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ATP荧光法细菌总数快速检测系统
全面提高我国食品卫生水平是解决食品安全问题的重要方面,不仅需要法制建设、执法管理、科技保障和全民科学、道德教育等诸多方面的努力,还要赖于建立一套能对食品原料、生产设备、流通营销环节的包装材料、窗口等进行有效卫生监督和预警的技术手段.ATP荧光法细菌总数快检仪是一种利用新型微生物ATP生物发光法测定食品中细菌污染程度的快速检测设备.
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等温扩增荧光法(IAFT)快速检测食品中沙门菌方法的建立
沙门菌属一类革兰氏阴性杆菌,是引起人类食物中毒的常见细菌之一。传统的沙门菌检测方法主要是经过增菌培养,分离琼脂平板培养等步骤后,通过形态学和染色法和各种生化指标,如硫化氢气体、赖氨酸脱羧酶、氧化酶、靛基质尿素和KCN等加以鉴定。
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食品理化检验标准中对荧光法的实际应用
近些年,国内食品工业化程度日益扩大与迅猛提升,广泛应用了更多新添加剂与工业技术,导致国内屡次发生食品安全事件。食品安全已升级为现阶段全社会重点关注的重点话题。从根本上说,食品安全问题一方面与国民生命安全、身体健康有着直接相关性,另一方面还会对社会长期发展与安全产生直接性影响。荧光检测技术是以辐射跃迁原理为基础的一种特异性检测工艺,该技术的出现和原子、分子结构的相关性极强,而且具有较强的选择性、较高灵敏度以及精准定量等诸多优势,在复杂基质中分析与检测相关化合物较为适用。
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ATP荧光法快检系统实现细菌总数的快速检测
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城乡婴幼儿维生素B1、维生素B2和烟酸机体营养状况分析
目的 了解城市和农村地区婴幼儿维生素B1 (VB1)、维生素B2(VB2)和烟酸的机体营养状况及其差异,为制定婴幼儿营养干预措施提供依据.方法 抽取山东省某市0~3岁婴幼儿106名,农村0~3岁婴幼儿290名.取婴幼儿晨尿40ml,采用荧光法测定尿液中VB1、VB2和烟酸的含量.结果 城市婴幼儿VB1、VB2和烟酸偏低和不足的百分比分别为1.9%、8.0%和9.1%,农村分别为4.5%、56.7%和27.1%.城乡婴幼儿机体VB1含量的中位数分别是495.00和420.56μg/g,其中12月~和24月~组城市高于农村(P<0.05).城乡婴幼儿机体VB2含量的中位数为303.07和70.88 μg/g,各年龄组婴幼儿VB2城市均高于农村(P<0.05).城市及农村婴幼儿机体烟酸含量的中位数分别为6.31和4.22mg/g,其中6月~组、12月~组、18月~、24月~组婴幼儿烟酸含量存在城乡差异,城市高于农村(P<0.05).结论 城市和农村地区婴幼儿VB1、VB2和烟酸机体营养状况城乡差异显著,且城市均好于农村,农村地区VB2和烟酸缺乏比例较高.
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光黄素荧光法测定保健食品中的维生素B2的方法研究
食品中天然存在的维生素B2一般呈结合形式,与磷酸和蛋白等结合成复合化合物.此种结合型维生素B2对光比较稳定.国标法测定维生素B2即是针对食品中天然存在的维生素B2而制定的,[1]由于食品成分比较复杂,试样处理繁琐费时.而保健食品中的维生素B2大多以游离形式存在,且试样成分相对简单,如采用国标法测定既耗时又费试剂.游离维生素B2对光极为敏感,光照下即分解产生光黄素.[2]本文参考日本卫生试验法食品中维生素B2的测定方法,[3]利用维生素B2分解为光黄素这一反应,以光黄素荧光法定量测定保健食品中的维生素B2含量,方法简便、快速,且准确度及精密度都能满足分析要求.
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腌腊肉制品中丙二醛测定方法的探讨
丙二醛(Malondia Ldehyde, MDA),是油脂氧化变质生成的过氧化脂质,在热、光、重金属等过氧化物分解因子存在下,进一步分解产生的一种醛类物质.随着油脂氧化变质程度的发展,丙二醛含量较酸价及过氧化值有明显的增高.丙二醛具有灵敏的特性,稳定性好,是客观评价油脂酸败程度的敏感指标之一.目前丙二醛测定方法有高效液相色谱法、[1]荧光法、[2]比色法,[3]前两法由于仪器昂贵而难以普及,比色法在试样处理上较繁琐,耗时长.本文对比色法进行了摸索和改进,使得测定简便快速,结果准确可靠,便于推广应用.现报告如下.
