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多年积淀成就LGC标准品之优势——访LGC有限公司北京代表处总裁吴治光
LGC是Laboratory of theGovemment chemist的简称,中文名英国政府化学家实验室,是化学和生物计量、法医、诊断科学服务及标准物质方面的市场领导者.作为LGC的重要分支,LGC标准品有限公司可为测量科学和实验室控制提供一系列产品和服务,包括标准物质分销、组织实验室水平测试(Proficierlcy Test,PT.也即能力验证)、药物杂质生产及提供特殊合成服务.
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食品中甲基异柳磷残留量测定方法的研究
甲基异柳磷是一种效力高、持效久、广谱、使用方便但毒性大的土壤杀虫剂,在农作物消灭害虫中得到了广泛的推广使用.为了更有效、更科学地使用甲基异柳磷杀虫剂,需要对其在农作物中的残留量进行监测,本文从试样提取方法、萃取试剂、色谱条件等方面进行了探讨.1 材料与方法1.1 原理火焰光度检测器具有高灵敏度、高选择性,广泛应用于含硫、含磷等有机化合物的测定,试样经提取、净化后,用气相色谱火焰光度检测器检测.通过试样的峰高(面积)与标准品的峰高(面积)比较,计算试样的含量.
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对生化检验分析前样品处理的几点体会
生化检验目前已经成为临床医师诊断疾病,观察疗效,判断病情的发展和预后不可或缺的手段.但是几乎每个实验室均存在着影响生化检验的各种因素,近年来由于大型自动生化分析仪的使用和方法的改进及标准品质量的提高,大大提高了临床生化分析的精密度,使分析的批内和批间变异明显下降,所以测定结果的准确度往往不是来自分析过程本身,而是来自分析过程之外(即分析前程度),本人从多年的生化检验工作总结出几点.
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血清FT3固相放免法的建立
用葡萄球菌蛋白A(SPA)预先包被聚苯乙烯塑料试管,利用其结合IgG Fc段特性制备固相抗体作为分离剂,建立了血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)固相放免法,使分析过程更加简便、稳定。材料与方法 1 材料 1.1 SPA Sigma公司产品。 1.2 125I-FT3 中国原子能同位素公司产品,其试剂盒作为对照试剂盒。 1.3 FT3抗体、FT3标准品 潍坊3V诊断技术公司产品。 1.4 其它试剂 SPA包被液:50mmol/L、pH9.6碳酸盐缓冲液;抗体包被液:10mmol/L、pH8.4 PBS,含明胶0.5g/L,NaN3 0.5g/L; 温育液:50mmol/L、pH7.4 PB,含明胶0.5g/L,NaN3 0.5g/L。 1.5 聚苯乙烯试管 浙江黄岩五洲塑料制品厂产品。
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癌胚抗原工作标准品的制备
制备供免疫分析用的癌胚抗原工作标准品并标定其免疫效价。用4.6mg/L CEA纯品溶液和pH7.4的1%人白蛋白-50mmol Na2HPO4-NaH2PO4溶液配制浓度为320μg/L的工作标准品溶液。将该溶液按每安瓿(amp.)0.5mL(160ng/amp.)分装、冻干。以国产CEA RIA和CEA IRMA药盒现行标准品为对照品,标定工作标准品效价,并与国际参考制剂1st IRP CEA HUMAN 73/601进行对照实验。以药盒标准品为对照品,工作标准品平均免疫效价为163ng/amp.,95%可信限为159-168ng/amp.,工作标准品与国际参考制剂的剂量-反应曲线不显著偏离平行。CEA工作标准品与国际参考制剂1st IRP CEA 73/601在免疫学反应中是同质的,可以作为实验室间对照品使用。
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三碘甲腺原氨酸免疫分析工作标准品的研制
制备供免疫分析用的3,5,3-三碘甲腺原氨酸(T3)工作标准品并标定其免疫效价.用每升含193.27mg T3的40mol/L NaOH溶液和去激素血清,配制浓度为100μg/L的T3溶液.将该溶液按每1mL分装,冻干.以国产现行标准品为对照品,标定配制的T3工作标准品免疫效价为91.4ng/安瓿,95%的可信限为88-95ng/安瓿.并从T3药盒工作标准曲线上,读出本所1601-9703批低、中、高质控血清的T3值.在以相应的参考值为参照时,测定值的偏倚均小于10%.总之,配制的T3工作标准品适用于国产T3RIA药盒标准品的核对及其质控血清的标定.
