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玻片清洁方法的介绍
制作一张好的病理切片受到多种因素的影响.其中因玻片清洗不净而发生的脱片、染色效果不佳或附有脏物的现象是病理制片中经常遇到的问题,而制片质量的好坏直接影响诊断结果.特别是在南方潮湿地区,玻片上常带有霉点,用常规硫酸清洁法不能彻底清洗干净,而残留有痕迹.我们经过长期的实践,摸索出一种行之有效的酸碱双重清洁法,取得了满意的效果,现介绍如下.
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介绍一种新的玻璃器皿及玻片清洗剂
在病理技术工作中,玻璃器皿和玻片的清洁是一项日常的基本工作.所洗涤的玻璃器皿不够洁净会影响染色效果,甚至导致染色失败.特别是特殊染色,如酶的组化染色和银离子反应的操作过程,对玻片和染色用玻璃器皿的洁净度要求更高.
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免疫组化技术(八)
8 关于使用市售修复液产品的建议若使用便宜的"配制"液,那么可行的操作是在热循环的后阶段用冷流水冲洗热缓冲液;若使用昂贵的商品化液体,可借助手套将热的容器转移到一个有冷流水的槽中,并让溶液和玻片冷却10~15min后,将玻片迅速放入冷流水中,使贵重的修复液可以保留并可再次重复使用.
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镜下观察活体蚤的新方法
在进行跳蚤的分类鉴别时,通常需要制作成玻片标本,然后置于镜下观察.而进行蚤的活体动态观察,如蚤的生长发育过程、吸血状况和前胃菌栓形成等试验观察时,以往采用水沾湿或低温冷冻休克法,将跳蚤的活力降低,方能置于镜下观察.因此操作起来比较繁琐,且费工、费时,也容易造成操作失误.现我们介绍一种新的观察方法.
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染色方式与制片污染相关性的探讨
组织交叉污染是病理诊断的严重隐患,组织污染发生的环节很多,在被公认的易发生污染的环节(如取材、包埋、切片及捞片),不管是医师还是技术人员均会加以防患,但还是难以杜绝组织交叉污染。除上述环节易出现污染外,HE染色所使用的试剂有没有可能造成组织交叉污染?其发生概率有多高?我们通过检测并统计了组织学HE染色仪上的每种试剂中脱落的组织碎片数量及空白玻片的污染率,现总结如下。
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微流控芯片与常规玻片法在细胞培养和蛋白检测中的比较性研究
近年来,微流控芯片以其多种分析优势被广泛应用于生物医学领域,特别是在细胞及细胞内组分检测方面具有潜在的发展空间[1-2],借助其基本特征和优势,该技术亦可用于肺癌的耐药性研究.研究发现,糖调节蛋白78( GRP78)为细胞内应激蛋白,与肺癌耐药性密切相关[3].目前对其机制的研究主要以常规玻片为平台,该平台难以将细胞培养与蛋白检测集成到同一平片上,检测的便捷性和连续性均不足.
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影响ABO血型定型错误的主要因素分析
ABO血型的鉴定,目前常用试管法和玻片法,准确无误的血型鉴定,是我们医务人员的职责.但是,在实际工作中也会造成ABO定型错误,其主要原因分析如下.
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应用间期荧光原位杂交技术探讨cyclin D1 基因在乳腺癌中的扩增
本研究将用间期荧光原位杂交(interphase fluorescence in situ hybridization,FISH)技术研究cyclin D1基因在乳腺癌中的变化,为乳腺癌的术后治疗与预后评估提供新的生物学信息。 1.材料与方法:(1)试验材料:选取40例经手术切除治疗而病理诊断为乳腺癌的肿瘤组织,按国际TNM分期法(UICC 1988年)临床上属Ⅰ、Ⅱ期患者20例,Ⅲ、Ⅳ期患者20例。(2)细胞悬液的制备:制备单个细胞悬液,在杂交前2~4 d,将单细胞悬液滴在经处理过的玻片上,自然风干备用。(3)探针的制备:Cyclin D1探针购自Vysis公司(Fluoro-phore直接标记,呈红色)。(4)间期荧光原位杂交检测方法:玻片用100 μl RNA酶(100 μg/ml)37 ℃消化1 h,于70%甲酰胺2×SSC中(73±1)℃变性5 min后脱水,风干;同时将探针混合液(Lysis 杂交Buffer 7 μl,探针1 μl,2 μl纯净水)置(73±1)℃水浴箱内变性5 min,然后将变性探针混合液加于变性的细胞玻片上,封闭,置37 ℃温箱杂交过夜。将盖玻片取下,放入45 ℃ 50% 2×SSC甲酰胺内10 min共3次,然后再放入2×SSC液中洗10 min,后在室温放入加入0.1% NP-40的2×SSC内洗5 min和1 min(室温)凉干,加4′,6-二联脒-2-吲哚苯(DAPI)补染,在荧光显微镜下观看结果。(5)观察结果分析标准:在荧光显微镜下,选取肿瘤细胞分析,观察细胞核内荧光杂交信号并计数。每例计数100~200个细胞核。信号4~10为轻度扩增,10以上为
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脑脊液嗜酸性粒细胞检查对小儿脑囊虫病的诊断价值
脑脊液(CSF)嗜酸性粒细胞检查及其对小儿脑囊虫病的诊断价值的研究,国内报道罕见,1994年1月~1998年10月我院应用CSF细胞学方法,即侯氏CSF玻片离心沉淀法及侯氏CSF细胞分类法对18例小儿脑囊虫病检查结果表明,CSF嗜酸性粒细胞明显高于对照组,对小儿脑囊虫病的诊断有较肯定的价值,现报告分析如下.
