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聚羟基丙烯酸在Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌中的应用
目的 探讨环保固定液聚羟基丙烯酸在Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌的应用价值.方法 手术切除且术后病理证实为结核病标本96例,每例标本同一病变部位取材2块,用抽签法随机分为A、B组.A组采用4%中性缓冲甲醛固定,B组采用聚羟基丙烯酸固定,均制作切片96张.采用Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌,使用SPSS20.0分析比较A、B组切片结核杆菌阳性率的差异.结果 ①生物显微镜下,两组切片染色结果:背景洁净、细胞轮廓清晰、胞核呈蓝色,背景着色为淡蓝色、结核杆菌呈鲜红色、对比度好.且同一病变部位B组切片显示结核杆菌数量显著多于A组.②A、B两组切片结核杆菌阳性率分别为58.3%和66.7%,两组间阳性率差异显著(x2=6.125,P<0.05).结论 环保固定液聚羟基丙烯酸有潜能替代传统试剂4%中性缓冲甲醛应用于Wade-Fite苯酚碱性品红法检测结核杆菌.
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Schiff试剂配制方法的改良
在应用PAS法显示中性黏液等物质时,Schiff试剂的配制至关重要.传统方法配制过程繁琐,稍有不慎即造成配制失败.作者对传统的Schiff试剂的配制方法进行了改良,效果良好,现介绍如下.1材料与方法1.1材料①碱性品红饱和水溶液(约0.4%)100ml;②偏重亚硫酸钠1.0g;③浓盐酸(浓度37%,体积质量1.19)0.8ml.
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SARS病毒包涵体3种染色方法比较
包涵体是病毒感染的依据,在常规HE染色中部分病毒包涵体(如巨细胞性病毒、传染性软疣)容易找到,部分病毒包涵体不易发现(如核内包涵体、疱疹病毒包涵体等).在光镜下若找不到确切的包涵体,做特殊染色就显得更为必要.新近发生的严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory sgndrome,SARS),由于病因学尚有争议,有学者认为是冠状病毒,也有学者认为可能是衣原体变异或新型衣原体,故寻找病毒包涵体便成为关键.我们对1例SARS感染者尸解肺组织,通过几种不同的病毒染色方法进行比较,认为Macchiavell改良亚甲蓝碱性品红染色法染色较为理想,并认为染色过程中对分化的掌握至为重要.
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以天青A染料显示DNA的染色方法
对肿瘤细胞核中的脱氧核糖核酸(DNA)含量进行测定,根据其倍体及细胞周期情况对肿瘤细胞的良恶性、恶性程度以及预后加以判断,称为DNA定量分析.能进行这种测定的主要有流式细胞仪和图像细胞仪两种.图像细胞仪分析由于具有直观、标本适用性广等特点深受广大病理工作者的青睐.DNA图像细胞分析首先必须进行DNA染色,传统的染色方法是Feulgen法,所用染料为碱性品红.我们采用天青A作为染料,替代碱性品红,取得了良好的DNA染色效果.
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胃淋巴瘤组织Survivin表达与幽门螺杆菌感染的关系
目的:探讨Survivin基因在胃淋巴瘤中的表达及其与幽门螺杆菌(H pylori)感染的关系.方法:用免疫组化法检测30例胃淋巴瘤和30例正常胃组织Survivin的表达,同时用碱性品红染色法检测30例胃淋巴瘤及30例对照组H pylori感染情况.结果:30例胃淋巴瘤中14例Survivin表达阳性,而正常胃组织均无表达(46.67% vs 0%,P=0.0002).Survivin表达与淋巴瘤分化程度、淋巴结转移及预后相关.胃淋巴瘤组织中H pylori阳性检出率11例,正常胃组织7例(36.7%vs23.33%,P=0.26).胃MALT型淋巴瘤Survivin阳性表达与H pylori感染有显著相关性(r=0.644,P=0.04).结论:Survivin基因在胃淋巴瘤中表达上调,而且与分化程度、淋巴结转移及预后有关.H pylori感染与胃MALT型淋巴瘤和Survivin表达有关.
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C57BL/6小鼠幽门螺杆菌感染动物模型的建立
目的:建立幽门螺杆菌(Hpylori)小鼠感染模型.方法:以C57BL/6小鼠为实验动物,经口感染接种Hpylori悉尼株(SS1),置层流柜中饲养.用HE染色、石碳酸-碱性品红染色、免疫组织化学染色、尿素酶实验、细菌培养等方法检测接种小鼠,并用PCR、基因测序方法对胃组织细菌、胃组织分离培养细菌DNA进行分析.结果:小鼠胃组织分离培养的细菌与接种细菌形态及特性相同.胃窦隐窝可观察到细菌定植,胃黏膜下层可见炎症细胞浸润.胃组织DNA中成功扩增出H pylori 16SrRNA及cagA基因的目的片段,基因测序结果显示与接种菌株序列完全一致.结论:H pylori SS1经口接种C57BL/6小鼠2 mo后可成功在胃内定植并导致成慢性胃炎.
