
-
脑蛋白水解物致过敏性休克的抢救与护理
脑蛋白水解物为猪脑组织提取、分离、精制而得的无菌制剂,内含约16种游离氨基酸[1],并含少量肽,是一种大脑所特有的肽能神经营养药物,能以多种方式作用于中枢神经,调节和改善神经元的代谢,促进突触的形成,诱导神经的分化,并进一步保护神经细胞免受各种缺血和神经毒素的损害.本品可通过血脑屏障,促进脑内蛋白质合成,影响呼吸链,具有抗缺氧的保护力,改善脑内能量代谢,激活腺苷酸环化酶和催化其他激素系统[2],提供神经递质、肽类激素及辅酶前体.
-
胸腺肽治疗慢性乙肝34例疗效分析
胸腺肽是新生小牛胸腺组织提取制成的低分子多肽类激素,对慢性乙型肝炎的疗效已有报道.现就我院1997年以来使用小牛胸腺肽治疗慢性乙型肝炎34例,疗效报道如下.
-
热休克蛋白70肿瘤疫苗的研究进展
热休克蛋白(HSP)与免疫治疗的关系是近年来的研究热点之一.许多研究结果证实,从肿瘤组织提取HSP后免疫动物,可以诱导特异的抗肿瘤细胞CTL(cyto-toxicityT lymphocyte)反应,产生强大的杀瘤效应.HSP广泛存在于各种原核和真核细胞中.在正常生长条件下,各种细胞中HSP占细胞总蛋白含量的5%~10%,当细胞处于高温和应激情况时,HSP表达明显增高.人类各种肿瘤细胞比其相应的正常组织表达更高水平的HSP.HSP在各种属中高度保守,并与一些基本的细胞功能,如蛋白质转运、折叠和装配有关,又叫分子伴侣(molecular chaperone).根据分子量大小和氨基酸同源性可将HSP分为4组,即HSP90家族、HSP70家族、HSP60家族和低分子量HSP家族.不同的HSP存在于细胞的不同区域,因此在协助蛋白多肽的运送过程中,往往有多个HSP参与,形成一条级联传递路线.Udono H等[1]比较了Meth A瘤来源的gp96、HSP90、HSP70的免疫原性,认为gp96、HSP70的免疫原性比较高,而HSP90的免疫原性只是它们的10%.本文主要综述HSP70与肿瘤免疫的研究进展.1 HSP70的结构与作用机理
-
胸腺肽引起过敏性休克1例
胸腺肽系用健康小牛胸腺肽组织提取,含有生物活性的多肽激素,经精制制成的一种生物制剂.引起过敏实属少见,我们发现1例,现报告如下.
-
克雷伯氏肺炎杆菌内毒素诱导小鼠β-防御素-4基因表达及其信号转导
目的:从整体水平上探讨克雷伯氏肺炎杆菌内毒素诱导小鼠肺脏表达β-防御素的信号转导.方法:分别给予Toll受体蛋白-4基因发生点突变的小鼠C3H/HeJ及其野生型C3H/HeN腹腔注射LPS(4 mg/kg),于不同时间点采取气管、肺、肾等组织提取总RNA,用RT-PCR检测各组织β-防御素-3和/或β-防御素-4 mRNA表达,并对扩增出的cDNA片段进行测序;同步用Western blot法检测该两系小鼠肺脏I-κBα磷酸化状况(p-IκBα)和I-κBα的含量.结果:经LPS处理24 h后的C3H/HeN小鼠,其肺脏表达β-防御素-4 mRNA,而C3H/HeJ小鼠在相同条件下未见表达;与未给予LPS处理小鼠比较,经LPS处理4 h后,C3H/HeN小鼠肺组织p-IκBα含量明显增高;LPS处理后8 h,p-IκBα以及IκBα含量均呈减少趋势;至第24 h,p-IκBα和IκBα含量均明显减少,提示转录因子NF-κB活化.而在相同条件下,C3H/HeJ小鼠肺组织p-IκBα及IκBα含量均未见相应变化,提示克雷伯氏肺炎杆菌内毒素不能诱导TLR-4基因突变小鼠NF-κB和β-防御素基因的表达.结论:Toll/NF-κB信号转导通路介导克雷伯氏肺炎杆菌内毒素诱导小鼠肺脏表达β-防御素-4基因.