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介绍一种废旧玻片回收清洗法
病理科回收再利用废弃玻片,以往采用的清洗方法较为繁琐,且清洗效果不理想,现介绍一种简易的清洗方法.
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诊断梅毒的USR与RPR实验的应用
近几年来,国内外诊断梅素的非螺旋体抗原血清实验,有性病研究实验玻片试验(VDRL)、快速血清不加热反应素玻片试验(USB)、快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)以及自动反应素试验(ART)和反应素筛选试验(RST)等方法.
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高通量组织微阵列技术在鼻咽癌组织p53基因表达中的应用
组织微阵列/组织芯片技术(tissue microarray/tissue chip)是近伴随基因芯片技术而发展的一种新方法,可在一张玻片上用不同方法一次性完成几百例以上的临床组织标本的基因结构及基因表达的分析,是快速、经济地大规模筛查组织中基因结构改变、表达异常的强有力工具[1].目前国内未见用这种技术进行基因表达研究的报道.
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梅毒患者血清学三项检测结果分析
八十年代以来,性传播疾病在我国呈快速蔓延趋势,特别是梅毒患病人数正逐年增多.此现象已受到有关部门和广大医务工作者的重视.本文收集60例梅毒患者血清进行三项(血浆反应素玻片试验RPR;梅毒确证试验;HBsAg检测)结果报告如下:
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血浆凝固酶试验质量控制的体会
金黄色葡萄球菌是引起化脓性疾病的重要病原菌,也是造成食品污染和细菌性食物中毒的常见致病菌之一.血浆凝固酶试验仍是基层实验室鉴定金黄色葡萄球菌的主要试验.常用方法有玻片法和试管法.试管法复杂,反应时间长,至少需3小时.玻片法快速、简便,但易出现假阳性.微生物质评结果中血浆凝固酶试验的准确性始终未能很好解决.本文从提高血浆凝固酶试验的准确性出发,根据实际工作中的体会做一介绍.
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彗星试验在职业暴露人群生物监测中的应用
近20年来,一些检测DNA损伤的新方法得到快速发展.Rydberg和Johanson~([1])首先将细胞埋入玻片凝胶中,在轻度碱性条件下裂解,并使DNA解开直接定量检测单个细胞DNA损伤.为了提高检测单个细胞DNA损伤的灵敏度,Ostling和Johanson~([2])发明了微凝胶电泳即彗星试验(comet assay).
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O型人血清中缺乏抗-A、抗-B 1例报告
产妇,25岁,汉族,因足月待产来我院住院.检查用达亚美卡血型鉴定定为O型D抗原阳性,反定型为AB型,然后用玻片法复查,结果与前者一致,随即做进一步鉴定.
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交叉配血中"O"型血误判为"AB"型1例
患者,84岁,因股骨颈骨折住院,术前由病房护士抽血送至我科进行检验.初次检查为"AB"型,Rh(D)阳性,于次日手术后因血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、红细胞计数(RBC)都低于正常而需输血,随即用玻片法和聚凝胺两种方法进行配同型 "AB"型血,结果两种方法都配血不合,两侧都发生凝集,再次配血还是不合.
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住院患者梅毒血清学试验结果分析
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性、系统性性传播疾病,人体感染梅毒螺旋体后会产生非密螺旋体抗体和密螺旋体抗体,前者为类脂质抗体是非特异性抗体,后者为特异性IgG 或 IgM 混合抗体[1]。常用的血清学检测试验有快血反应素试验(RPR)、血清不加热的反应素玻片试验(USR)、甲苯胺红快速血浆反应素环状卡片试验(TRUST)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、TPPA 等,现将我院2011-2013年住院患者梅毒血清学试验结果分析如下。
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混合蠕虫虫卵永久性封片标本的制备
近年来,我们利用中性树胶封片,使用双盖片法制作寄生虫虫卵玻片标本,制作方法简单,并能够长期保存,使用效果良好,现将其制备方法介绍如下.
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构建玻片蛋白质芯片的实验研究
目的:探讨玻片蛋白质芯片的构建方法及其中间操作条件的选择与优化.方法:利用生物芯片点样仪将超微量蛋白质点到经特殊处理的玻璃片表面,然后选用不同的化学试剂对玻片背景进行封闭;再用荧光素标记的蛋白质与点样蛋白杂交;后用生物芯片分析仪扫描成像并进行分析,比较不同条件下芯片的显示效果.结果:蛋白质样品与片基稳定结合,并保持原活性状态;封闭试剂选用酪蛋白或明胶效果较佳;点样探针与其特异蛋白质抗体可稳定结合,结合效果与点样蛋白浓度在一定范围内呈正相关;在1.6 cm×1.6 cm的玻璃片面积上,构建了36×36=1269点的蛋白质芯片.结论:本实验条件下,蛋白质抗原或抗体可以稳定地固定于经过处理的玻璃片表面,制成免疫型蛋白芯片,并可通过随后的抗原抗体反应与荧光素标记的相应抗体或抗原结合,用生物芯片分析仪可对其荧光信号进行检测分析.