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美凯纯简便快速的微生物检测
微生物实时荧光光电检测技术是近年来新兴的细菌、霉菌、酵母菌快速检测技术.它将改进后的传统培养分离技术、染色技术、传感和荧光检测技术以及计算机控制的模块化技术合为一体,大大简化了传统微生物的检测方法,将检测时间从数天缩短为数小时.其代表产品BioLumix全自动实时微生物荧光光电检测系统正是基于上述技术推出的一种全自动检测系统.
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妇科白带涂片多项检查快速染色法的临床应用
妇科白带涂片多项检查快速染色法(简称CTB染色法)是卫生部推广的十年百项技术项目之一.阴道分泌物,即白带的检查对妇科疾病的早期诊断具有重要作用.近年来,妇科病的发病率居高不下,因此早期诊断是一项重要的任务.我院近几年从湖南株洲引进CTB染色技术并应用于临床,取得了较好的效果.该方法操作简单快捷,且检出率高,尤适用于妇科病的普查.
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骨组织制片方法的改进
骨组织是一种坚硬的结缔组织,基质中含有大量无机酸盐,是所有组织中难制片的组织.而脱钙又是骨组织制片染色技术中的关键步骤.笔者在实践工作中对120例骨组织进行了摸索,选择出一种比较理想的方法,介绍如下:
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介绍一种滤纸片快速细胞学染色法
为了缩短染色时间,减少染色步骤,加快细胞学病理诊断的过程,我科尝试用伊红和美蓝做成的滤纸片进行快速染色.根据病理常规石蜡切片HE染色和检验血片快速染色的原理进行改进和设计[1-3],经过200多例滤纸片细胞学染色的反复摸索,取得了满意的效果.本方法所得到的诊断与普通HE染色结果相符合,同时制片质量好,适用于普查肿瘤和临床急需诊断的细胞学检查,现报告如下.
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免疫组化技术(四)
3 免疫组化方法这里有大量用于定位和验证组织抗原的免疫组化染色技术.选择合适的技术应基于各种研究标本的类型、研究的预处理的类型等参数,例如:冷冻切片、石蜡切片、树脂切片或细胞学制品以及所需敏感性的程度.
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凝胶上蛋白质染色方法研究进展
凝胶电泳是分离蛋白质及多肽的一种强有力的生化分析工具.而蛋白质染色在凝胶电泳系统中则是一个重要的组成部分,随着蛋白质组学的飞速发展,凝胶蛋白质染色技术已成为衔接二维电泳和下游质谱分析的关键环节.目前,常用的凝胶上蛋白质染色方法主要有染料染色法、银染法、负染法和荧光染色法.本文对近几十年来在凝胶上蛋白质染色技术方面所取得的进展和突破进行总结,并对未来的发展方向做出展望.
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合理应用免疫组织化学二步法检测系统
免疫组织化学二步法染色技术,由于其背景低,操作简便,近几年被广泛应用.我们对几家公司的免疫组织化学二步法检测系统进行比较,确定不同检测系统对抗原检测的敏感性.
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TUNEL与免疫组织化学双染色技术的应用
TUNEL作为一种敏感性高、使用方便的检测细胞凋亡的技术方法早已被广泛应用.但是,我们在实际工作中往往还要使用多种其他技术方法展开多层次的研究,以解决凋亡细胞的组织来源、形态学定位和其调节机制等诸多问题.
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免疫组织化学三重染色技术
免疫组织化学三重染色技术是一种可以在同一张组织切片上显示3种抗原的技术方法.该法既可用于常规病理诊断,亦可进行科研课题的研究,因此具有很强的实用价值.
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常规HE染色不同染色系统的评分分析
近年来,随着科技的发展,我国常规病理诊断中HE染色技术得到不断的改良,滴染式染色方法的出现对传统浸染模式提出挑战,与此同时,对于步骤繁琐的浸染程序进行精简的改良浸染模式也应运而生。我们从染色结果、染色均一性及有无交叉污染等方面,探讨3种染色体系的差异。
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显示DNA含量的快速Feulgen染色技术及应用
细胞的DNA含量分析对判断肿瘤的良恶性及预后有重要参考价值[1-3],然而传统的Feulgen染色操作时间较长,无法应用于冷冻切片、快速石蜡切片或组织印片等快速病理制片过程.我们尝试了应用微波处理的快速Feulgen染色,大大缩短了染色时间,并取得了良好效果,满足了快速病理诊断的要求.
