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DNPH柱前衍生高效液相色谱法测定食品包装材料中的微量甲醛
目的 建立2,4-二硝基苯肼(DNPH)柱前衍生高效液相色谱法测定食品包装材料中微量甲醛的方法.方法 样品浸泡液经DNPH于60℃的水浴中衍生20 min,用环己烷提取,液相色谱仪测定.结果 甲醛在0 ～8.00 μg/mL浓度范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r=0.9998,相对标准偏差为0.9％ ～2.6％,加标回收率为91.0％ ～ 101.5％.结论 本方法具有灵敏度高、选择性好、精密度和准确度好、简便、快捷等优点.
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柱前衍生-顶空气相色谱法测定肉制品中亚硝酸盐
目的 建立顶空气相色谱法测定肉制品中亚硝酸盐的检测方法.方法 对顶空条件及色谱分析条件进行优化,进行顶空气相色谱法方法学试验,并用气相色谱进行定量测定.结果 环己醇亚硝酸酯的出峰时间为2.934 min,低检出浓度0.040 mg/kg,在0.50 ～ 50.0μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.99994,相对标准偏差(RSD)在4％以下,回收率范围96.4％～106.0％之间;与国标法(分光光度法)比对,两种方法的结果差异无统计学意义(t=-0.560,P＞0.05).结论 该方法分离效果好,操作简单,灵敏度高,完全可以满足肉制品中亚硝酸盐的测定.
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柱前衍生法测定茶叶中L-茶氨酸的含量
本文研究了柱前衍生测定茶叶中L-茶氨酸含量的方法.茶叶中的L-茶氨酸用热水提取后,经2,4-二硝基氟苯衍生后上高效液相色谱法测定.色谱条件为:色谱柱(Kromasil C18柱4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈︰磷酸盐溶液(pH=6.5)=15︰85梯度洗脱;检测波长:360 nm;流速:1.0 mL/min;柱温:35℃;进样:5μL.本方法检出限4 mg/kg,在1.0～50.0μg/mL呈现良好的线性关系(r=0.9999),衍生后的样品室温25℃放置6天内稳定,重现性试验相对标准偏差0.16％(n=6),回收率为96.4％～102.2％.本高效液相色谱法可以准确地测定茶叶中L-茶氨酸的含量.
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柱前衍生高效液相色谱法测定饮用水中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸
目的 建立柱前衍生-固相萃取-液相色谱-荧光法测定饮用水中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸的方法.方法 样品经衍生和固相萃取后,采用Waters Atlantis T3(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱分离,流动相为甲醇-0.02 mol/L乙酸铵水溶液(50∶50,V/V),流速1.0 ml/min,荧光检测激发波长为266 nm,发射波长为315 nm,进样体积为10 μl.结果 3种目标物质在0.01～1.0 mg/L范围内线性良好,线性相关系数(r)均在0.9994 ～0.9998之间.通过对自来水样进行3个加标水平的添加回收试验(n=6),草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸的平均回收率分别为84.4％ ～ 92.0％、86.5％ ～93.8％和87.8％ ～96.8％,相对标准偏差(RSD)分别为1.12％ ～4.22％、1.05％ ～4.04％和1.08％ ～ 3.95％,方法的检出限分别为0.0021、0.0025和0.0032mg/L.结论 该方法准确灵敏,适用于饮用水中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸3种物质的同时分析.
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柱前衍生-超高效液相色谱荧光法同时测定啤酒中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2
目的 建立柱前衍生-UPLC-FLD法测定啤酒中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的方法.方法 样品直接经过乙腈稀释提取,提取液经过离心后,取上清液用多功能柱净化,净化液经氮气吹干、用三氟乙酸衍生后,经定容、微孔滤膜过滤、进液相色谱分析,以ACQUITY UPLC HSS T3柱(2.1 mm×l00 mm,1.8μm)分离,荧光检测器检测,外标法定量.结果 4种黄曲霉毒素线性范围较宽,相关系数r在0.999 2 ～0.999 6之间,黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2检出限分别为0.05、0.02、0.08、0.02 μg/kg.加标回收率90.47％ ～ 108.17％之间,回收率的RSD在0.97％～8.13％之间.结论 本法操作简便、准确度好、精密度高,干扰性小,能满足啤酒中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的同时测定.
