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等温扩增荧光法(IAFT)快速检测食品中沙门菌方法的建立
沙门菌属一类革兰氏阴性杆菌,是引起人类食物中毒的常见细菌之一。传统的沙门菌检测方法主要是经过增菌培养,分离琼脂平板培养等步骤后,通过形态学和染色法和各种生化指标,如硫化氢气体、赖氨酸脱羧酶、氧化酶、靛基质尿素和KCN等加以鉴定。
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小鼠外周血网织红细胞微核吖啶橙染色法的研究
微核试验是遗传毒理学中一个重要的监测指标,但现采用的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核Giemsa染色法,染色特异性差、伪核难辨,不能进行连续动态的观察.近年来日本的Hayashi[1]报道了一种小鼠外周血网织红细胞微核吖啶橙染色新方法.该方法染色特异性强,对评价化学物质的诱变性有较大的实用价值.为此,我们在建立该方法的基础上,对染色步骤进行了改进,使之更加简便和完善.以6种染色体诱变剂探讨了不同年龄,不同性别小鼠外周血网织红细胞微核的变化,微核出现高峰的时间.为该方法的推广应用提供依据.
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隆力奇纯蛇粉免疫作用的初步观察
目的探讨隆力奇纯蛇粉对小鼠免疫功能及对抗免疫抑制剂作用的影响.方法 48只小鼠随机分为阴性组(A组)、纯蛇粉8g/kg(B组)环磷酰胺50 mg/kg(C组)、纯蛇粉8g/kg+环磷酰胺50mg/kg(D组),其中A、C组给予普通饲料,B、D组给予拌入纯蛇粉的饲料,自由进食30 d,在免疫后的第4天,C、D组每只动物背部皮下注射环磷酰胺50 mg/kg.测定小鼠脾重,胸腺重,并采用抗体形成细胞(PFC)检测法,血清溶血素测定法、迟发型变态反应(DTH)及α-萘乙酸酯酶(ANAE)染色法对小鼠体液及细胞免疫功能进行测定.结果小鼠喂养30d后处死,称取胸腺.脾脏重量,结果显示纯蛇粉组的脾脏及胸腺重量均高于其他组,并对免疫抑制剂环磷酰胺所致的两者重量减轻有一定的对抗作用.
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ADVIA 120堵针的一般处理
ADVIA 120 是拜尔公司于上世纪末推出的一款六分类全自动血细胞分析仪.采用了拜尔的集成流路板 UFC技术 ,使得仪器的流路一目了然,结构大为简化.白细胞分析采用过氧化物酶染色法及嗜碱染色法对白细胞进行分类和计数 ,两通道之间的计数结果提供了复核平衡,并且据白细胞大小 ,过氧化物酶活跃度和细胞核的密度 ,提供了六分类功能;血小板分析 ADVIA120系统使用了全新的光学系统,有利于精确的血小板分析;另外 ADVIA 120系统还可以在线检测网织红细胞.其可以说是世界上先进的细胞分析仪之一,目前在我国已得到广泛的认可.该机日常操作简单,故障率极低.在日常使用过程中常见的报警就是" Probe clogs".下面就这一问题的解决方法与大家共同探讨一下.
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三分类血液分析仪测量原理及实现过程技术要点分析
在目前临床检验医学中,血衣分析仪是必不可少的、使用率高的常规涉笔之一,经过50余年的发展,它已经从半自动到全自动;无分类到三分类、五分类;但通道阻抗法到双通道、多通道;阻抗+激光染色法.
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结核杆菌抗酸染色中美兰与孔雀绿复染液效果比较
结核病控制的关键是发现传染源,结核杆菌痰涂片抗酸杆菌染色法是目前快捷、简便、可靠的发现手段.为提高痰片抗酸染色质量,本文对抗酸染色孔雀绿和美兰两种复染液的染色效果进行了比较.
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早期大肠癌染色与放大内镜诊断及内镜下粘膜切除术的相关研究
目的探讨早期大肠癌的染色与放大内镜诊断及内镜下粘膜切除术(EMR)的治疗价值.方法利用靛胭脂染色后放大内镜观察腺管开口类型,判断病变性质及浸润深度,并经活检病理组织学证实诊断.对侧向生长型(LST)及凹陷型早期大肠癌行EMR或分片粘膜切除术(EPMR).结果 32例早期大肠癌中粘膜内癌17例,粘膜下浸润癌15例,病变大为42mm×58mm.内镜下呈隆起型19例,凹陷型5例,颗粒均一型3例,结节混合型5例.大肠粘膜腺管开口类型Ⅳ型1例,Ⅲs型2例,Ⅴ型29例.治疗采用内镜下单纯电切或电切+肠段切除术13例;EMR或EPMR19例,18例切除标本未见癌组织残留.内镜完全切除率93.7%(30/32).术中出血5例,经内镜止血,1例用钛夹缝合止血.1例EMR治疗6个月后复发.结论染色与放大内镜有助于早期大肠癌诊断,Ⅴ型腺管开口为其重要特征,EMR或EPMR是较为有效的治疗方法.