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流式细胞术测定CD3+细胞胞内IL-2表达的研究
几乎所有的细胞因子均可由各种不同类型细胞在体外由有丝分裂原、钙离子载体、佛波醇酯(PMA)等物质诱导产生,从而为各种因子调控机理的研究提供了方便。传统的生物测定技术、酶联免疫法等只能检测分泌在体液或细胞培养上清中的因子,也不能确切分析产生各类因子的细胞类型。而流式细胞术(Flow cytometry,FCM)以单细胞分析为基础,通过特异性染色技术,可快速及准确地多参数定性和定量细胞膜、浆、核内多种物质,从而精确判断各细胞亚群中因子的表达情况〔2〕。本研究用PMA和钙离子载体(ionomycin,IONO)共刺激人外周血单个核细胞,通过monensin阻断、三聚甲醛(paraformaldehyde)固定、皂角素(saponin)破膜等方法,借助抗CD3、抗IL-2单克隆抗体,用FCM同时检测CD3+细胞和胞内IL-2阳性的细胞,分析了不同PMA及IONO浓度条件下,IL-2阳性CD3+细胞的百分率,为细胞亚群中各种因子的测定和研究提供了实验依据。
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动脉粥样硬化模型小鼠心脏中 Movat染色技术的应用
目的::ApoE基因敲除小鼠为目前研究动脉粥样硬化的常用模型之一,其在高脂饲养下可加速形成主动脉粥样硬化斑块。动脉粥样硬化的病灶成分有平滑肌细胞、泡沫细胞、胆固醇结晶、胶原纤维、弹力纤维和蛋白聚糖。 Movat染色技术可以在一张切片上直观显示出这几种成分的病理变化,规范和细化的实验操作步骤可以保证染色结果的一致性,为动脉粥样硬化的深入研究提供清晰可靠的实验依据,从而更客观的评估实验结果。方法:ApoE基因敲除小鼠,雄性70只随机分为8组:ApoE空白组,阳性对照药组,治疗药物A高、中、低剂量组,治疗药物B高、中、低剂量组,以及6只C57小鼠对照组。高脂饲养26周后,采血后处死。取心脏,石蜡包埋后进行定位切片。分批进行染色,染色过程中摸索和细化了染液配置、染色温度、染色时间等条件,规范实验操作。成片后进行组织病理学观察,并对胶原纤维、弹力纤维、蛋白聚糖、泡沫细胞等进行定性和定量分析。结果:通过试验建立了细化、规范化的Movat染色操作流程。光镜下观察染色结果可见各结构成分着色分明:胶原纤维和弹力纤维分别为黄色和黑色,蛋白聚糖呈绿色,泡沫细胞呈淡紫色,心肌平滑肌呈红色。主动脉粥样硬化斑块病灶部位结构清晰,病理表现为血管平滑肌增生,胶原纤维、平滑肌细胞和蛋白聚糖形成纤维帽,纤维帽下泡沫细胞形成并向下延伸,脂质大量沉积,弹力纤维断裂。与空白组和阳性对照组相比,治疗药物A和B均对病症的严重程度和病程进展有一定的治疗效果。结论:在本实验中对Movat染色的染液配置、染色时间、染色温度等进行细化和调整,为实验操作流程的规范化提供依据。在保证了实验统一性的基础上,可客观评估药物对动脉粥样硬化的治疗效果,同时因粥样斑块各结构成分颜色分明,利于镜下成像鉴别,可对各成分进行定量统计分析,为实验结果提供了可靠的实验数据。
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Sihler's 染色法初步观察人表情肌的肌内神经分布
本研究借助sihler's 染色技术观察人表情肌的肌内神经分支分布,为临床开展整形美容术提供解剖学基础。首先通过改良的sihler's 染色技术对2例人的表情肌进行整肌染色,分别经过除色素、脱钙、染色、脱色、中和和透明,使表情肌的肌内神经呈现,借助X线阅片厢观察并摄片。通过观察我们发现,面部表情肌均由面神经支配。颞支分出2-3支,向前分别进入额肌和眼裂以上的眼轮匝肌。神经纤维几呈直角进入眼轮匝肌,分支4-5支,其末梢部与来自动眼神经的上支共同支配上睑提肌。眼裂下部的眼轮匝肌则由面神经的颧支支配,纤维亦呈直角向上进入该肌,分支约有3-4支。颊支与颧支的位置接近,彼此有分支交织在一起,且分支数目较多,这可能与口周围肌数目多,比较发达有关。特别是口轮匝肌的神经分支丰富。口裂以上的轮匝肌主要由颊支支配,分支呈直角进入该肌,每侧约有数十支细小的纤维,颊支的纤维亦进入提上唇肌。口裂以下的轮匝肌则由下颌缘支的深部颏神经支配,每侧的分支约有数十支,呈直角进入。降口角肌主要由下颌缘支的浅支支配,亦有分支进入降下唇肌和轮匝肌。藉此,对主要的表情肌的肌内神经分支分布进行了初步观察,发现表情肌的肌内神经配布与其功能相关,越是发达的表情肌其肌内神经配置也越复杂。