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用T、B-NFR染色法代替P、A、S染色法病理技术工作中应用的实践体会
Schiffs法原料价格昂贵,又不易购到,加之配制程序又太繁事,不易掌握,往往导致染色效果不佳,甚至失败。为此我们用多种染色方法进行了研讨,以便代替Schiffs反应,方便临床检查。经筛选提出,用甲苯胺兰代替碱性品红,显示多糖类物质,取得了可喜的结果。现报告如下。
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蚕豆根尖微核试验检测游离余氯的致突变性
目前,广泛应用的生活饮用水消毒方法是氯化消毒.氯化消毒后,饮用水中存在的游离余氯是否具有致突变性和致癌性尚未见文献报导.为此,笔者应用蚕豆根尖微核技术对游离余氯的致突变性进行了实验研究.实验试剂:95%酒精、冰醋酸、盐酸、碱性品红、偏重亚硫酸钠、蚕豆(vicia faba,由华中师范大学生物系金波先生提供)、漂白精片、邻联甲苯胺、重蒸馏水(凌源监狱分局制剂室提供,符合国家药典要求).
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无盐酸Weigert弹性纤维染色技术探讨
在皮肤和心血管疾病的研究中,经常应用Weigert间苯二酚-碱性品红染色对弹性纤维进行定性或定量分析.本文对无盐酸Weigert弹性纤维染色进行了探讨,并与有盐酸Weigert弹性纤维染色进行比较,以期为弹性纤维的研究探索一种更为简便可行的方法.
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十二指肠炎所致出血的特点分析
1996年1月-1999年1月,我院消化科共收治上消化道出血患者412例,其中384例行胃镜检查.所有行胃镜检查者中,单纯十二指肠炎(Duodenitis,DI)26例,占6.77%,合并其他上消化道疾病的DI 168例,占43.75%,合计194例,占50.53%.本文试就DI所致出血的特点作一分析:一、临床资料:本组194例均为本科住院患者,以呕血、黑便为主要表现,排除服用铁剂、食物影响,排除下消化道出血情况.患者均在住院24~72h内行胃镜检查,胃镜型号为Olympus XQ30或富士能电子胃镜410型.单纯DI患者,观察性别、年龄、诱因、病程、出血方式、腹痛、晕厥、镜下表现、大便转黄时间、粪隐血阴转时间等项目.其中21例行病理检查,同时用0.25%碱性品红染色法观察Hp.合并其他上消化道病变的DI患者,观察其具体合并症的类型.
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介绍一种简易抗酸染色法
A液:碱性品红25g,无水乙醇50ml,石炭酸25g,蒸馏水500ml,吐温-80 75滴.将品红粉放在研(缶夲)中,加乙醇研磨,然后加石炭酸和部分蒸馏水,混合均匀后倒入一只玻璃烧杯中,加水全溶,滴加吐温-80,倒入磨口瓶中塞紧,静置24小时后过滤.
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抗酸染色中碱性品红用量分析
抗酸染色主要使用对象是抗酸菌中的抗酸杆菌,其属于分枝杆菌。结核分枝杆菌是引起人和动物结核病的病原体,常侵犯全身各组织及器官,尤其是以肺、淋巴结等多见。由于其内含大量脂质,故对一般染液不易着色,从而影响诊断及治疗。常规抗酸杆菌染色多采用传统的Ziehl-Neelsen法[1],但染液放置一段时间后易出现沉淀,滴染时切片上染液残渣易造成污染。本科室在配制染液时通过对碱性品红用量的调整及对比染色,能较好的显示抗酸杆菌,现报道如下。
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19例麻风病杆菌抗酸染色
结核杆菌及麻风杆菌的细菌包膜含有一层特殊的类脂质,有拒染作用,一般染色不易着色.我院皮肤科病理室对传统的抗酸染色方法进行改进,提高了麻风杆菌的染色率.
