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等温扩增荧光法(IAFT)快速检测食品中沙门菌方法的建立
沙门菌属一类革兰氏阴性杆菌,是引起人类食物中毒的常见细菌之一。传统的沙门菌检测方法主要是经过增菌培养,分离琼脂平板培养等步骤后,通过形态学和染色法和各种生化指标,如硫化氢气体、赖氨酸脱羧酶、氧化酶、靛基质尿素和KCN等加以鉴定。
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四种方法检测鼠疫菌的实验研究
在鼠疫自然疫源地监测工作中,通常是以细菌学检验和血清学检验并用,血清学检验方法虽然发展较快,灵敏度也较高,如IHA[1](间接红血球凝集试验),RIHA[2](反向血凝试验),ELISA[3](酶联免疫吸附试验),RIP[4](放射免疫沉淀试验).又如核酸探针[5]和PCR[6](聚合酶链反应)及鼠疫细菌学的分子生物学诊断技术,这些方法虽然敏感、特异、又具有先进性,但这些方法只能做追溯性诊断或提供间接的诊断依据.而鼠疫自然疫源地的终判定及分型,必需是分离出鼠疫菌才是可靠的、直接的判定依据,因此,选择使用方法简便、检菌率高的培养基是非常必要的.笔者用乳糖肉汤增菌[7,8]、普通营养琼脂平板培养、小白鼠接种试验、涂片显微镜检验四种方法进行了鼠疫菌的检测试验研究,结果如下.
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不同DNA提取方法对PCR检测解脲支原体的影响
目的:比较PK、NK和PCI三种不同DNA提取方法对解脲支原体PCR的影响.方法:从临床得到的330份怀孕妇女的尿标本,接种到液体培养基和A8琼脂平板,液体培养阳性的标本1/10稀释后,用PK、NK和PCI三种不同DNA提取方法进行提取,分别作PCR及抑制实验,比较三种提取方法的敏感性和特异性.结果:液体培养和A8琼脂平板培养的阳性率分别为68.1%和39%,两者符合率为76%,PK、NK和PCI的敏感性为52.5%,55%,87.5%;特异性为65.8%,76.3%,60.5%;抑制率为33.3%,33.0%,3.3%.结论:在PK、NK和PCI三种不同DNA提取方法中,以PCI敏感性高,抑制率低.