首页 > 文献资料
-
RNA干扰与疾病的治疗
目前,RNA干扰(RNA interference,RNAi)已成为基础和应用研究领域常用的手段:生命科学研究人员用RNA干扰确定基因功能,包括高通量筛选基因,特别是复杂信号转导系统中的关键基因;而在医药治疗领域,RNA干扰用于预防和治疗各种病毒等病原微生物引起的疾病和肿瘤,由于效果明显、特异性强,比反义核苷酸技术更适用于临床治疗.
-
基因组时代生物标志物研究的机遇与挑战
20世纪50年代,DNA双螺旋结构模型的建立标志着人类发现了生命的基本信息.20世纪70年代,遗传工程技术的发展使之趋于成熟,20世纪90年代开始,人类基因组计划把生命科学带入了新的世纪.人类基因组计划的任务是测定人类基因组的30亿个核苷酸序列结构,为阐明人类基因的结构与功能,解读人类遗传信息奠定基础.在此基础上的后基因组学研究要解决的课题是全面系统地分析基因功能,在整体水平上阐述基因活动规律 [1].
-
从胚胎干细胞基本生命活动研究肾为先天之本的思路
肾为先天之本,主藏精,其精气促进人体的生长、发育和生殖,是人体生命活动的原动力.现代医学与生命科学已明确地表明,人体的发育始于受精卵,而受精卵本身就是一种全能干细胞;受精卵以及随后形成的胚胎干细胞体系构成生长发育与修复的源泉.因此,从中医肾的角度理解胚胎干细胞,观察补肾(滋肾阴、温肾阳)对胚胎干细胞增殖、衰老、凋亡等基本生命活动的影响与干预,以及补肾对胚胎干细胞功能关键决定基因等基因转录、表达以及功能的影响,为中医肾理论研究以及正在进行的胚胎干细胞研究提供新的线索与起点.
-
论基因组学技术在中医药学中的应用
2001年2月12日,英、美、法、日、德、中等国科学家和美国塞莱拉公司联合公布人类基因组图谱初步分析结果[1]:(1)全部人类基因组约为2.91 Gbp,39000多个基因.(2)功能基因:定位了26 000多个功能基因,其中42%的基因功能尚不清楚.这些功能基因对研究疾病和新药筛选均具有重要意义.(3)基因数量不超过40 000个,是线虫或果蝇的2倍,其中人有而鼠没有的基因仅300个.(4)人与人之间99.99%的基因密码是相同的,变异仅为万分之一,说明人类不同"种属"之间并没有本质上的区别.(5)致病基因:发现140万个单核苷酸多态性,并进行精确定位,初步确定30多种致病基因.随着研究不断深入,将可能确定遗传病、肿瘤、心血管病、糖尿病等严重危害人类健康的致病基因,并寻找出个体化的防治方法和药物.
-
RNA干扰
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是几近年发现的基因表达调节新机制,双链RNA(double-strandedRNA,dsRNA)以调节子的身份降解目的mRNA,从而调节目的基因的表达.这一发现使人们重新认识了RNA在基因信息流控制过程中的重要性.RNAi的发生机制除了研究多的转录后基因沉默外,还发现与翻译水平调节和基因组甲基化等事件有关.RNAi被应用于生命科学的很多方面:在基因功能研究中它已成为倍受青睐的基因敲下的工具,而且它正促使新一轮基因组范围内基因功能研究运动的蓬勃开展;在癌症、病毒疾病以及代谢失调症等重大疾病的治疗方面,RNAi正显示出巨大的临床应用潜力,犹如给医药界带来了新鲜空气一样令人振奋.
-
基于鸡胚电转技术研究脊髓神经干细胞相关基因功能方法的建立
目的 建立一种基于鸡胚电转技术研究脊髓神经干细胞(NSCs)相关基因功能的方法.方法 RT-PCR检测鸡胚发育不同时期脊髓NSCs表面标志物;在鸡胚胚龄(E) E2.5 ~E3时,利用活体电转基因技术将pCAGGS-GFP质粒转染到鸡胚脊髓,E6时体视荧光显微镜下筛选绿色荧光蛋白(GFP)阳性胚胎,每组至少取材5个;通过脊髓横切及open-book技术观察神经纤维投射情况;普通光学显微镜下剥离出3~5条脊髓,经胰蛋白酶消化、离心后,无血清NSCs培养基重悬获得细胞铺板,于37℃、5% CO2细胞培养箱内培养,定时观察GFP阳性脊髓NSCs的形态变化.结果 RT-PCR结果表明,鸡胚脊髓中阳性表达NSCs表面标志物;随后的脊髓横切及open-book结果表明,GFP阳性转染侧的神经纤维能穿过底板,投射到脊髓对侧;而脊髓NSCs体外培养结果显示,GFP标记的脊髓细胞具有典型的NSCs形态,继续培养后有明显突起产生.结论 本实验成功建立了一种基于鸡胚电转技术研究脊髓神经干细胞相关基因功能的方法.
