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  • 云南省狂犬病病毒糖蛋白全编码区序列特征研究

    作者:何健;丁继超;陶晓燕;章域震;杨卫红;冯云;杨杜鹃;张娟;张云智

    目的 测定云南省狂犬病病毒糖蛋白全编码区基因序列,阐明它们的分子生物学特征.方法 用直接免疫荧光法进行病毒抗原检测,对阳性标本提取病毒RNA,用逆转录聚合酶链式反应对病毒糖蛋白基因进行全序扩增,并对目的基因核苷酸和氨基酸进行同源性和进化树分析以及氨基酸位点分析.结果 在云南省获得18株狂犬病病毒糖蛋白全编码区基因序列,它们的核苷酸序列和推导氨基酸序列同源性分别为98.2% ~99.9%和97.3% ~99.8%,与国内外参考株核苷酸序列和推导氨基酸序列的同源性分别为85.7% ~ 99.9%和93.1% ~99.8%.进化分析表明,云南流行株分别与我国南方及东南亚流行株亲缘关系较近,但云南株间进化关系较为复杂,可分为六个进化亚群.它们的主要抗原性、致病性、毒力及糖基化等功能位点均未发生明显改变.结论 云南狂犬病病毒流行株具有多样性特点,与省内外、境内外及省内不同地区间犬类流动并传播该病毒相关.云南株狂犬病病毒糖蛋白重要功能位点未发生变异,仍然保持其特有的抗原性和毒力等特征.

  • 人类乳头瘤病毒(H1PV)病毒样颗粒的研究进展

    作者:陆振华;田厚文;阮力

    人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一类具有严格宿主范围和组织特异性的DNA病毒,主要感染人的皮肤或粘膜上皮细胞,引起感染部位发生良性和恶性病变.根据DNA序列的同源性组织特异性等,HPV可分为许多型别.目前发现的人乳头瘤病毒已超过100型[1],其中感染人生殖道的人乳头瘤病毒有35个型别[1],根据其致瘤性不同分为低危型和高危型两大类.高危HPV的感染与宫颈癌的发生有十分密切的关系.约80%的宫颈癌与四个型别的HPV感染有关,分别是HPV16、18、31和45型,其中50%的宫颈癌与HPV16感染有关[1].因此,使用疫苗阻断病毒的感染能有效的减少宫颈癌的发病率.同时还能减少其它一些和HPV相关的肿瘤如:肛门、外阴及扁桃体的肿瘤等.

  • 001 分子营养学(下)

    作者:孙长颢

    (接上期)3基因多态性对营养素吸收、代谢和利用的影响DNA结构在不同种类的生物体内存在很大差异,正是这种差异导致了生物物种的多样性和不同生物之间形态学特征和生物学特征的巨大差异.而同种生物不同个体之间,DNA结构虽然具有很大的同源性,但也存在差异,正是这种差异导致了同种生物不同个体之间在形态学特征和生物学特征方面也存在一定的差异.

  • 一起鼠伤寒沙门菌引起的食物中毒暴发调查

    作者:刘晓强;古文鹏;黄达峰;范建华;杨祖顺;韦蝶心;刘宏;李园园;赵世文

    目的 查明一起学校食物中毒的可疑食物、致病因子及感染源,并采取控制措施.方法 主动搜索所有符合病例定义的患者并逐一进行个案调查.采用描述性流行病学方法,分析本次事件病例的流行病学分布特点;采用病例对照研究,在每例病例的同班选择4~5名对照,分析导致本次事件的可疑食物;采集病例、可疑食物、饮用水、食物制作环节、食堂从业人员的标本,进行实验室检测.结果 本次食物中毒的罹患率为5.01%,85.45%的班级有病例发生.病例对照研究发现,是否食用过凉卤菜(OR =2.64,95%CI:1.81 ~3.85,P<0.001)和主要饮用瓶装水(OR =0.37,95%CI:0.25~0.56,P<0.001)两个因素的OR值差异有统计学意义.在28名患者的肛拭中检出4株鼠伤寒沙门菌,4株均归入RiboGroup PVUⅡ 515-6-S-1,且相互间相似率>90%,属同一来源菌株.结论 本次疫情的可疑食物为由校外无证作坊制作后在学校食堂售卖的凉卤菜,致病因子确认为鼠伤寒沙门菌,移除可疑食物后,未出现新发病例.

