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肝素钠乳膏鉴别(1)的改进
<国家食品药品监督管理局国家药品标准>WSi-(X-027)-2003Z肝素钠乳膏的鉴别(1)取本品2g,加水5ml振摇溶解离心,取上清液作为供试品溶液;另取肝素钠标准品适量,加水制成每1ml含100单位的溶液作为标准溶液.吸取上述溶液各4μl,照电泳法(中国药典2000年版二部附录V F第三法)试验,供试品与对照品所显斑点的迁移距离的比值为0.9～1.1.
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深圳市婴幼儿急性胃肠炎的病毒病原研究
急性胃肠炎是一个全球性的严重的公共卫生问题,在儿童的发病率仅次于呼吸道感染,列为第二位,在发展中国家5岁以下儿童尤为突出.全世界每年发生30-50亿例病例,其中500～ 1000万例死亡,其病原有病毒、细菌及原虫等,以病毒为严重.自70年代初Bishop发现 Norwalk病毒和轮状病毒(简称HRV)以来,人们相继发现腺病毒(简称Adv)、杯状病毒、星状病毒、冠状病毒及小圆病毒等与急性胃肠炎有关.但轮状病毒是引起婴幼儿急性胃肠炎的主要病原,40%-50%需住院治疗的病例与HRV感染有关[1].HRV A组分为两个亚群 ,根据第10、11基因片段在核酸电泳中的迁移距离的长短,又可将其分为长型和短型.急性胃肠炎粪便标本中,Adv检出率约为5%-14%,其中肠道腺病毒占70%左右,腺病毒被认为是婴幼儿急性胃肠炎的第二大病毒病因[2].
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029 川芎嗪对动脉平滑肌细胞形成粥样硬化的影响
目的: 探讨川芎嗪对动脉平滑肌细胞形成粥样硬化的防治机制. 方法: 以高脂高胆固醇(Cho)膳食制备大白兔高脂高Cho血清. 贴块培养法进行VSMCs原代培养及传代. 原代培养到第9～12天, 组织块周围的细胞生长融合成片并铺满瓶底时, 进行VSMCs传代培养. 实验选用第3代传代培养的VSMCs. 实验分为正常组用含双抗和胎牛血清的RPMI1640培养液培养, 高脂组用含双抗和高脂血清的RPMI1640培养液培养, 秋水仙碱组用含双抗和高脂血清的RPMI1640培养液加入秋水仙碱培养, 川芎嗪低、中、高剂量组用含双抗和高脂血清的RPMI1640培养液分别加入20、 200、 2000 μg/ml川芎嗪培养. 结果: 川芎嗪能明显减轻高脂血清诱导培养VSMCs之组织形态和超微结构改变, 含胎牛血清培养基培养的VSMCs具有典型收缩表型的VSMCs形态和超微结构, 在高脂血清培养基中增生的VSMCs为典型合成表型的VSMCs源性泡沫细胞形态和超微结构, 在含川芎嗪的高脂血清培养基中培养VSMCs的细胞形态界于泡沫细胞与VSMCs之间. 川芎嗪能明显影响高脂血清诱导培养VSMCs之迁移距离, 含胎牛血清培养基培养的VSMCs能作一定的运动而具有一定的迁移距离, 在高脂血清培养基中增生的VSMCs的迁移距离增加, 而含秋水仙碱和川芎嗪培养基中VSMCs迁移距离降低. 川芎嗪能明显影响高脂血清诱导培养VSMCs之生长计数, 含10%胎牛血清培养基培养的VSMCs能分裂增生而具有一定的生长计数, 在高脂血清培养基中增生的VSMCs的生长计数增加, 而含秋水仙碱和川芎嗪培养基中VSMCs的生长计数降低. 川芎嗪能明显影响高脂血清诱导培养VSMCs之分裂指数, 含10%胎牛血清培养基培养的VSMCs能作一定程度的分裂而具有一定的分裂指数, 在高脂血清培养基中增生的VSMCs生的分裂指数增加, 而含秋水仙碱和川芎嗪培养基中VSMCs分裂指数降低. 结论: 川芎嗪能通过抑制的VSMCs表型转换, 迁移速率, 生长速度, 分裂指数, 荷脂过程和损伤过程等多个环节, 逆转高脂血清诱导培养VSMCs的粥样硬化样细胞病变.
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单细胞凝胶电泳技术的应用与进展
1 检测原埋 DNA为紧密的四级超螺旋结构，一般情况下，部分DNA的单链断裂对DNA的结构影响不大，不容易释放。在单细胞凝胶电泳(SCGE)实验中，由于细胞裂解液的作用，膜结构受到破坏，胞内成份扩散到裂解液中，DNA由于相对分子质量大留在原位。在碱性条件下，DNA解螺旋，DNA的断链和亲碱性片段释放，在电场中移动，形成彗星样图像。通过测定DNA迁移部分的光密度或迁移距离可以测定DNA的损伤程度[1]。2 实验方法 目前多采用Singh等的"三明制"法制板[1]，第一层为正常熔点琼脂糖(NMA)，第二层为含有细胞的低熔点琼脂糖(LMA)，第三层为LMA。凝胶的浓度为0．5％～1．0％，每层用量为85～100μl。将制备的玻片浸入预冷的裂解液中使细胞裂解，对于特殊细胞如精子，需用酶作特殊处理[2]。在碱性条件下，使DNA解螺旋后电泳，中和玻片后，染色，荧光显微镜下阅片。国内学者在制板、铺胶等方法学上有许多改进[3,4]。3 研究及应用领域
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雌性大鼠小肠内容物迁移距离与餐后存活时间的关系
目的 研究雌性SD大鼠动物模型进食后小肠内容物迁移距离与餐后存活时间的关系,并评估其在死亡时间推断中的应用价值.方法 将成年雌性SD大鼠随机分为餐后1、2、3、4、5h组及对照组.各实验组同时饲食1h后撤去食物,对照组不予饲食,分别在上述时间点处死大鼠,对胃及小肠内容物进行观察、描述、比对及拍照固定,测量小肠内容物迁移距离,并对实验组数据进行单因素方差分析. 结果 对照组胃腔及十二指肠空虚,其内可见少量稀薄黄色小肠液.餐后1h组,大鼠胃腔充盈饱满,其内充满未消化的食物,其余各实验组胃及小肠内容物性状、色泽及含量均存在渐进性变化,小肠空白区逐渐缩短,小肠内容物迁移距离逐渐延长,各实验组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 雌性SD大鼠通过禁食不禁水24h后自由进食1h可成功建立理想的、可用于固定及测量小肠内容物迁移距离的动物模型,该模型可为法医学鉴定实践中利用小肠内容物推断死亡时间提供实验依据.