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高碘酸在抗酸染色中的应用
显示抗酸菌的染色方法有Zienhl-Neelsen氏法、Wade-Fite氏法、碱性品红染色法1等方法,但由于这些方法对抗酸染色后的抗酸菌易退色,不能长时间保存,以致对病人治疗前后动态观察及科研带来一定影响.我科于2001年开始在Wade-Fite氏染色方法的基础上进行改良,在石碳酸碱性品红染色前加用10%高碘酸(Periodic Acid,分子式H5JO6)水溶液作氧化剂,所染出的切片经过4年保存,仍见数量较多的抗酸菌,而且颜色鲜艳、清晰.现将有关方法及结果报道如下.
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催化动力学光度法测定痕量间苯二胺
目的:建立动力学光度法测量痕量间苯二胺的新方法.方法:在中性介质中,碘酸钾和过氧化氢氧化碱性品红并使其褪色,间苯二胺对该褪色反应有明显的催化作用.结果:在对反应试剂用量、温度、时间等反应条件进行优化的基础上,建立了测定痕量间苯二胺的催化动力学光度新方法.该方法测定间苯二胺的浓度范围为0.49~5.0 μg/L,检出限为0.1 μg/L,对1.0、4.0 μg/L的间苯二胺溶液分别进行6次平行实验,相对标准偏差分别为2.9%、2.1%.结论:该方法简单、易操作、灵敏度高.
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碱性品红-溴酸钾体系催化动力学光度法测定痕量钒
目的:建立催化动力学光度法测定痕量钒的新方法.方法:在柠檬酸介质中,利用钒对溴酸钾氧化碱性品红的催化作用,在536 nm处测量催化体系和非催化体系的吸光度的变化,用催化光度法测定痕量钒.结果:测定钒的线性范围:0.00100~0.0250 μg/ml,检出限为5.7×10-11 g/ml.结论:该法简单,灵敏度高,选择性好,可用于食品中痕量钒的测定.
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菌斑染色剂的制备及质量控制
目的:研究菌斑染色剂的制备及质量控制.方法:用分光光度法测定菌斑染色剂中碱性品红的含量.结果:碱性品红在1.07~3.22 μg·ml-1浓度范围内与吸光度呈良好线性关系(r=0.999 9,n=5),平均回收率为99.64%,RSD为0.46%(n=9).结论:菌斑染色剂的制备工艺简单,质量控制方法可行.
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胃幽门螺杆菌的快速病理诊断方法
目前临床检验胃幽门螺杆菌(HP)的方法多种多样,包括生化方法,病理检验方法,多聚酶链增扩法(PCR)等.但动态的临床疗效观察仍需病理切片特染诊断来证实.病理特染方法诸如镀银法、单纯法、Griemsa法、碱性品红法等.其效果均不够理想.我们选用国产May-Griemsa法显示HP方法简便、快速、效果良好,现将方法介绍如下.
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碱性品红染色活体细菌方法的建立
目的:建立活体细菌着色观察的实验方法.方法:将金黄色葡萄球菌,黄色微球菌,大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的18h固体培养物洗脱,并离心洗涤后,NS稀释浓度为5×107菌落形成单位/毫升 (Colony forming unit,CFU/mL),分实验与对照组各4珠菌. 实验组细菌经不同浓度与作用时间的碱性品红(Basic fuchsin,BF)着色洗涤后,保存于甘油磷酸缓冲液.镜下观察细菌动力,同时采用平皿倾注法测取两组细菌CFU/mL,观测染液浓度、作用时间及甘油缓冲液配制对细菌存活率的影响.结果:与对照组相比,0.5%BF染色时,细菌CFU无显著性差别(P>0.05),染料大于此浓度染色时,CFU有差别性(P<0.05),染色时间10min内CFU无显著性差别(P>0.05).30%甘油磷酸盐缓冲液保藏着色活体细菌,在60h内无显著性差别(P>0.05),72h后有差别性(P<0.05).结论:0.5%BF染色细菌并保藏于30%甘油磷酸盐缓冲液中,细菌动力与存活率在一定时间内较稳定,适用于活体细菌显色法的形态学检测.
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纸基-表面增强拉曼光谱法检测染色掺伪的红花药材
目的:建立一种纸基-表面增强拉曼光谱方法对染色掺伪的红花进行检测.方法:用浸泡法制备的银胶纸作为拭子擦拭经乙醇溶液润湿的红花,对拭子的擦拭区进行SERS检测.先后对拭子的浸泡时间、干燥条件和乙醇溶液的浓度等因素进行优化.结果:成功检测经甲基红、碱性品红、金胺O和对氨基偶氮苯4种常见染料染色的红花药材.结论:纸基-表面增强拉曼光谱法可实现对染色红花的快速、简单、灵敏和无损的检测,并满足现场快检的需求.