  • 重症监护病房耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因同源性分析

    作者:周俊英;乐英棒

    目的 对重症监护病房(ICU)感染患者和环境监测分离出的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行耐药性及基因同源性进行分析.方法 对医院ICU医务人员手及高频接触的物品表面进行采样,对感染患者标本进行细菌培养,菌株采用Vitex 2 Compact微生物鉴定药敏系统进行检测,并用肠杆菌科基因间重复序列的聚合酶链反应(ERIC-PCR)对其进行基因分型,采用NTSYS-PC 2.0软件对ERIC-PCR扩增产物进行聚类分析.结果 ICU感染患者标本中有33株金黄色葡萄球菌,16株为MRSA,其检出率为48.48%,ICU医务人员手及环境表面检出6株金黄色葡萄球菌,5株为MRSA,其检出率为83.33%.21株MRSA对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁耐药率为0,对青霉素耐药率为100%,对环丙沙星、红霉素、左氧氟沙星等耐药率超过了80.00%;ERIC-PCR电泳结果显示,大的分子质量约为450 bp,小的分子质量约为100 bp,带型各不相同;对21株MRSA扩增产物进行聚类分析,DNA同源性在46.00%~ 67.00%之间,同源性在68.00%时可分为3个大类,第1、2、3、4、5、6、9、11、13、17菌株亲缘关系较近.结论 ICU临床分离出的MRSA呈多重耐药,临床医生应根据药敏结果合理用药;ICU环境分离出的MRSA也呈现多重耐药,与临床分离株耐药表型有一定的同源性,但基因同源性关联不大;ICU环境物体表面存在MRSA感染风险.

  • 新疆维吾尔自治区蜱携带白蛉病毒属病毒遗传特征分析

    作者:宋凯丽;熊衍文;刁秀念;郭玉江;康雁君;覃新程;李兴旺

    目的 对新疆维吾尔自治区(新疆)蜱携带的白蛉病毒属病毒进行系统进化分析.方法 制备蜱悬液提取蜱总RNA,运用反转录聚合酶链式反应筛选阳性标本并扩增白蛉病毒属病毒的全基因组,测序后对病毒基因组进行序列特征和系统发生分析.结果 成功扩增3株病毒株(BL10、BL33、BL79)的全长L、S节段.经同源性分析发现,BL10、BL33、BL79与已知蜱携带的Bole Tick Virus 1序列的同源性为98.0% ~ 99.7%;系统进化分析结果表明,BL10、BL33、BL79与Bole Tick Virus 1亲缘关系近.结论 本研究的3株毒株属于白蛉病毒属,且与Bole Tick Virus 1为同种病毒.

  • 多形性腺瘤基因样蛋白2在CBFβ/MYH11阳性急性白血病中的表达和意义

    作者:颜晓燕;蒋丽媛;贾志强;谢旭磊;林凤茹

    多形性腺瘤基因(PLAG)家族为锌指蛋白的新亚科,包括PLAG1、多形性腺瘤基因样蛋白(PLAGL)1和PLAGL2 3个成员, 三者有高度的同源性.其中PLAG1在染色体8q12的易位的多形性腺瘤涎腺、成脂细胞瘤、肝毒细胞瘤中表达升高[1-3].

  • 多形性腺瘤基因样蛋白2在CBFβ/MYH11阳性急性白血病中的表达和意义

    作者:颜晓燕;蒋丽媛;贾志强;谢旭磊;林凤茹

    多形性腺瘤基因(PLAG)家族为锌指蛋白的新亚科,包括PLAG1、多形性腺瘤基因样蛋白(PLAGL)1和PLAGL2 3个成员, 三者有高度的同源性.其中PLAG1在染色体8q12的易位的多形性腺瘤涎腺、成脂细胞瘤、肝毒细胞瘤中表达升高[1-3].

  • β-半乳糖苷酶催化合成低聚半乳糖的研究

    作者:刘鑫龙;王立晖;汤卫华;殷海松;孙勇民

    β-半乳糖苷酶的研究进展 β-半乳糖苷酶来源及作用机理.β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)普遍存在于动物(幼小动物的肠中)、植物(杏、苹果等)及微生物(细菌、霉菌等)中,能够将乳糖水解为葡萄糖及半乳糖供生物体代谢使用.在生物体体内,β-半乳糖苷酶是由LacZ 基因编码翻译而成的蛋白质酶类,通过提取动物、植物及微生物中的乳糖酶蛋白,发现来自于不同物种体内的蛋白同源性较高,进而对乳糖酶基因进行深入分类研究,并建立了β-半乳糖苷酶基因库,其中大部分基因均来自于细菌[1].