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PITC柱前衍生HPLC测定复方氨基酸注射液中18种氨基酸的含量
目的：建立柱前衍生高效液相色谱法同时测定复方氨基酸注射液（18AA）中18种氨基酸含量的方法。方法：样品采用异硫氰酸苯酯（PITC）柱前衍生，以Unitary-C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）为色谱柱，检测波长为254 nm，醋酸钠缓冲盐及乙腈、甲醇和水的混合体系为流动相，梯度洗脱。结果：优化了衍生试剂用量、衍生时间、缓冲盐浓度以及pH值和柱温等影响因素，终在40 min内实现了18种氨基酸的分离，在9~1021μg·mL-1浓度范围内线性关系良好，且相关系数大于0.9977，平均回收率为92.6%~110.7%，相对标准偏差（RSD）为0.01%~5.68%。其定量限（LOQ，S/N=10）为0.02~13.41μg·mL-1。结论：该方法操作简便、灵敏度高、准确度和精密度好，可用于复方氨基酸注射液中氨基酸的含量测定。
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PITC柱前衍生HPLC测定柴胡炮制前后17种氨基酸含量
目的:建立一种同时测定鳖血柴胡中17种氨基酸含量的方法,为该药材的质量控制提供参考.方法:以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,采用Prevail C18色谱柱,流动相[乙腈-水(4∶1)]-[乙酸钠缓冲溶液(pH 6.5)-乙腈(97∶3)]梯度洗脱,检测波长254 nm,测定柴胡炮制前后氨基酸的含量.结果:17种氨基酸在32 min内可良好分离;样品平均加样回收率93.4％～107.1％,RSD 1.8％ ～3.9％.结论:与其他柱前衍生测定氨基酸含量的方法相比,该方法具有可操作性强、成本低、易推广等优势,可作为柴胡及其炮制品中氨基酸的含量测定方法.
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柱前衍生HPLC同时测定驴胶补血颗粒中6种水解氨基酸
目的:建立柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定驴胶补血颗粒中6种水解氨基酸含量的方法.方法:采用Hypersil BDS C18色谱柱(4.6 mm×200 mm,5μm),异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长254nm,柱温30℃.结果:L-谷氨酸的线性范围0.169 ～1.014 μg(r =0.9995),平均回收率101.43％,RSD 3.20％；L-羟脯氨酸的线性范围0.178～ 1.068 μg(r =0.999 9),平均回收率101.23％,RSD 3.25％；甘氨酸的线性范围0.381～2.286 μg(r=0.9995),平均回收率102.87％,RSD 2.32％;L-丙氨酸的线性范围为0.162 ～0.972 μg(r=0.999 5),平均回收率102.37％,RSD 3.36％；L-精氨酸的线性范围0.118 ～0.708 μg(r =0.999 6),平均回收率102.73％,RSD 2.41％；L-脯氨酸的线性范围0.253 ～ 1.518 μg(r =0.9999),平均回收率98.69％,RSD 2.34％.结论:建立的方法可靠,可用于驴胶补血颗粒中氨基酸的含量检测.
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柱前衍生RP-HPLC测定仙灵骨葆胶囊中16种氨基酸
目的:建立柱前衍生RP-HPLC同时测定仙灵骨葆胶囊中16种氨基酸的方法.方法:以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生剂,用高效液相色谱测定仙灵骨葆胶囊中水解氨基酸的量.采用Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以乙腈-0.1 mol·L-1乙酸钠溶液-乙酸(7∶93∶0.05)为流动相A,乙腈-水(80∶20)为流动相B进行梯度洗脱,体积流量1 mL· min-,检测波长254 nm,柱温40℃.结果:33 min内可完成仙灵骨葆胶囊中16种氨基酸的分离测定,线性关系良好(r＞0.9968),回收率97.5％～100.7％,RSD＜ 5％.结论:该方法简便快速、准确可靠,可用于仙灵骨葆胶囊中氨基酸的含量测定.
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异硫氰酸苯酯柱前衍生反相高效液相色谱法测定复序橐吾中21种氨基酸的含量
目的:测定复序橐吾中游离和水解氨基酸的含量.方法:以异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定复序橐吾中氨基酸的含量.结果:21种氨基酸的检测浓度线性范围为0.0022-2.1000μmol/L,精密度RSD在0.38％-1.05％之间;稳定性RSD在0.46％-1.28％之间;游离氨基酸和水解氨基酸的重复性RSD在1.20％-2.38％和0.86％-2.43％之间;游离氨基酸和水解氨基酸的加样平均回收率分别在97.89％-101.05％和98.04％-103.03％之间且RSD均小于4％,游离和水解氨基酸的含量分别为0.2307％和8.7943％.结论:复序橐吾中含有21种氨基酸,并确定了其含量.
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柱前衍生法测定海巴戟中18种氨基酸
目的:建立柱前衍生高效液相色谱法测定海巴戟中18种氨基酸的方法.方法:以2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,梯度洗脱,流速1.0mL/min,检测波长为360nm,柱温为30℃.结果:18种氨基酸的线性范围分别为32-609μg/mL,r值均0.9990-0.9998,平均回收率分别为91.87％-108.56％.结论:本方法可用于海巴戟中氨基酸的测定.
