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血块组织制片方法的改进
外检标本中,血块组织比较多见,尤其输卵管妊娠标本,其绒毛组织往往在血块组织内比较容易见到,所以,如何做好血块组织制片更显重要.通常情况下,血块组织比较难切,一是脆、硬,二是切片易碎,三是容易脱片.
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一种防脱玻片的制作方法
玻片的处理是做好免疫组化染色的重要步骤之一,如果处理不当,在染色过程中出现掉片,不但影响日常工作,也浪费试剂.多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine)具有良好的防脱片效果,为目前国内大多数病理实验室所采用.制作防脱玻片的方法有多种,我们采取两玻片反推法制作防脱玻片,操作简单,节省试剂.
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玻片清洁方法的介绍
制作一张好的病理切片受到多种因素的影响.其中因玻片清洗不净而发生的脱片、染色效果不佳或附有脏物的现象是病理制片中经常遇到的问题,而制片质量的好坏直接影响诊断结果.特别是在南方潮湿地区,玻片上常带有霉点,用常规硫酸清洁法不能彻底清洗干净,而残留有痕迹.我们经过长期的实践,摸索出一种行之有效的酸碱双重清洁法,取得了满意的效果,现介绍如下.
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微波网状纤维染色法在病理诊断中的应用
网状纤维是网状结缔组织内的一种纤维,由含有糖蛋白的胶原蛋白组成,易与氨银结合,常规应用Gomori和James等染色法进行染色,但存在染色步骤多、颜色暗淡、经常脱片等问题.我们经过摸索与实践,将微波运用于网状纤维染色,取得了良好的效果,现介绍如下.
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介绍一种改良分化液
在常规病理制片工作中,造成组织片染色脱片的原因有:①载玻片不清洁;②切片太厚;③捞贴片后片子未烤干;④染色时蜡未脱净.除了上述原因外,在退色时也会发生脱片现象,为此我们分析原因进行了改进,收到了很好的效果.
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制备硅化玻片技术方法的改进
防止组织切片或细胞涂片在染色过程中组织或细胞脱落(简称脱片)是免疫组织化学及原位分子杂交技术中的重要环节.为此,通常采用载玻片涂胶或硅化处理后再裱贴组织切片的方法来防止脱片.在众多的玻片涂胶和硅化方法当中,我们对一些方法进行了改进和探讨,总结出一种使玻片处理的操作更加简单,防止脱片效果更好的方法.
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胸(腹)水免疫细胞化学方法改进
免疫组织化学技术,已成为组织学诊断中不可缺少的辅助手段,特别是在肿瘤的组织学诊断、鉴别诊断中发挥了重要的作用.但在细胞学诊断中,特别是浆膜腔积液标本,却因易脱片、细胞涂片面积大,耗费试剂多、标本制作重复性差等方面的原因,不能像病理组织学作免疫组织化学那样常规开展.我们在临床细胞学检验中,对浆膜腔积液标本在做免疫细胞化学(ICC)前,进行必要的处理,克服以上影响其开展的因素,使之能像病理组织学作免疫组织化学一样成为病理科的常规工作,并获得了满意的结果.
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高温烤片对石蜡切片黏附、厚度与染色的影响
目的 笔者实验室近发现,高温烤片可有效解决甲基丙烯酸树脂包埋的组织切片的脱片问题,本文拟进一步研究确定高温烤片对石蜡包埋切片黏附、厚度及染色的影响.方法 大鼠肾脏石蜡切片(切片机设定的切片厚度10 μm)脱蜡后经90℃、140℃热板烤片30 min处理,然后用过碘酸-席夫试剂和苏木精染色,观察脱片情况、切片厚度及染色效果.大鼠脊髓石蜡切片(14μm厚)同样处理后分别进行小胶质细胞和突触素颗粒的免疫组化染色.结果 与对照(未烤片)相比,90℃或140℃烤片都有效防止了肾脏石蜡切片从载玻片上脱落,但染色后的实际切片厚度减少了约50%(与设定切片厚度相比),染色变浅,结构清晰度欠佳(90℃烤片后),甚至有细胞消失(140℃烤片后);90℃烤片后免疫阳性小胶质细胞或突触素颗粒减少,非特异性染色加深,140℃烤片后几乎未见免疫阳性结构.结论 高温烤片防脱片的方法可能不适用于石蜡切片.
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大鼠脊髓厚石蜡切片的免疫组化染色及防脱片体会
运用光学体视框估计免疫组织化学染色阳性结构(粒子)的数量需要较厚的石蜡包埋切片;对于这样的切片,其染色深度和防脱片是制片、染色过程中需要特别注意的问题.本文介绍了我们运用大鼠脊髓厚石蜡切片的免疫组化染色与防脱片的经验体会.
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血块组织制片技巧
中国误诊学杂志编辑部:血块组织标本在病理科的外检标本中比较常见且难以制成高质量的病理切片,一是脆、硬,二是易碎,造成切片不完整;三是容易脱片,从而影响病理诊断,尤其是输卵管妊娠标本,其绒毛组织往往在血块组织中才更容易找到,所以做好血块组织制片是非常重要的.现将技巧介绍如下.