  • 江苏及周边地区副溶血性弧菌分子流行病学特征研究

    作者:刘丽萍;陈盛霞;徐岚;李薇薇;裴晓燕;郭云昌

    目的 了解江苏及周边地区副溶血性弧菌的分子流行病学特征.方法 对2010年江苏及周边地区食物中毒事件中分离的、经API生化鉴定的63株副溶血性弧菌进行毒力基因(tdh、trh)测定、血清学分型和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型.结果 tdh阳性率79.4% (50/63),trh阳性率1.6% (1/63);病人株血清型以O3∶K6为主(26/57),食品株以O1∶KUT为主(4/6);PFGE分型显示A-E群间相似度大于60%.结论 江苏及周边地区中不同地区的副溶血性弧菌具有高度同源性,该地区副溶血性弧菌引起的食物中毒可能具有相同的污染源.

  • 上海市闵行地区副溶血性弧菌分子流行病学特征分析

    作者:杨丽华;陈敏;王小光;詹隆文;赵黎芳;骆玲飞;吴菊英;欧阳霖;宋驰萍;陈洪友

    目的 分析上海市闵行地区副溶血性弧菌临床和食源性分离株的分子流行病学特征,了解本地区副溶血性弧菌的流行规律.方法 对2007-2010年临床来源菌株(食物中毒患者和散发腹泻病例)以及食源性样品中分离的184株副溶血性弧菌进行血清分型、耐热直接溶血素基因(tdh)和耐热相关溶血素基因(trh)检测.对102株临床来源O3:K6型菌株及41株食源性样品来源株,应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型和溯源分析.结果 在调查的52起副溶血性弧菌引起的食物中毒事件中,tdh阳性、trh阴性的O3:K6血清型引起的有46起(88.5%),tdh阳性、trh阴性的O4:K8血清型引起的有5起(9.6%).在散发腹泻病例中,tdh阳性、trh阴性的O3:K6、O4:K8和O3:KUT菌株分别占60.3%(38/63)、19.0%(12/63)和15.9%(10/63).41株食源性样品株分属9种O血清群,未见O3:K6和O4:K8血清型菌株,而且tdh和trh均为阴性.PFGE聚类分析显示闵行地区食物中毒O3:K6分离株中存在着遗传关系密切相关的优势流行克隆,散发腹泻患者O3:K6分离株中存在着与食物中毒优势株相同谱型,而所有食源性样品分离株与临床患者来源株亲缘关系都较远.结论 临床和食源性样品来源的副溶血性弧菌在血清分型、毒力基因和分子特征等方面存在显著差异,一大群遗传关系密切、tdh阳性、trh阴性的O3:K6血清型菌株在闵行地区呈优势流行.

  • 一起奇异变形杆菌食物中毒的病原学鉴定

    作者:李秀彬;陈萌莉;杨东霞;杨暑伏

    1999年6月,我区发生一起因食用烧鸡引起的食物中毒,经流行病学调查和实验室检查,证实是由奇异变形杆菌引起的.鉴于变形杆菌是一种条件致病菌,要确认为食物中毒病原菌,必须对该菌作出系统的鉴定,包括同源性实验,感染菌数及感染性试验.现将系统鉴定报告如下.

  • 一起肠炎沙门菌引起的食物中毒检测及菌株同源性分析

    作者:江金伦;陈静;竺稽定;夏颖萍;杨元斌;徐景野

    目的 检测食物中毒样品中致病菌,分析其同源性,为追踪污染源、明确病因诊断提供帮助,为控制和减少食物中毒提供依据.方法 荧光定量PCR快速筛检致病菌,参照GB 4789.4-2010《食品安全国家标准食品卫生微生物检验沙门氏菌检验》分离致病菌,全自动细菌鉴定仪鉴定致病菌,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性.结果 从21份病人和从业人员粪便样品中检出8株肠炎沙门菌,9份食品样品中检出2份肠炎沙门菌,检出率分别为25.00%和6.25%;食堂用水及井水检测均未检出肠炎沙门菌等致病菌.荧光定量PCR法阳性率结果与GB 4789.4-2010方法一致.PFGE分型显示10株肠炎沙门菌的DNA条带图谱完全一致,相似性100%,聚类分析为同一型,表明菌株来自同一克隆系.结论 采用荧光定量PCR筛检能提示食物中毒样品中病原菌是否存在的信息,通过GB 4789.4-2010方法仔细寻找到目标菌,两法联合使用能快速、准确地检测出引起食物中毒的致病菌.运用PFGE对致病菌进行溯源,分析其亲缘关系,能追踪到菌株来源,有利于防止食物中毒的发生.

