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包装食品中蛋白质分析和检测允许误差范围的研究
目的 研究不同实验室对包装食品中蛋白质检测的实验误差.方法 根据2000年全国包装食品消费的调查,选择了7类(谷物、豆类、肉类、奶制品类、饮料类、坚果、休闲食品)14种包装食品,在全国的7家实验室进行3次蛋白质的平行样检测,蛋白质检测方法为国家标准方法.结果 所有蛋白质检测结果筛查合格率为89.7%.蛋白质检测相对标准偏差为:实验室内0.36%~2.79%,实验室间1.79%~10.10%,室内和室间总和为2.33%~10.47%,14种食品平均4.52%.蛋白质检测的相对扩展不确定度由4.46%~19.60%,平均8.65%.结论 我国实验室对蛋白质的检测符合国家标准方法的要求,实验室蛋白质分析变异和不确定度均小于检测值的20%.
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蛋白组学技术在环境卫生中的应用
人类基因组图谱构建的完成,标志着生命科学进入了后基因组时代(post-genome era).蛋白组学(proteomics)成为大规模、高通量蛋白质分析的一种重要方法,为人类疾病提供新的生物标志物[1,2].环境理化生物因素暴露可改变蛋白质组的表达,导致疾病的发生.人类蛋白组组织(human proteome organization,HUPO)的成立大大促进了环境与蛋白质组的交互作用的研究[2].
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毛细管电泳分离技术的进展及其在蛋白质分离中的应用
概述毛细管电泳是上世纪80年代在全球范围内迅速发展起来的一种新型的分离技术,并被认为是90年代这一领域中有影响的分支科学之一,已在生命科学、生物工程、医学药物、环境保护和食品检验等领域中显示出极其重要的应用前景[1].
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脊柱终板软骨组织蛋白质提取技术
软骨组织由少量软骨细胞和大量细胞外基质组成,绝大部分细胞外基质由胶原和糖蛋白构成,功能性蛋白含量较低,在对软骨组织进行蛋白质分析时,这些问题的存在会严重影响蛋白质电泳的进行.在以往的研究中,对于软骨组织蛋白质的提取通常采用细胞培养的方法,即通过细胞的传代、繁殖获取软骨细胞样本,然后提取细胞蛋白质.
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蛋白质芯片及其在临床医学中的研究进展
人类基因组计划的测序完成后,另一个更加艰巨的任务就是确定基因组编码的所有蛋白质结构和生物学功能.由于蛋白表达水平未完全与mRNA表达水平相一致,得到表达的蛋白要经过翻译后修饰,因此仅用基因芯片研究基因功能是不全面的.虽然,传统生物化学方法在单个蛋白功能研究方面功不可没,但不适用于细胞、组织、微生物中每个蛋白的研究,更不能满足全基因组范围内大规模检测分析的要求.于是,作为一种高通量、高灵敏度、高特异性且微型化的蛋白质分析技术,蛋白质芯片在众多蛋白质测定方法中脱颖而出.
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高低转移表型大肠癌细胞株蛋白质表达谱差异初步分析
目的:应用蛋白质组学技术分析高低转移表型大肠癌SW480细胞株和LoVo细胞株间的蛋白质表达谱差异.方法:以双向电泳技术分离两种细胞株总蛋白质,银染显色,进行差异蛋白质分析.结果:SW480和LoVo细胞株双向电泳图谱蛋白质点数分别为1184±47和1124±54,共获得88±5的蛋白质差异点,其中48±3个点仅在SW480细胞株中表达或表达明显增强,41±3个点仅在LoVo细胞中表达或表达明显增强.结论:高低转移表型大肠癌SW480细胞株和LoVo细胞株间的蛋白质表达谱存在一定的差异,对这些差异点进行鉴定将为研究大肠癌转移机制提供一定的线索.