-
艾美耳球虫转基因技术研究进展
艾美耳属球虫是一类胞内寄生原虫,其造成的球虫病对畜禽养殖造成巨大经济损失.近年来随着分子生物学的飞速发展,艾美耳球虫的转基因研究取得较大突破,使转基因技术成为推动球虫研究的有力工具.本文综合近几年转基因球虫的研究成果,对艾美耳球虫转基因技术的建立与优化以及转基因球虫的潜在应用作一综述.
-
基因功能研究的一些新思路
2001年人类基因组计划、美国塞莱拉遗传信息公司在美国<科学>杂志和英国<自然>杂志联合宣布,他们绘制出了准确、清晰、完整的人类基因组图谱.基因组计划完成后新的难题摆在了科学家的面前,就是基因功能的研究,以及怎样提高基因功能研究的效率.转基因技术较好地继承了生理学原有的研究思路,可能成为基因与整体功能联系起来的重要研究方法之一,成为今后大规模进行基因功能研究的有效手段.
-
诱导性 RNAi 在体试验证实转录因子 BATF 参与CD8+ T 细胞分化起始过程
效应性 CD8+ T 细胞分化成熟是机体抵抗病原体侵袭及疫苗发挥作用的重要环节。激活后数小时内,初始 CD8+ T 细胞起始一系列基因转录促进向效应性及记忆型 T 细胞分化,然而这一过程的调节机制尚不清楚。利用病毒转导 shRNA 是一项经典的通过特异性敲低某基因实现研究该基因功能的技术,但该项技术在初始 T 细胞中效率非常低。后续改进的方法多集中在通过给予各种体外刺激如 TCR、感染、细胞因子等激活初始 T 细胞而达到提高转导率的目的,可是这种额外的干扰对细胞的正常分化过程造成较大影响。
-
RNA干扰号慢性疼痛的基因治疗
RNA干扰(RNA interference,BNAi)是1998年Fire等[1]首次发现并命名的,是由双链RNA(dsRNA)分子在细胞内特异性诱导与之同源mRNA降解或翻译抑制,导致基因沉默的现象,是一种典型的转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing,PTGS).RNAi主要的功能特点是其可以调节和关闭基因的表达,进而调控细胞的各种高级生命活动.RNAi技术已经成为模式生物、基因功能、基因治疗等研究领域中有力的工具,本文仅就RNAi在慢性疼痛研究中的进展作-介绍.
-
"基因网络--基因功能"的研究/动脉粥样硬化血栓形成--全球前瞻性病例登记研究/科学家质疑现有动物实验研究及其评估/NCBI癌症基因组研究中的CCAP和HTGI
-
基因打靶技术在构建人源体细胞基因敲除或敲入细胞系中的应用
基因打靶技术能够帮助人们认识某些动物个体或细胞表型异常的遗传基础,利用该技术构建的模式生物(例如基因敲除小鼠)已经广泛地应用于人类基因的研究[1],截至1999年就已经报道了800多个模式小鼠种系.同源重组介导的基因打靶技术(基因敲除或敲入)是判定基因功能的强有力工具.与基因敲除小鼠相比,人类体细胞基因敲除或敲入细胞系构建的报道相对较少,但该项技术在细胞水平上对某些人源基因参与的生化或生理途径的分析是不可替代的.
-
基因功能的抑制
随着人类基因组测序工作的完成,人类基因组109碱基序列中具有功能的基因约3万个,其功能基因的序列已经明了,这些基因功能的研究正在轰轰烈烈的进行中.生物体内编码基因要执行其功能,需要经历DNA的复制、转录和翻译,即基因表达的过程.因而,要了解基因的功能,可以采用转基因、诱导突变观察基因缺失型的表现,进而推测它的功能;或是从基因的DNA、RNA或蛋白水平进行干预,抑制其表达,观察基因抑制后表型变化,研究其功能.转基因和诱导特异的基因突变效率低,相对而言,随着生物技术的发展,后一种方案就简单多了,因此生命科学研究中,出现了多种在DNA、RNA和蛋白水平上抑制某个或某些特定基因发挥功能的方法,而且这些方法也越来越多地应用于基因过度表达的疾病的治疗中.