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柱前衍生 HPLC-UV 法测定人工牛黄中猪去氧胆酸含量
目的：建立柱前衍生 HPLC-UV 法测定人工牛黄中猪去氧胆酸含量的方法。方法以2-萘基溴甲基酮为衍生试剂、三乙胺为催化剂、60℃水浴条件下对猪去氧胆酸进行衍生，采用 HPLC-UV 法测定人工牛黄中猪去氧胆酸含量。结果当衍生试剂与猪去氧胆酸的摩尔比＞20∶1，催化剂与猪去氧胆酸的摩尔比＞15∶1，在60℃水浴条件下反应50 min 时，衍生反应完全。猪去氧胆酸在0.1～2μg 范围内线性关系良好（r＝0.9997），平均回收率为97.85%（RSD＝1.6%）。人工牛黄样品中猪去氧胆酸的含量为4.12%。结论本方法灵敏度高、准确可靠、稳定性和重复性好，可用于测定人工牛黄中猪去氧胆酸的含量。
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新型荧光试剂柱前衍生高效液相色谱定量分析小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质
目的 采用新合成的荧光试剂柱前衍生氨基酸类神经递质,建立其测定方法,并测定小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质的含量.方法 以1,3,5,7-四甲基-8-苯基-(4’-O-(Ⅳ-琥珀酰亚胺乙酸酯))-二氟化硼-二吡咯甲烷(TMPABOSu)作为柱前荧光衍生试剂,在pH 8.8的硼酸-硼砂缓冲溶液中,30℃衍生反应5 min后获得稳定的荧光衍生产物,在反相色谱柱上,采用梯度洗脱进行5种氨基酸类神经递质标准品衍生物的分离检测,荧光激发波长为497 nm,检测波长为509 nm.结果 5种氨基酸类神经递质的线性范围为0.01～1.2 μmol/L,线性回归系数均大于0.998 1,检出限为l nmol/L(S/N=3:1).小鼠脑脊液中天门冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、γ-氨基丁酸和丙氨酸的含量分别为0.06、0.20、0.26、0.03和0.07 μmol/L,标准加入回收率为96％～104％,RSD为0.7％～2.9％.结论 该方法的灵敏度高、重现性好,为小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质的分析检测提供了一种新方法.
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柱前衍生,LC-MS/MS同时测定血浆中的孕二烯酮、依托孕烯和炔雌醇
建立LC-MS/MS同时测定血浆中孕二烯酮、依托孕烯和炔雌醇的方法.血浆样品经液-液萃取、柱前衍生处理后,采用ESI离子源,多反应离子监测(MRM),正离子扫描进行测定.以炔诺孕酮为内标,采用C_(18)(100 mm×2.1 mm,5 μm)柱,梯度流动相,梯度流速测定血浆中孕二烯酮、依托孕烯和炔雌醇.结果表明,孕二烯酮、依托孕烯分别在0.1～20 ng·mL~(-1)、炔雌醇在0.01～2 ng·mL~(-1)时线性关系良好,精密度小于10.0%、方法回收率在93.6%～110.9%.对复方孕二烯酮和复方依托孕烯透皮给药制剂进行了家兔的药动学研究.本方法灵敏度高(孕二烯酮、依托孕烯达到100 pg·mL~(-1),炔雌醇达到10 pg·mL~(-1))、重现性好,适合药动学研究.
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柱前衍生-高效液相色谱荧光法测定大鼠血浆中硫普罗宁
建立了测定大鼠血浆中硫普罗宁含量的柱前衍生-高效液相色谱荧光法.血浆样品经二硫苏糖醇(DTT)还原后,再经N-(1-芘)马来酰亚胺(NPM)衍生化后进样测定.以0.2%乙酸(含0.015mol·L-1磷酸二氢钾)-乙腈(56:44)为流动相,采用Kromasil C18色谱柱分离,在λex=340nm,λem=375nm下荧光检测.硫普罗宁线性范围0.1～10.0μg·mL-1,定量下限为0.1 mg·L-1,日内、日间精密度(RSD)分别为5.3%～10.8%和7.0%～10.8%,提取回收率在73.7%～79.7%.大鼠单剂量给予硫普罗宁后,药代动力学行为符合二室模型.该法准确可靠,专属性强,适用于硫普罗宁的药代动力学研究.