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SYBR Green染色法检测肺癌及癌旁组织端粒酶活性
目的研究TRAP-SYBR Green染色法定性检测端粒酶活性的方法及端粒酶活性在肺癌及癌旁组织中的表达,并探讨端粒酶的表达与P53之间可能的关系.方法采用TRAP-SYBR Green染色法检测36例肺癌、36例癌旁组织、8例肺部良性病变组织和A549肺腺癌细胞株端粒酶活性的表达,并利用免疫组化技术检测肺癌组织P53蛋白表达水平.结果 TRAP-SYBR Green染色法可检测出5个A549肺腺癌细胞所表达端粒酶活性.83.3%(30/36)的肺癌组织,3/8肺部良性病变组织,19.4%(7/36)的癌旁组织表达端粒酶活性.端粒酶活性的表达与肺癌组织的病理类型、肿瘤大小、临床分期无相关性.在30例表达端粒酶活性的肺癌组织中P53呈现过度表达的占80%(24/30),端粒酶活性与P53蛋白表达水平之间具有相关关系.结论 TRAP-SYBR Green染色法是一种较为灵敏、快速、简便的定性检测端粒酶活性的方法;端粒酶活性的定性检测可作为肺部恶性肿瘤诊断的辅助指标之一;端粒酶与P53之间的关系有待进一步阐明.
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补中益气汤影响Th1/Th2平衡的疗效研究
材料与方法:♂,无特殊病原体(SPF)和GFBALB/C小鼠,各自在SPF和GF条件下饲养;补中益气汤水提物再精炼成固体粉末(6400mg),经50Gy γ线辐射后溶于灭菌水备用;实验设计:实验一,四组小鼠,每组7只,两组用SPF小鼠①②,两组用GF小鼠③④;实验二、三组GF小鼠(1)(2)(3),每组7只;以上7组小鼠在5~6周龄时开始实验(day 0或week 0),OVA(ovalubumin)1μg/d(i.p.使机体将OVA作为抗原产生相应抗体)×3次(week 0、2、4);实验一的②④组和实验二的(2)(3)组OVA 5mg/d(口投给药,使机体产生口服免疫耐受)×4d(d-7~d-4);实验二的(3)组在day 0以前补中益气汤1g/kg/d(灌胃)连续预给药2~3weeks;以上7组小鼠在week 5时处死收集血样,同时无菌取脾脏,用已报道的细胞染色法显示脾细胞内细胞因子,用流式细胞分析法测小鼠脾脏内被染色的不同细胞因子的比率来计算Th1/Th2值;①③(1)组血清作为对照,其OVA抗体效价标定为100U/ml;ELISA法测血清抗OVA的IgG1抗体,荧光ELISA法测血清抗OVA的IgE抗体、IgG2a抗体;所有数据用x±s表示,数据分析用学生t检验.
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小鼠胚胎皮层神经细胞原代培养的形态学观察
为了探讨鼠皮层神经细胞的形态学变化规律,本研究建立了小鼠胚胎皮层神经细胞体外原代培养的模型,连续培养6周,应用NSE染色法进行形态学观察.
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超声及微波辐射技术在制备穿刺活检组织切片中的应用
肝、肾、肺等穿刺活检组织体积微小、质软易碎,送检时常被预先固定.对其做快速病理诊断时,冷冻制片法常造成切片不全、细胞肿胀、冰晶裂隙等假象;传统快速石蜡制片法安全性差,易出现组织收缩、染色不清晰.我们将超声、微波辐射技术用于制备穿刺活检组织切片,既克服了上述不足,又缩短了制片时间,基本达到常规石蜡切片的效果.
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微波网状纤维染色法在病理诊断中的应用
网状纤维是网状结缔组织内的一种纤维,由含有糖蛋白的胶原蛋白组成,易与氨银结合,常规应用Gomori和James等染色法进行染色,但存在染色步骤多、颜色暗淡、经常脱片等问题.我们经过摸索与实践,将微波运用于网状纤维染色,取得了良好的效果,现介绍如下.
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桔黄G染色法在显示神经髓鞘中的应用
在神经病理诊断和研究工作中,显示神经髓鞘多采用Weil铁明矾苏木精染色法.根据神经髓鞘的组织结构特点,我们采用桔黄G法对神经髓鞘进行染色,收到了理想效果.