  • 中国和新西兰来源生胞梭菌的动物毒性比较及脉冲场凝胶电泳分子分型研究

    作者:董银苹;李志刚;李凤琴

    目的 分别采用中国和新西兰两国两种不同的试验方法,对我国从相关企业送检的新西兰召回批次浓缩乳清蛋白粉、用问题浓缩乳清蛋白粉生产的婴幼儿配方粉和北京市市售婴幼儿配方粉样品中分离的生胞梭菌,以及新西兰初级产业部从问题批次浓缩乳清蛋白粉分离的11株生胞梭菌对实验动物的毒性作用差异及菌株同源性进行研究.方法 将菌株培养物离心过滤除菌后,分别腹腔注射和经口灌胃ICR小鼠,观察小鼠的中毒反应及死亡情况,同时对菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型.结果 所有菌株培养物腹腔注射小鼠后,小鼠均出现呼吸急促继而猝死的中毒表现,死亡时间多在染毒后10 min内,而经口灌胃小鼠无中毒和死亡;PFGE结果显示,虽然来源不同,但从问题批次浓缩乳清蛋白粉及其相关产品中分离的10株生胞梭菌均为同一PFGE型,而分离自北京市市售婴幼儿配方粉的1株生胞梭菌为另一PFGE型.结论 10株分离自问题批次浓缩乳清蛋白粉及以其为原料生产的婴幼儿配方奶粉的生胞梭菌致动物中毒和死亡表现无差别,且10株生胞梭菌均为同一PFGE型,说明菌株来自同一污染源.

  • 市售活鸡和腹泻患者中非伤寒沙门菌分子特征和耐药性研究

    作者:张丽华;朱学海;郭主声;张丽;陈桓练;周世添;王剑文

    目的 分析市售活鸡及腹泻患者中非伤寒沙门菌的分子特征的相似性及耐药性,预防沙门菌的感染流行.方法 收集2012年1月-2013年10月从1 054份腹泻患者粪便样品及440份农贸市场的活鸡肛拭子中分离出的非伤寒沙门菌株93株,进行血清分型,对常见的非伤寒沙门菌采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行分子分型、Bionumerisc v4.0进行聚类分析、纸片扩散法(K-B法)进行药物敏感性试验.结果 1 054份腹泻样品中共检出非伤寒沙门菌88株,分离率为8.35%,分为25种血清型,肠炎沙门菌居多.其中0~2岁的婴幼儿检出率较高,占52.27%(46/88).PFGE结果:16株肠炎沙门菌分成14个PFGE型、12株斯坦利沙门菌分成11个PFGE型、14株鼠伤寒沙门菌分成14个PFGE型、6株德尔卑沙门菌分成5个PFGE型;对菌株间的相似性进行比较发现两个100%同源的肠炎沙门菌PFGE型,其他菌株的分子特征的相似性不大,鸡源菌株与人源菌株的分子特征相似性不大;对12种抗菌药物的耐药率在50%以下,不同的血清型耐药率各不相同,耐药较严重的为德尔卑沙门菌.440份活体鸡肛拭子分离出的非伤寒沙门菌5株,分离率为1.14%,共分得4种血清型,其中姆班达卡沙门菌病人中未检出.结论 该地区由非伤寒沙门菌引起腹泻的感染率高,尤以婴幼儿多见,患者与鸡未发现有同一克隆株,对常用抗生素有很好的敏感性.

  • 骨形态发生蛋白复合物的成骨及修复作用

    作者:蔡林;顾洁夫;金涛;杜远立

    骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)是一种具有诱导成骨(osteoinduction)能力的酸性蛋白质.现已发现多种BMP,各种BMP有同源性序列,多属转化生长因子-β(TGF-β).超家族BMP主要分布于骨基质的胶原纤维、骨髓基质中的间充质细胞、骨膜细胞、牙原基及骨、软骨肉瘤细胞.BMP能诱导未分化间充质细胞向骨、软骨细胞分化,从而促进成骨.实验证实,BMP在动物体内、外均能诱导骨的生成.