-
蛋白质组学在消化系统肿瘤中的应用
随着人类基因组计划的完成,生命科学的研究重点又转移到基因功能产物--蛋白质的研究上来."蛋白质组学(proteomics)"逐渐成为后基因组时代生命科学的主要研究领域.它研究的是一个基因组所表达的全套蛋白质,包括一种细胞乃至一种生物在特定的时间和空间上表达的全部蛋白质[1-3].
-
中国幽门螺杆菌cagA基因敲除突变株生物学特性分析
细胞毒素相关基因A蛋白(cytotoxin-associated gene A,CagA)是幽门螺杆菌(Hp)重要的毒力因子之一[1].流行病学研究认为,CagA阳性Hp感染与消化性溃疡和胃癌发生的关系比CagA阴性菌株更为密切,提示CagA可能是一种重要的疾病相关蛋白,在Hp致病过程中发挥作用[2].由于Hp菌株自身的变异,CagA阳性株与CagA阴性株间除cagA基因外存在许多差异之处,因此,在自然状态下很难对cagA基因功能做出真实判断.为此,本室自行构建了Hp中国株cagA基因敲除突变株,在此基础上通过比较遗传背景相同的野生株(cagA+)与突变株(cagA-)的生物学特性差异,探讨cagA基因缺失对Hp生物学特性的影响,可供cagA基因功能的研究参考.
-
RNA干扰及其在抗病毒治疗方面的研究进展
RNAi(RNA interference)即RNA干扰,通常被描述为由双链RNA(dsRNA)引发的使细胞浆内同源mRNA降解的转录后基因沉默现象.现已发现大多数有机体包括真菌、植物、昆虫、脊椎动物、哺乳动物及人体细胞等均存在这种基因沉默现象,并认为是机体防御外界病毒入侵的一种原始防御功能,它在进化上具有高度保守性.近年来,由于合成dsRNA技术上的改进,使得RNAi这一技术迅速在多个领域展开,从而加速了对基因功能、遗传规律、信号转导机理的研究,并已将这一技术用于癌症和病毒性疾病的基因治疗.
-
代谢组学在口腔医学研究中的应用进展
在生命科学的研究发展历程中,基因和蛋白质一直是学者为关注的对象,并由此诞生了基因组学和蛋白质组学两大重要的学科分支。随着科学研究方式方法的进步发展,在后基因组时代,为了从宏观层面上更准确地把握生命体的代谢活动所蕴含的信息,明确基因或蛋白质的变化在生命体代谢产物中的具体表现,一种新的组学--代谢组学应运而生。它是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后,基于对基因组学和蛋白组学的补充而新近发展起来的一门学科,是系统生物学的又一重要组成部分[1],也是组学研究领域的热点之一,并被视为组学研究的“终点”。目前代谢组学在药学、毒理学、营养学、疾病诊断、基因功能、环境科学等各个领域都有广泛应用,并已显示出其强大的优势。本文就代谢组学近几年来在口腔医学研究领域中的应用进行综述。
-
内毒素相关受体基因共转染肠上皮细胞的研究
基因转染可将目的基因导入靶细胞进行基因功能和基因表达调控的研究 [1].但转染效率的高低受诸多因素的影响,尤其是多种功能相关基因的共转染,更加困难.既往研究发现,人肠上皮细胞株(HIC)不表达内毒素(LPS)相关受体CD14(cluster of differentiation 14)、Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)和MD-2 (myeloid differentiation protein-2).为进一步证实这3种LPS相关受体的不表达是否是肠上皮细胞耐受LPS的关键机制,我们用FuGENE 6转染试剂进行CD14、TLR4和MD-2基因共转染人肠上皮细胞的探索.
-
蛋白质芯片及其在临床医学中的研究进展
人类基因组计划的测序完成后,另一个更加艰巨的任务就是确定基因组编码的所有蛋白质结构和生物学功能.由于蛋白表达水平未完全与mRNA表达水平相一致,得到表达的蛋白要经过翻译后修饰,因此仅用基因芯片研究基因功能是不全面的.虽然,传统生物化学方法在单个蛋白功能研究方面功不可没,但不适用于细胞、组织、微生物中每个蛋白的研究,更不能满足全基因组范围内大规模检测分析的要求.于是,作为一种高通量、高灵敏度、高特异性且微型化的蛋白质分析技术,蛋白质芯片在众多蛋白质测定方法中脱颖而出.
-
脑蛋白质组学研究进展
人类和多个物种的基因组全序列测定即将完成,生命科学研究逐渐从结构基因组学转向功能基因组学;在了解基因功能的同时,对基因表达产物--蛋白质的研究愈发重要.蛋白质是整个生命活动的基础,目前至少有40% ~60%的基因编码蛋白质功能是未知的[1].