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多聚-L-赖氨酸包被载玻片改良法
原位杂交和免疫组织化学是当前生物化学和分子技术进行基因及产物研究的常用方法,可确定各个细胞中mRNA和蛋白质在何时何处表达.这两项细胞技术的成功与否,关键在于载玻片的正确处理.经典的载玻片处理技术用加有洗涤剂的水清洗载玻片数分钟后,再于水中浸泡30 min.配制足量的500 μg/ml多聚-L-赖氨酸水溶液,逐一浸载玻片.经空气干燥后,贮于4℃,1周内使用.在实践中我们发现,该方法操作不当,易导致试验脱片现象.为确保各项重大试验质量,我们对经典方法进行改良,并取得很好的效果.
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国内外药品包装材料标准的比较
直接接触药品包装材料和容器(简称药包材)是药品的重要组成部分,它伴随药品生产、流通及使用的全过程.某些剂型本身就是依附包装而存在的,如胶囊剂、气雾剂、水针剂等,因此,药品的药包材如果选择不当,则可能直接影响药品质量,有些甚至会对药品质量及人体产生潜在隐患,例如安瓿、输液瓶(袋),如果没有针对不同药品采用不同配方和生产工艺,常常会有组分被溶出及玻璃脱片现象.又比如,天然橡胶塞中溶出的异性蛋白对人体可能是致热源,溶出的吡啶类化合物是致癌、致畸、致突变的肯定因素,而细微的玻璃脱片也有可能发生堵塞血管形成血栓或肺肉芽肿等等.
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胰蛋白酶-尿素联合消化增强石蜡切片免疫组化敏感性
胰蛋白酶和尿素均能明显地增强石蜡切片免疫组化的敏感性染色、降低背景[1],但胰蛋白酶消化力强,易脱片和破坏组织结构,而尿素消化力较弱,对多克隆抗体染色较差.针对上述缺点、我们曾对胰蛋白酶尿素联合处理的石蜡切片进行免疫荧光染色进行初步观察[2],近来我们对常用抗体结合的抗原用胰蛋白酶-尿素联合消化,进行免疫酶组织化学染色,获得了比单纯胰蛋白酶或尿素消化更好的特异性染色结果,现报告如下.
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皮肤石蜡半薄切片制作的方法与体会
皮肤组织因其组织结构复杂、硬度不一、韧性较大的特点,在常规石蜡切片中常会出现切片厚、有皱褶、易脱片等制片困难的现象.针对这些情况我科经过不断摸索实践,形成了一套制作皮肤石蜡半薄切片的方法,收到了良好的效果.现将制作方法和体会介绍如下.
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大体骨组织免疫组织化学染色的比较
骨组织因其十分坚硬,脱钙时间长,且在常规HE及免疫组织化学染色中均极易脱片,不能观察完整的骨组织结构.常规骨组织采用混合酸即45%盐酸、55%甲酸和EDTA脱钙.20例兔股骨头10例采用昆合酸液[1](福尔马林100ml,生理盐水800ml,甲酸70ml,盐酸80ml,三氯化铝结晶60g,冰醋酸25ml)脱钙,10例采用45%盐酸、55%甲酸脱钙,均用10%中性福尔马林作为固定液,采用胰酶消化方法定位,观察骨组织结构改变和蛋白抗原保存情况,混合酸液[1]得到了较满意的结果.
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骨组织的石蜡切片及苏木素-伊红染色方法的改进
在常规的病理技术工作中,骨、牙齿及其他钙化组织的石蜡切片及苏木素-伊红(HE)染色难度大,硬骨组织所含的钙主要为磷酸钙和碳酸钙等,其与黏合质结合甚牢.在制作切片前,必须脱钙才能切片,通常遇到脱钙液对骨组织渗透力不强,脱钙不彻底,致使骨组织硬,切片时刀片容易产生缺口.制片不成型,厚薄不均,即使勉强切出片,质量也很差,染色容易脱片.
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原位杂交染色的经验
近年来,分子生物学技术正以惊人的速度渗人医学和生物学的各个领域,原位杂交技术被广泛应用于医学科研中,但在具体实验过程中常常会遇到脱片、背景颜色深,着色不理想等问题,本实验组在实验过程中总结了一些经验,以供参考。
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介绍清洁载玻片的新方法
在制作病理切片过程中,影响制片效果的原因很多,其中为常见的原因就是载玻片不清洁,容易引起脱片,染色效果不佳,镜下结构不清晰等现象,从而直接影响诊断结果.用过的旧载玻片丢弃了,不但浪费大量资源,而且易引起环境污染.我科室经过多年的长期实践,摸索出一种简便易行且安全有效的清洁载玻片的新方法,取得满意的效果,现介绍如下.
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组织制片中脱片的因素和防止方法
在组织的常规制片、特殊染色和免疫组织化学染色时常常因组织与载玻片的脱离而致染色失败,尤其是免疫组织化学染色,因操作时间长,切片在缓冲液中反复冲洗,脱片的几率就更大.因此了解脱片的因素和防止脱片的方法至关重要,现介绍如下.
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一种用APES处理载玻片防止免疫组化染色掉片的方法
无论是石蜡切片,还是冰冻切片,在进行常规H-E染色、组织化学染色、原位杂交、免疫组织化学染色时,都存在着掉片现象.特别是在需要连续冰冻切片时,如果在免疫组化染色的过程中,掉片就带来重复取材、切片、染色,因而影响整个实验的进度并造成人,财、物的浪费.人们为了防止冰冻切片在免疫组化染色过程中的脱片,采用购置商品化的防脱载玻片,但费用较高,尤其针对于小额资助的科研项目及缺乏足够经费支持的研究生科研,选择自已动手制备防脱玻片是切实可行的手段.