-
间充质干细胞的生物学特性、临床试验与应用现状
目的:自1976年人类间充质干细胞( mesenchymal stem cells, MSCs)首次被分离,MSCs的增殖与分化、分泌与调节及其免疫原性低的生物学特性逐渐被发现,并被广泛地应用于临床试验研究。2009年第一个MSCs药品prochymal正式上市,用于急性移植物抗宿主病( GVHD)和Crohn病治疗。本实验室从人不同组织提取MSCs,检测MSCs生物学特性,并探讨其在组织修复中的作用机制。方法:组织贴壁及消化法,从人胎盘、脐带、脐血、脂肪和牙髓组织提取MSCs;应用流式细胞术鉴定MSCs;通过诱导与共培养方法,检测MSCs分化能力;应用Western blot、免疫荧光、ELISA、组织芯片等技术检测MSCs的分泌功能。结果:不同组织来源的MSCs具有分化成内皮细胞、脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞和神经细胞的能力,并分泌VEGF、FGF、IGF-1、laminin 10、fibronectin、TGFβ1等生物活性蛋白,促进损伤血管、皮肤和神经修复。结论:MSCs及其分泌的生物活性蛋白可以作为种子细胞和(或)改善细胞微环境因素,被应用于临床疾病损伤修复、组织工程与再生医学领域。
-
HSS的研究进展
肝细胞刺激物质(HepaticStimulatorySubstance,HSS)是目前唯一能特异性地促肝细胞生长的小分子蛋白,由于其特异性地促肝细胞生长的活性[1],参与肝细胞再生的调控等,故一直是肝炎治疗、肝细胞调控的研究热点.HSS的分子量约为12~18KD,耐热,在PH2~9的环境中仍能保持其生物学活性;不溶于乙醇,对蛋白酶敏感,但核糖核酸酶不影响其活性,其二硫键、三级结构的破坏不影响其活性.HSS存在乳肝组织或再生肝组织的肝细胞胞浆中,在非肝细胞中未发现HSS.HSS是由肝细胞合成的,是肝细胞的基因表达产物,肝细胞膜上有相应的受体.目前已能从猪、牛、鼠等多种动物的乳肝组织及人胎肝组织提取出HSS,但尚不能通过基因重组的方法获得.本文对HSS的研究现状作一综述.
-
克雷伯氏肺炎杆菌内毒素诱导小鼠β-防御素-4基因表达及其信号传递
目的:用克雷伯氏肺炎杆菌内毒素(LPSlipopolysacchride)分别处理Toll受体蛋白-4基因发生点突变的小鼠C3H/HeJ及其野生型C3H/HeN,从整体水平考察其对小鼠β——防御素表达的影响及其相关的信号传导通路.方法:分别给予C3H/HeJ和C3H/HeN腹腔注射LPS(4mg/kg),于不同时间点采取气管、肺、肾等组织提取总RNA;用RT-PCR检测各组织β-防御素-3和/或β-防御素-4L Mrna表达,并对扩增出的Cdna片段进行测序;
-
自体脂肪移植中脂肪组织提取及体外处理的进展
自体脂肪组织作为常用的软组织填充材料,其生物相容性优于人工组织代用品、异体及异种材料,没有免疫排斥现象,其来源广泛,获得方便,成本低廉.Neuber在1893年完成了第1例用多个自体游离的小脂肪块填充软组织缺损的脂肪移植手术并取得满意的疗效,20世纪初脂肪移植手术甚为流行,但随着1965年液态硅胶注射技术的问世,自体游离脂肪移植的应用随之有所降温.
-
SDF-1/CXCR4轴在骨髓间充质干细胞研究中的作用
1简介
早期在骨髓中发现存在少量非造血干细胞的多能干细胞[1]。这就是后来命名的间充质干细胞(MSC),对其的研究不仅仅集中在研究该细胞的生理学特性,同时集中在以MSC为基础的临床治疗方案设计上。至今已有近400个MSC为基础的临床注册实验研究治疗多种疾病。早发现的MSC是从骨髓提取的,但是后来研究发现在很多组织都可以提取MSC,包括胎盘,脐带,脐带血、脂肪等部分[2,3]。由于缺乏特异性标记或表面分子,这些MSC只是被定义为:具有贴壁生长特性,表面表达CD73, CD90,和CD105,但一般不表达 CD34, CD45, CD14,和HLA-DR,同时具有定向分化成脂肪、成软骨、成骨特性的一组细胞[4]。尽管从不同组织提取的MSC 具有相似的表型和细胞特性,但是研究显示,其细胞活性、募集和归巢能力是明显不同的[5,6]。由于胚胎干细胞、脐带血干细胞存在很多伦理问题及政策性限制。所以骨髓和脂肪来源的MSC研究和应用多。