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应用SELDI-TOF-MS筛检造影剂肾病尿液相关候选蛋白的研究
随着现代影像技术和介入治疗的不断发展,造影剂肾病(contrast-inducod nephropathy,CIN)已成为医院内获得性急性肾衰竭(AKI)的第三位常见原因[1].CIN的早期发现、早期干预,是降低危重AKI发病率、提高治疗效果的前提和关键[2].近些年来表面加强激光解吸/电离-飞行时间-质谱技术(surface enhanced laser desorption/ionization-time of flightmass spectroscopy,SEIDI-TOF-MS)的运用,为寻找CIN早期诊断特异性标志蛋白带来了新思路.本研究应用SELDI-TOF-MS技术对接受冠状动脉(冠脉)介入/冠脉造影手术患者术前术后晨尿进行蛋白质分析,以期筛选出CIN发病相关的尿液标志物.
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肝移植术后胆道铸型的全蛋白质表达
肝移植术后胆道铸型综合征(biliary cast syndrome,BCS)是肝移植术后严重影响患者手术存活牢及生活质量的并发症,其发生率为4%~18%~([1]).肝移植术后BCS的胆道铸型形成机制尚未彻底阐明.胆道铸型中是否存在一些和其形成有关或对铸型形成有预警作用的蛋白质还不清楚,为此,我们收集了4份外形完整、颜色质地各异的铸型标本,拟对其进行全蛋白质分析,以期了解胆道铸型中蛋白质的表达情况.
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卵巢恶性肿瘤的蛋白质组学研究现状与展望
1995年,Wasinger等[1]发表在Electrophoresis的文章中首次使用了由澳大利亚学者Wilkins和Williams于1994年提出的蛋白质组(proteome)的概念,这标志着蛋白质组学(proteomics)的诞生.这一全新学科的诞生有着深刻的时代和科学发展的背景.随着人类基因组计划的顺利完成,生命科学研究已进入了后基因组时代.由于基因只是遗传物质的载体,蛋白质才是生理功能的执行者;基因转录水平的研究只能在一定程度上反映基因表达产物的变化,而真正发挥功能的蛋白质要经过转录后加工、翻译调控以及翻译后加工等许多步骤和调控才能形成;因此,对基因组的研究有时并不能完全反映机体功能的变化,为了减少这种客观存在的相对误差,蛋白质组学作为快捷、有效的蛋白质分析技术应运而生.
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蛋白质分析中生物信息学的应用
生物信息学是生物学与计算机科学及应用数学等学科相互交叉形成的一门新兴学科.它通过对生物学实验数据的获取、加工、存储、检索与分析,进而达到揭示数据所蕴涵的生物学意义的目的,被认为是21世纪生物学的重要组成部分[1].生物信息学涵盖生物数据库、生物学软件、生物大分子模拟三方面内容[2].在后基因组时代的蛋白质组分析中,生物信息学必将会扮演重要角色[2].
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内分泌疾病
随着2001年2月人类基因组密码破译的完成,内分泌领域也进入了后基因组时代.研究的主流已逐步从基因分析转向基因编码的蛋白质分析.本文将介绍受瞩目的临床内分泌学一年来的成果.
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用蛋白质芯片技术检测结直肠癌患者的肿瘤标志物
肿瘤标志物的检测有助于恶性肿瘤的早期诊断和监测,同时检测多种标志物可以提高敏感性.蛋白质芯片是一种高质量、高灵敏度、高特异性且微型化的蛋白质分析技术[1,2].本实验采用肿瘤诊断用蛋白芯片试剂盒,对结直肠癌患者血清中的肿瘤标志物CEA,CA19-9,CA242进行联合检测.