关键词: 3 5 3'-三碘甲腺原氨酸 标准品 放射免疫分析 -
甲状腺素工作标准品的研制
制备供免疫分析用的甲状腺素工作标准品并标定其免疫效价.用每升含951.22mg T4的40mmol/L NaOH溶液和甲状腺素基础值为零的去激素血清配制浓度为1000μg/L的T4血清溶液. 将该血清溶液按每安瓿1mL分装(1000ng/安瓿)、冻干. 以国产T4 RIA药盒现行标准品为对照品标定T4工作标准品效价, 并从工作标准品的剂量-反应曲线上读出本所制备的1601-9703质控血清的T4测定值. 以T4药盒标准品为对照品, 工作标准品平均免疫效价为946ng/安瓿, 95%概率水平的可信限为915-976ng/安瓿.从工作标准品的剂量-反应曲线上读出低、中、高值质控血清的T4测定值, 在以相应的参考值为参照时, 测定值的偏倚均小于10%.新制备的T4工作标准品适用于国产T4放射免疫分析药盒标准品的核对工作及其质控血清的标定工作.
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高浓度乙肝表面抗原检测误差的校正F方法
临床中,广泛采用免疫放射分析法(IRMA)测定乙肝表面抗原(HBsAg).实验中发现,结果大于试剂盒中大标准品的高浓度样本血清,经过不同倍数稀释后,所得出的结果有显著性差异(P<0.01).就此,对因实验中不同稀释倍数而导致的误差,已做了一些探讨[1],以校正误差,使结果符合真值.
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定量标记免疫分析用国家标准品研制技术要求介绍
进一步规范定量标记免疫分析用国家标准品的研制工作.定量标记免疫分析用国家标准品系指通过具有一定量值溯源性的、用于规范定量标记免疫分析试剂盒内校准物质准确性的国家标准品,本文详细介绍了这类标准品的原材料、制备、标定、稳定性研究、包装、储存及供应方面的要求.定量标记免疫分析用国家标准品的管理更加规范.
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人乳头瘤病毒61、83和84型MY片段分析及核酸标准品制备
目的 探讨山西省的HPV61、83和84型分离株MY片段中核苷酸及氨基酸的突变情况以及山西省分离株与α3中其他型别的同源性,制备三型别包含MY片段的标准品.方法 使用HPV通用引物MY09/11对我国HPV61、83和84型分离株进行PCR扩增,并连接至pMD18-T载体,所得质粒进行序列分析,应用BioEdit生物学软件进行核苷酸水平和氨基酸水平的分析.结果 HPV61和83型分离株分别与参考株序列U31793和AFl51983比对,在核苷酸水平完全一致;HPV84型分离株与参考株序列AF293960比对,在核苷酸水平发生4个点突变,分别为C6760T、T6931C、T6951C和C6987A,其中C6987A导致D441E氨基酸残基的突变;MY-PCR反应对HPV61、84和83型标准品检测的灵敏度依次降低.结论 我国HPV61和83型分离株与参考株序列相比较未发现突变,HPV84型与标准株相比存在着核酸和氨基酸水平的突变;MY09/11通用引物检测HPV61型标准品的灵敏度高于HPV83和84型.
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变色硅胶用作菌种冷冻干燥的脱水剂
冷冻干燥法保存细菌的菌种和病毒的毒种,不仅保存时间长,而且可以避免变异,可保持原细菌和病毒的生物特性.冷冻干燥技术在生物学领域中占有重要的地位,是保存生物制剂及其标准品的优良方法.
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何谓流式细胞仪的调准?
答:为了保证仪器分析结果的稳定性、提高精密度,使测量出的同一种样品的数据结果接近,在分析标本前仪器必须用标准品进行调准(校正),一般通过变异系数(CV)来观察。CV值很大的仪器常能带来一些假象,同一群体在CV值不同的仪器上可测得不同形状的直方图。仪器的调准方法是使用标准品来校正仪器,使其在激光功率、光电倍增管电压、放大器增益一定的情况下所得到的荧光强度强,且变异系数小。常用的标准品为厂家提供的标准微球或醛化固定的鸡红细胞悬液。
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RNA病毒扩增检测的质控品和标准品研究进展
RNA病毒如丙型肝炎病毒(HCV)、人免疫缺陷病毒(HIV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)等的核酸检测对于感染的早期诊断和抗病毒治疗疗效的动态观察具有重要价值.自1983年发明聚合酶链反应(PCR)技术以来,出现了基因扩增的概念.目前多采用核酸扩增技术(NAT)检测病毒RNA,常用的是逆转录(RT)-PCR方法.核酸扩增检测想得到可靠的结果,必须使用质控品进行严格的质量控制,而对病毒进行定量测定,通常还须有病毒RNA标准品.目前RNA病毒扩增检测的质控品和标准品分为两大类,一是裸露的RNA片段,二是内含特定RNA的病毒样颗粒或称之为带盔甲的RNA(armored RNA).