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白酒中氰化物的测定方法研究
随着当前检测酒中氰化物的含量的方法的增多,本文介绍了采用荧光法测定白酒中的氰化物含量的方法,即将荧光素钠还原为无色后,在pH=9.0的硼酸盐缓冲液中同时存在铜离子的情况下下,荧光的强度与氰化物在食品中的浓度成正比.
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流动注射氢化物发生原子吸收光谱法测定全血中硒含量
全血硒与膳食硒摄入量呈正相关,可作为评价硒营养状况的指标[1].目前测定硒的方法较多,荧光法是经典方法,灵敏度高,操作繁琐费时[2];催化光度法和极谱法的稳定性较差[3,4];石墨炉原子吸收法又存在硒的挥发损失[5];氢化物发生原子吸收法具有高灵敏度和高选择性的优点,手工操作是其缺点[6].我们采用流动注射氢化物发生原子吸收光谱法测定全血中硒,对测试条件进行研究,并采用回流三角烧瓶消化样品,获得较满意的效果.
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荧光法测定水和血清中的镁
镁与人体健康有密切关系,血清Mg2+浓度影响神经肌肉传导,当浓度低时引起四肢痉挛.体内缺镁主要表现为身体虚弱、震颤与心律不齐.近年来发现缺镁可能是各种心脏病的前因之一[1].目前测镁的方法很多,有AAS法[2]、分光光度法[3]、荧光法[4]等.AAS法设备较昂贵,分光光度法灵敏度低.荧光法中由于镁本身没有荧光,需要用有机试剂与镁络合生成荧光配合物,此类有机试剂以8-羟基喹啉及其衍生物应用广,但其检测灵敏度高只有0.01 μg/ml[5].我们通过加入溴化十六烷基三甲基铵使镁-7-碘-8-羟基喹啉-5-磺酸二元配合物变成三元配合物,其灵敏度达0.006 μg/ml,为监测血清及水中镁浓度提供了简单可行的方法.
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铍试剂Ⅲ分光光度法测定水中铝
铝是一种常见的元素,迄今为止,尚未证实它属于人体必需元素.专家认为摄入过量的铝可能与退行性脑变性病有关.大多数天然水中都含有铝,饮水是人体摄入铝的主要途径之一,生活饮用水卫生标准规定其限定值为0.2 mg/L.水中铝的测定方法现有原子吸收法、荧光法、比色法等,这些方法有的灵敏度低,有的样品前处理麻烦.铍试剂Ⅲ测定水中铝的分光光度法具有操作简便、灵敏度高,干扰物质少,有良好的准确度和重现性等特点,报告如下.
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微量元素硒的提取检测研究进展
硒是人和动物体内必需的一种微量元素,与机体免疫功能、抗氧化能力等密切相关.在生物体内它具有双重作用,长期缺硒会导致疾病,但硒过量又能引起硒中毒.硒的营养性和毒性差异足在一个较窄的范围内变化,摄入量过少会引起克山病、大骨节病、癌症、艾滋病、非典型肺炎等疚病;另一方面,中国富硒带(紫阳和恩施)经常发生人、畜硒中毒;美国西部4 000平方英里的富硒区域,发现有些鸟类胚胎畸型与硒的过量摄入有关[1].因此,硒的提取检测分析及其研究越来越受到重视.笔者就近年来食品、水、药材和生物材料等样品中硒的分析方法研究进展作一综述.
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精神分裂症患者血清维生素E含量变化的研究
维生素E(VE)具有抗氧化效能,是生物膜自由基清除剂,近几年已应用VE作为一些疾病的辅助治疗及抗衰老药物。糖尿病、冠心病等患者血清VE含量降低与其体内过氧化作用增强有关[1]。近,神经生化研究发现,精神分裂症患者的自由基防御系统有显著改变[2~5].过氧化作用增强,我们应用荧光法对98例急、慢性精神分裂症的血清VE进行了测定,现将结果报道如下。
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偏振荧光法定量测定细菌染色体的同源性
定量DNA-DNA杂交技术在细菌基因鉴定和分类方面发挥着重要作用,固相微孔板法,因其简便而被国内外微生物学工作者广泛应用[1-3].但因残留的多糖对DNA包板的影响,导致两种DNA杂交后同源性计算的误差,有碍细菌的鉴定和分类.液相杂交可避免这一不足.本研究应用一种新的荧光染料SYBR Green1特异性结合双股DNA的特性,并借助偏振荧光技术的敏感性,对10株临床分离菌进行了种间同源性测定,报告如下.