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柱前衍生化HPLC法测定盐酸美金刚的含量
目的:建立一种柱前衍生化HPLC测定盐酸美金刚含量的方法.方法:色谱柱为SunFireTM C18柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(80∶ 20),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为254 nm;以苯甲酰氯为衍生化试剂,三乙胺为缚酸剂,经衍生化后进样测定.结果:在药物溶液中依次加入5％三乙胺乙腈溶液4 mL,5％苯甲酰氯乙腈溶液2 mL,于40℃水浴中振摇反应10 min,然后用乙腈定容后即可进行测定.结果表明,得到的供试溶液在12h内稳定;在0.040 00～0.800 0 mg· mL一浓度范围内线性良好,线性方程y=1.403 × 107X+1.215×105,r=0.999 8;6份样品的含量平均值为99.21％,重复性RSD为1.78％(n=6);测定结果与滴定法相比基本一致.结论:本方法操作简便,结果准确可靠、重现性好,可用于盐酸美金刚含量的测定.
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柱前衍生化RP-HPLC法测定中药全蝎中16种氨基酸含量
目的:建立柱前衍生化RP-HPLC法测定中药全蝎中16种氨基酸的含量的方法.方法:采用酸水解法制备水解氨基酸样品溶液,以异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生化后进行HPLC分析.采用UltimatePrime C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相A为0.1 mol·L-1醋酸钠溶液(调pH至6.5)-乙腈(93∶7);流动相B为乙腈-水(8∶2);流速为1.0 mL· min-;柱温为40℃;检测波长为254 nm;梯度洗脱.结果:氨基酸衍生溶液在36 h内保持稳定,16种氨基酸在线性范围内相关系数r均＞0.999 5,加样回收率(n=9)在93.3％ ～ 104.6％之间.结论:所建立的检测方法可靠,精密度和重复性良好,可用于全蝎中水解氨基酸的含量测定.
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柱前衍生HPLC法测定脾氨肽口服液中17种游离氨基酸
目的:建立OPA-FMOC柱前衍生-HPLC法测定脾氨肽口服液中17种游离氨基酸的含量.方法:采用Capcell PAK C18MG色谱柱,以含10 mmol·L-1磷酸氢二钠和10 mmol·L-1硼酸钠的缓冲溶液(pH8.2)为流动相A;以乙腈-甲醇-水(45∶45∶10)为流动相B,梯度洗脱,流速1.5 mL· min-1,柱温40℃,自动在线衍生,检测波长338 nm/262 nm.结果:在一定范围内17种氨基酸的溶液浓度与其峰面积线性关系良好(r ＞0.9990),各氨基酸的平均回收率均在93.52％～112.12％之间,重复性RSD为1.0％(n=6).结论:本方法准确、灵敏、简便、专属性强、重现性好,适用于脾氨肽口服液中游离氨基酸的含量测定.
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HPLC法测定脑复清胶囊中γ-氨基丁酸的含量
目的:建立柱前衍生高效液相色谱法测定脑复清胶囊中γ-氨基丁酸(GABA)含量的方法.方法:色谱柱为Hypersil ODS C18柱(125mm×4.0mm,5μm),流动相A为20mmo1@L-1乙酸钠+0.02%三乙胺(pH 7.3);流动相B为100 mmol@L-1乙酸钠(pH 7.2)-乙腈-甲醇(100:175:225)梯度洗脱;检测波长为338nm.结果:线性范围0.05～1.03 mg@mL-1,线性方程A=42 3784C+6 919.5,r=0.9994,平均加样回收率101.7%,RSD为1.7%(n=9).结论:本法简便、快速、灵敏度高,可用于脑复清胶囊中GABA的质量控制.
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柱前衍生高效液相色谱法测定人血浆中尿囊素浓度
目的:建立血浆中尿囊素的浓度测定方法.方法:采用柱前衍生反相高效液相色谱法,尿囊素与2,4-二硝基苯肼(DNPH)反应生成2,4-二硝基苯腙,色谱柱为PhenomeneJx,D Luna C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),柱温为室温.流动相A为0.2%冰醋酸(用三乙胺调pH至5.0),流动相B为乙腈.梯度洗脱程序:A与B的体积比变化为0～3min 85∶15～65∶35(曲线系数为7),3～5min 65∶35～15∶85 (曲线系数为7),5～9min 15∶85～15∶85 (曲线系数为6),9～10min 15∶85～85∶15(曲线系数为6),10～15min 85∶15(曲线系数为6).PAD检测波长:340nm,流速1.0mL·min-1.内标为加替沙星.结果:在此色谱条件下,尿囊素衍生物与血浆中其他成分的分离完全,线性检测范围为2.5～40mg·L-1,低检测浓度为2.5mg·L-1,相对回收率在99.35%～103.14%之间,日内及日间精密度RSD小于2.1%.结论:柱前衍生反相高效液相色谱法稳定、灵敏、可靠,可用于人体血浆中尿囊素浓度的测定.