  • 脂蛋白a的研究进展

    作者:艾春芳

    脂蛋白(a)早在1963年由挪威遗传学家Berg首先发现并命名,它是一种特殊的血浆脂蛋白.1972年Dalhen首先发现在冠心病患者的血浆脂蛋白中有一前B脂蛋白,并证实该区带Lp(a).在1975年Dalhen等研究认为Lpa是动脉粥样硬化的危险因子.1978年,Mclean等研究Lp(a)中的Apo(a)与纤溶酶原(PLG)具有高度同源性,从而认为Lp(a)不仅是动脉粥样硬化的危险因素,而且可能与纤溶系统有关.由此可见人们对Lp(a)的研究历经漫长的过程,虽然其研究历史较长,但人们对Lp(a)的生理功能和致血栓性疾病的机理等许多方面还不十分清楚,因此关于Lp(a)的研究在目前来看依然具有很重要的意义及价值,而国内外实验室也依然对其进行着大量的研究以期探索出其在临床中的应用价值.

  • 耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药机制及同源性分析

    作者:黄婷婷;周志健;杨英为;杨一言;陈林强

    目的 了解鲍曼不动杆菌在院内流行情况,研究鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的分子生物学机制.方法 使用法国梅里埃VITEK 2型全自动细菌鉴定及药敏分析仪进鉴定和药敏试验.采用PCR检测鲍曼不动杆菌编码的OXA-23型碳青霉烯酶基因bla OXA-23.采用ERIC-PCR对分离到的鲍曼不动杆菌进行同源性分析.结果 分离到的17株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌中共有16株产OXA-23型碳青霉烯酶,且为同源性相同.结论 鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药的重要机制为产OXA-23型碳青霉烯酶,该院存在鲍曼不动杆菌克隆流行.

  • 某城市食物中毒副溶血性弧菌的同源性研究

    作者:韩毅;沙丹;管红霞

    目的 了解某城市3起食物中毒副溶血性弧菌同源性,为预防和控制提供理论依据.方法 采用PCR方法,对食物中分离的副溶血性弧菌基因同源性进行研究.结果 从3起食物中毒的食物中分离到7株副溶血性弧菌,全部携带耐热性溶血毒素和不耐热溶血毒素基因.PFGE聚类分析结果为两种带型.结论 引起这起食物中毒的副溶血性弧菌属于同源致病菌,可采取一致的防控措施进行现场疫情处理.

  • 山东省烟台市人与动物新型布尼亚病毒感染调查及同源性分析

    作者:宫连凤;姜梅;刘娟;韩文清;刘靖宇;孙振璐;王志昱;高巧;邢玉芳;丁淑军;王显军

    目的:了解山东省烟台市人和动物发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)感染及流行情况。方法2011年4-11月分别在烟台市的蓬莱和莱州2个SFTS病例高发地区连续采集与人密切接触的5种家养动物(羊、牛、猪、犬、鸡)血清标本3576份,应用双抗原夹心ELISA方法和Real time RT-PCR方法检测血清中SFTSV总抗体和病毒核酸;观察不同月份感染情况;采集两地人群血清2590份,应用间接ELISA方法检测SFTSV IgG抗体;用Vero细胞从核酸阳性的人和动物血清中分离病毒,通过RT-PCR方法对SFTSV S片段进行序列扩增、同源性分析。结果3576份动物血清标本中SFTSV血清总抗体阳性1439份,阳性率为40.24%,病毒核酸阳性163份,阳性率为4.56%。其中羊、牛、鸡、犬、猪抗体阳性率分别为62.78%、52.97%、45.56%、28.73%和1.45%,核酸阳性率分别为5.72%、4.63%、3.02%、5.25%和3.73%。动物体内的抗原抗体随季节消长而变化。2590份人群血清SFTSV IgG抗体阳性率为5.41%。对10株来自人的毒株和3株来自动物的毒株进行S片段基因序列扩增分析,显示其同源性在95.23%~100.00%,与国内其他省市分离毒株比较,其同源性在94.72%~99.13%,高度同源。结论烟台地区存在SFTSV流行,人与家养动物普遍易感,其基因序列高度同源,提示家养动物可能作为SFTSV的增殖宿主和扩散宿主,应引起高度重视。

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