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固相载体法提取胰腺癌患者血清循环DNA的研究
近年研究发现,肿瘤患者血清或血浆中存在较高水平的肿瘤源性DNA(亦称循环DNA),正常人血清或血浆中的含量甚微(<10ng),因而对其遗传学改变进行检测,对肿瘤的诊断、鉴别和治疗预后等具有重要意义[1].然而,血清中含有的大量蛋白质、糖类、脂质等均可影响微量循环DNA的提取,而分离纯化则是准确检测的关键步骤.本研究采用全血基因组DNA提取的异硫氰酸胍-硅胶法[2]与高灵敏度的SYBR GreenⅠ染色技术,建立了一种可提取血清或血浆DNA的固相载体法,并用于胰腺癌患者血清循环DNA检测.
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肽核酸荧光原位杂交技术在临床微生物快速鉴定中的应用进展
肽核酸(peptlde nucleic acid,PNA)探针荧光原位杂交技术是一种诊断新技术,既具有PNA探针杂交的高度专一性,又具备传统染色技术的简便性,可为传染性疾病提供准确的诊断信息.它适用于临床微生物实验室的常规检验,能在短时间内为临床医生提供抗生素使用依据,具有传统微生物检验技术无法比拟的优势.笔者就其在临床微生物快速鉴定领域应用作简要综述.
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肝硬化大鼠肠壁肌间氮能、胆碱能神经的变化
目的:探讨肝硬化大鼠肠壁肌间神经丛氮能、胆碱能神经元及神经纤维的变化.方法:30只SD大鼠随机分为肝硬化组和正常组,采用一氧化氮合酶(NOS)及乙酰胆碱酯酶(AchE)组织化学染色技术,在铺片上观察肝硬化大鼠肠壁肌间氮能、胆碱能神经形态特征并对其分布进行定量研究.结果:肝硬化大鼠肠壁肌间NOS阳性神经丛排列杂乱,染色模糊,神经元数量减少;Ach阳性神经纤维明显变细.模型组大鼠肠壁肌间氮能、胆碱能神经分布的密度均显著低于对照组(P<0.05).结论:肝硬化大鼠肠壁肌间氮能、胆碱能阳性神经受到损伤.
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胆系恶性肿瘤VEGFmRNA、bFGFmRNA、PDGFmRNA表达及意义
肿瘤的生长和转移均需血管生成,主要的促血管生成因子有血管内皮生长因子(vascular endothelial growth facotr,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和血小板衍生生长因子(platelet derived growth factor,PDGF).近年研究发现VEGF、bFGF、PDGF及其mRNA表达与一些恶性肿瘤生物学行为、转移发生及其预后有密切关系[1~3].作者应用原位杂交染色技术研究胆囊癌和肝外胆管癌组织中VEGF、bFGF、PDGF 3种mRNA表达水平及其意义.
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精确肝切除术的临床应用
精确肝切除是依据肝脏的解剖学特点,以解剖肝脏叶段肝静脉为中心,完整切除病灶并大限度保留残肝血供及血液流出道、胆道的一种技术[1]综合应用血流阻断技术、B超引导穿刺染色技术及肝静脉解剖技术可以精确切除病灶区域肝脏,达到既保留功能肝脏,又切除足够病灶的目的[2].精确肝切除技术符合现代外科学精细解剖的要求,是肝脏外科的发展方向之一.
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慢性前列腺炎患者前列腺上皮钾通道的表达及其意义
为探讨钾离子通道在慢性前列腺炎发病机理中的作用,我们应用SP免疫组化染色技术,对75例前列腺增生伴或不伴慢性炎症患者术后标本进行了Ky1.3钾离子通道的检测.现报告如下.