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Feulgen染色方法的改良
Feulgen染色是显示细胞核DNA较具特异性的一种染色法,由于步骤繁杂,染色时间长,染色效果极易受组织固定液种类、盐酸水解时间和温度的影响,故肿瘤细胞DNA含量的测定值偏差较大.我们在原有Feulgen染色法基础上,增大盐酸浓度,从而缩短染色时间,同样可获得满意的效果.
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一种改良的脂肪染色法
在临床病理诊断和科研工作中,HE切片常出现大小空泡,究竟是脂肪变性、水泡变性还是糖原贮积;肿瘤是否为脂肪源性;骨折患者是否有脂肪栓塞等都需要用脂肪染色加以鉴别.用于脂肪染色的油红O、苏丹类染料一直使用丙酮或异丙醇[1]配制,而丙酮和异丙醇极易挥发产生沉淀,染色时易在组织片上留下红色结晶,并且使用液不易保存每次染色需要重新配制.我们经过不断探索,摸索出一种易配制、不易产生沉淀、易保存、性能稳定的方法,该方法操作简便,染色效果很好,现介绍如下.
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SARS病毒包涵体3种染色方法比较
包涵体是病毒感染的依据,在常规HE染色中部分病毒包涵体(如巨细胞性病毒、传染性软疣)容易找到,部分病毒包涵体不易发现(如核内包涵体、疱疹病毒包涵体等).在光镜下若找不到确切的包涵体,做特殊染色就显得更为必要.新近发生的严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory sgndrome,SARS),由于病因学尚有争议,有学者认为是冠状病毒,也有学者认为可能是衣原体变异或新型衣原体,故寻找病毒包涵体便成为关键.我们对1例SARS感染者尸解肺组织,通过几种不同的病毒染色方法进行比较,认为Macchiavell改良亚甲蓝碱性品红染色法染色较为理想,并认为染色过程中对分化的掌握至为重要.
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浓湿法血检疟原虫的实验观察
目前显微镜检查疟原虫仍然是疟疾实验诊断和疟疾流行病调查的一种常规的、不可缺少的方法[1~3].为了提高诊断速度和检出率,李立等[4]首次进行了疟疾快速诊断-湿血片染色法(以下简称湿片法)研究,并获得了较好效果,检出速度和检出率均优于常规薄片法,但逊于厚片法.为进一步提高疟原虫检出率,探讨其在疟疾早期诊断中的价值,作者采取增加采血量,经溶血、离心处理后,湿片染色法(简称浓湿法)检查疟原虫,取得较满意的效果,现报告如下.
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结直肠癌内ETS-1、血管内皮生长因子C蛋白表达及微血管和微淋巴管密度的意义
结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤,我们采用双标染色法及免疫组织化学EnVision法,用CD34来标记观察结直肠癌组织内的微血管密度(MVD),用特异性的淋巴管标记物D2-40标记肿瘤组织内的微淋巴管密度(MLD),分析MVD、MLD与结直肠癌的生物学行为及预后的关系,并分析MVD、MLD与ETS-1、血管内皮生长因子(VEGF)C蛋白表达之间的关系.
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弹力纤维染色与免疫组织化学双重染色技术
我们采用Gomori醛品红弹力纤维染色法和免疫组织化学SP法结合的双重染色方法,可同时显示血管壁上的弹力纤维和某些抗原成分,效果满意,介绍如下.
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Sihler's 染色法初步观察人表情肌的肌内神经分布
本研究借助sihler's 染色技术观察人表情肌的肌内神经分支分布,为临床开展整形美容术提供解剖学基础。首先通过改良的sihler's 染色技术对2例人的表情肌进行整肌染色,分别经过除色素、脱钙、染色、脱色、中和和透明,使表情肌的肌内神经呈现,借助X线阅片厢观察并摄片。通过观察我们发现,面部表情肌均由面神经支配。颞支分出2-3支,向前分别进入额肌和眼裂以上的眼轮匝肌。神经纤维几呈直角进入眼轮匝肌,分支4-5支,其末梢部与来自动眼神经的上支共同支配上睑提肌。眼裂下部的眼轮匝肌则由面神经的颧支支配,纤维亦呈直角向上进入该肌,分支约有3-4支。颊支与颧支的位置接近,彼此有分支交织在一起,且分支数目较多,这可能与口周围肌数目多,比较发达有关。特别是口轮匝肌的神经分支丰富。口裂以上的轮匝肌主要由颊支支配,分支呈直角进入该肌,每侧约有数十支细小的纤维,颊支的纤维亦进入提上唇肌。口裂以下的轮匝肌则由下颌缘支的深部颏神经支配,每侧的分支约有数十支,呈直角进入。降口角肌主要由下颌缘支的浅支支配,亦有分支进入降下唇肌和轮匝肌。藉此,对主要的表情肌的肌内神经分支分布进行了初步观察,发现表情肌的肌内神经配布与其功能相关,越是发达的表情肌其肌内神经配置也越复杂。