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双单抗夹心ELISA方法检测血浆及组织中金葡菌肠毒素B
目的:细菌学研究表明,可溶性外毒素的产生是革兰阳性菌(G+菌)感染的重要标志之一,在G+菌感染性疾病的发生、发展中具有重要意义.其中金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)肠毒素和中毒性休克毒素-1(TSST-1)因其"超抗原"特性,以及它们在脓毒症和中毒性休克综合征中的特殊意义而倍受关注.本文建立了一种敏感、快速的酶免疫测定方法,用于定量检测动物体液及组织中金葡菌肠毒素B(SEB).方法:采用生物素-链亲素系统放大的双抗体夹心酶联免疫吸附方法,以SEB单抗1D2为包被抗体、生物素标记的另一种SEB单抗2D1为标记抗体进行测定.结果:在0.039~10.000μg/L浓度范围内将SEB标准品进行倍比稀释,平行测定4次.当SEB标准品浓度为0.039μg/L时,测得的平均A值仍明显高于阴性对照(分别为0.193和0.108).若以样品A值/阴性对照A值大于2(P/N>2)作为阳性判断标准,则低检出限为0.078μg/L(A=0.220).在0.078~10.000μg/L的浓度范围内,SEB标准品浓度与吸光度值线性关系良好,相关系数为r=0.9906,平均变异系数为5.32%.为了考察方法的精确度,在标准曲线适用的范围内选择3个SEB浓度(10.000μg/L、5.000μg/L和2.500μg/L),每个浓度重复测定4次,变异系数分别为6.82%、5.25%、和3.90%,平均变异系数为5.32%.回收实验显示,正常大鼠、家兔和人血浆中的平均回收率分别为96.43%、97.34%和19.99%,正常人尿液中平均回收率为91.53%.上述结果表明该方法准确性较高,可用于定性及定量检测动物血浆及人尿液中的SEB.结论:本法灵敏度高、准确性好、稳定性强,而且简便、快速,适用于动物血浆及组织中微量SEB的定量测定,并有一定的临床应用前景.
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β-内酰胺类抗生素高分子杂质控制研究中常见问题的探讨
目的 针对β-内酰胺类抗生素高分子杂质质量控制中常见问题进行分析探讨.方法 对制订标准时容易出现的错误进行实验论证;分析药品自身不能作为标准品的原因,以及在使用其他标准品替代时校正因子的确定等问题进行论述.结果 用检测波长下的E1%1cm值比值作为校正因子,更直观、更具客观性和可比性.结论 本文对β-内酰胺类抗生素高分子杂质控制研究中发现的共性问题,探索其解决方法,为抗生素新产品的检测提供参考.
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葫芦素B标准品的制备工艺研究
目的 由于现在使用的葫芦素B标准品制备工艺限制,导致市场上葫芦素B标准品价格昂贵,而且标准品纯度不能完全达到要求,作者希望通过研究新的制备工艺,来改善目前的市场状况.方法 在实验室采用正反相色谱柱分离提纯制备.结果 制备出纯度>98.5%的标准品,并且产量也得到提高.结论 新的制备工艺在得到完善后,将解决产品生产、质量控制等多方面问题.
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硫酸庆大霉素薄层色谱鉴别的改进
硫酸庆大霉素是氨基糖甙类抗生素,其薄层色谱鉴别采用三氯甲烷-甲醇-浓氨溶液(1:1:1)[1-3]混和,放置1 h,分取混和溶液的下层溶液为展开剂,操作烦琐,费时;展开后,标准品和供试品溶液的主斑点比移值Rf极小(0.036~0.13),各斑点间分离较差,斑点拖尾严重,即使展开时间长,分离效果也不理想.
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肝素钠乳膏鉴别(1)的改进
<国家食品药品监督管理局国家药品标准>WSi-(X-027)-2003Z肝素钠乳膏的鉴别(1)取本品2g,加水5ml振摇溶解离心,取上清液作为供试品溶液;另取肝素钠标准品适量,加水制成每1ml含100单位的溶液作为标准溶液.吸取上述溶液各4μl,照电泳法(中国药典2000年版二部附录V F第三法)试验,供试品与对照品所显斑点的迁移距离的比值为0.9~1.1.
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尿促性素第三批国家标准品的标定
目的:制备和标定第三批尿促性素国家标准品.方法:用幼龄大鼠卵巢、精囊增重方法,第四批人尿FSH、LH国际标准品为标准标定第三批尿促性素国家待标品.结果:第三批尿促性素国家标准品的生物效价分别为FSH 190IU,LH 242 IU/支.结论:已成功研制第三批尿促性素国家标准品,可以取代第二批绝经期尿促性素国家标准品,现已分发使用.
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改革药品检验用标准品、对照品供应办法的探讨
中国药典2000年版二部凡例第二十条规定:标准品、对照品系指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质.标准品与对照品(不包括色谱用的内标物质)均由国家药品监督管理部门指定的单位制备、标定和供应.