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血细胞分析仪临床应用进展
距离Coulter原理被发现,已经近半个多世纪.运用该原理设计的全自动电子方法主要用于微粒包括血细胞在内的计数和体积测量.虽然分类计数方面有了许多进展,但就全血细胞计数(CBC)本身而言,其基本参数仍然相对稳定.近年来血细胞分析仪在技术和方法学上有许多显著的改进.例如PLT计数,一些仪器现在可以加人抗体进行检测.另一个进展是网织红细胞计数,通过荧光法和细胞化学法使其计数更为准确.
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调控自噬对晚期泡沫细胞凋亡的影响
目的:阐明调控自噬对晚期泡沫细胞凋亡的影响。
方法:将人THP-1细胞来源的巨噬细胞(THP-M)分别与50μg/ml ox-LDL孵育6 h、12 h和24 h;油红O染色观察细胞内脂质蓄积的变化,酶荧光法试剂盒检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量变化,免疫印迹法检测细胞内LC3II和P62的表达水平;然后分别利用不同浓度自噬激动剂雷帕霉素和抑制剂3-MA预处理THP-M或ATG5特异性siRNA转染的THP-M细胞对自噬进行调节,观察细胞内脂含量的变化。 -
胎盘部位滋养细胞肿瘤一例
患者35岁,月经异常5月余,于2003年10月17日入院.月经初潮13岁,(4~5)d/28 d,量中,无痛经.30岁结婚,人流5次,未生育,末次人工流产2002年1月.末次月经2003年5月10日,停经40+d后有恶心、呕吐,于2003年6月21日在外地某院查尿hCG阳性,血β-hCG 20 mIU/ml(参考值0~2.9 mIU/ml,荧光法),9月14日B超显示肌层占位,考虑动静脉瘘或过期流产.
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氧氟沙星与牛血清白蛋白相互作用机制
目的以光谱技术与微量热技术相结合的方法研究水溶液中牛血清白蛋白与氧氟沙星分子间结合作用的机制.方法用荧光猝灭法及微量热法.结果荧光猝灭法测得该反应的结合常数K=1.20×105 L·mol-1,结合位点数n=1.20,微量热法测得反应的焓变ΔrHm≈0;用同步荧光技术考察氧氟沙星对牛血清白蛋白构象的影响;依据Fōrster非辐射能量转移机制,得到授体-受体间的结合距离(r=2.59 nm)和能量转移效率(E=0.38).结论牛血清白蛋白与氧氟沙星分子间有较强的结合作用,且结合力以疏水作用为主.
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柱前衍生-高效液相色谱荧光法测定大鼠血浆中硫普罗宁
建立了测定大鼠血浆中硫普罗宁含量的柱前衍生-高效液相色谱荧光法.血浆样品经二硫苏糖醇(DTT)还原后,再经N-(1-芘)马来酰亚胺(NPM)衍生化后进样测定.以0.2%乙酸(含0.015mol·L-1磷酸二氢钾)-乙腈(56:44)为流动相,采用Kromasil C18色谱柱分离,在λex=340nm,λem=375nm下荧光检测.硫普罗宁线性范围0.1~10.0μg·mL-1,定量下限为0.1 mg·L-1,日内、日间精密度(RSD)分别为5.3%~10.8%和7.0%~10.8%,提取回收率在73.7%~79.7%.大鼠单剂量给予硫普罗宁后,药代动力学行为符合二室模型.该法准确可靠,专属性强,适用于硫普罗宁的药代动力学研究.
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盐酸西布曲明与牛血清白蛋白结合作用的光谱学研究
目的运用光谱学方法研究在生理pH值条件下盐酸西布曲明与牛血清白蛋白之间的结合作用.方法通过荧光法和吸收光谱法确定了盐酸西布曲明对牛血清白蛋白的荧光猝灭机制.依据Scatchard方程测定了不同温度下该结合反应的结合常数和结合位点数.根据热力学方程讨论了两者间的主要作用力类型.结合同步荧光分析了盐酸西布曲明对牛血清白蛋白构象的影响.结果盐酸西布曲明对牛血清白蛋白的荧光猝灭机制为静态猝灭.在8,25和37℃时盐酸西布曲明与牛血清白蛋白的结合常数分别为1.21×105,8.31×104和6.97×104L·mol-1,结合位点数均为1.结合反应的热力学参数为△H=-9.70 kJ·mol-1,△S=56.41 J·mol-1·K-1.结论两者结合的主要作用力类型是静电作用.盐酸西布曲明在体内能够被血清蛋白存储和转运且结合时对蛋白构象无影响.