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伯氏疏螺旋体分子生物学分型进展及其意义
姆病是一种蜱传全球性动物源性疾病,病原体由W.Burgdorfer首次分离并被命名为伯氏疏螺旋体.根据DNA和蛋白质分析,伯氏疏螺旋体可以分为10个基因型或基因群,即B.burgdorferi sensu stricto(B31T,标准株为B31;B.为Borrelia.的简写)、B.afzelii(VS461)、B.garinii(20047)、B.japonica(HO14)、B.andersonii(21123)、B.lusitaiae(PotiB2)、B.valaisiana(vs116)、B.tanukii(HK501)、B.turdae(Ya501)和基因群DN127[1~7].分子生物学分型包括表型分型和基因分型,评价不同分子生物学分型方法主要依据可分型性、可重复性、分辨率、易操作性、及结果易解释性.分子生物学分型方法较多,包括G+C mol%、DNA-DNA杂交、核糖体分型、PCR-RFLP、染色体DNA脉冲电泳、蛋白质电泳和多位点酶电泳、PCR-杂交、基因型特异性PCR及核酸序列聚类分析技术等.
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利用共振光散射技术测定白蛋白、红蛋白方法的探讨
蛋白质定量测定是生物化学和生命学科中经常涉及到的分析内容,在临床医学中也有重要应用.因此建立蛋白质快速、灵敏、简便的分析方法成为蛋白质分析中的一项重要内容.
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蛋白质芯片及其在临床医学上的应用
对21世纪出现的新型生物芯片——蛋白质芯片的基本构成、使用方法、临床应用、目前进展等作简要介绍,并评估其独特的研究贡献及今后迅猛的发展前景。
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蛋白质组学在眼疾病中的应用进展
蛋白质组学是研究细胞、组织和器官内所有蛋白质的组成及其动态变化的科学,是在蛋白质水平上定量的、动态的、整体的研究生物体,可以从更深层次上获得对细胞生理和生物化学过程、调控网络以及疾病过程的广泛而完整的认识.蛋白质组学在眼科尚处于起步阶段,现就蛋白质组学在眼科疾病中的应用进展作一综述.
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SPR技术在生物、生化分析以及临床免疫学中的应用
介绍了表面等离子体共振(SPR)技术在生物、生化以及免疫检测应用中的传感器制备方法,检测系统以及样品测试方法,讨论了SPR技术的几种生化分析应用,给出了测试结果,提出了改进措施.
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前列腺按摩对尿蛋白检测的影响
前列腺专科常用前列腺按摩方法对患者进行检查,如果按摩后留取尿液分析尿蛋白,测定结果会受到干扰.我们通过实验分析,对前列腺按摩后留取尿液对蛋白质分析的影响作了初步的探讨.
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蛋白质芯片技术在消化系统肿瘤诊断中的应用进展
蛋白质芯片技术是蛋白质相关领域研究中具前景的一项技术.目前,抗体芯片作为蛋白质芯片技术的分支,在消化道肿瘤中的应用主要是通过筛选鉴定肿瘤标记物,进行肿瘤的早期诊断及治疗监测.本文就蛋白质芯片和抗体芯片的基本内容及其在消化道肿瘤诊断中的应用做一综述.
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毛细管电泳-激光诱导荧光检测装置的研制及应用
目的自行组建高效毛细管电泳-激光诱导荧光分析装置.方法以波长543.5 nm He-Ne 激光为激发光源, 滤色片-单色仪分光,光电倍增管检测,用计算机采集和处理电泳图谱.结果优化了毛细管电泳-激光诱导荧光检测装置的设计和分析参数,用该装置获得了高信噪比毛细管电泳谱.对罗丹明类荧光试剂(Sulforhdamine B)溶液的检出限为10-9 mol/L,线性范围为1×10-6~1×10-9 mol/L.采用该装置检测了分枝杆菌DNA的PCR扩增产物、酶切产物以及人血清白蛋白.结论所组建的高效毛细管电泳-激光诱导荧光分析装置结构合理,灵敏度高,成本低、光路校准方便,分离效能明显高于常规琼脂糖电泳,能作为研究生物样品中DNA片段和蛋白质含量的有效检测手段.