首页 > 文献资料
-
UF-50全自动尿沉渣分析仪的常见故障排除及保养
UF-50全自动尿沉渣分析仪采用流式细胞术、电阻法、电导体、激光和荧光染色法,在临床实验室中用来分析尿液的有形成分.该仪器操作简便快速、稳定、准确、重复性好等特点,可以非常准确地筛选出异常样本,同时提高实验室的自动化水平和检测效率.现将在使用该仪器过程中常见的故障排除及保养简介如下.
-
发光二极管荧光适配器显微镜的实验室诊断效果评价
涂片显微镜检查是结核病实验室检查的重要手段之一,主要包括萋-尼(Ziehl-Neelsen,Z-N)染色技术和荧光染色技术.Z-N染色技术具有操作简便、廉价和特异度高等优点,目前使用广泛;荧光染色法较Z-N染色法检出率高而阅片强度低,但由于传统汞灯光源的荧光显微镜(fluorescence microscopy,FM)价格昂贵,在一定程度上限制了其使用范围.发光二极管荧光显微镜(light emitting diodes,LED)是结合了发光二极管与荧光显微镜技术的新型显微镜,已有的数据显示LED显微镜较Z-N染色-普通光学显微镜检查敏感度高,具有与荧光显微镜媲美的高敏感度和相似的特异度,而LED显微镜的价格远远低于荧光显微镜[1-2],这些优势预示着未来在结核病领域,LED显微镜有逐步替代传统光学显微镜和传统荧光显微镜的可能.
-
荧光染色法在马拉色菌病诊断中的应用
目的:评价荧光染色法在快速诊断马拉色菌病中的应用价值.方法:收集200例本院门诊疑似为花斑癣、马拉色菌毛囊炎和脂溢性皮炎患者的临床标本,分别运用荧光染色法和KOH湿片法对这些标本进行检测,并对检测结果进行比较.结果:荧光染色法将菌丝和孢子染成亮蓝色,阳性检出率高;而KOH湿片法在镜下孢子不易观察,阳性检出率低.结论:荧光染色法是快速诊断马拉色菌病的理想方法.
-
皮肤经络的形态学基础及其立毛肌-交感轴突反射传递机制
我们把经络分为血管性与非血管性两大类,本文深入研究了非血管性经络--皮肤信息通路或皮肤交感神经敏感线的结构和活动机制.首先用宏观放射自显影的方法,在大鼠皮肤中显示出纵贯全身的系列交感物质分布线,连续清晰、左右对称,在头部和肢体末端形成环路.在沿物质分布线经过的背上部切断皮肤,可以显著阻断针刺"足三里"产生的针刺效应,说明皮肤的交感物质分布线即针刺信号传递线路,或者说,经络的形态学基础已经显现出来.进一步通过SPG荧光染色法观察到,位于大鼠皮肤的交感物质分布线来源于其下支配立毛肌的交感神经网络.结合我们过去关于拔除经线毛囊阻断针刺效应的实验,提出毛囊立毛肌在经络实质中的动力靶器官作用和实体形态学基础.后,为探索针刺信号的传递机制,将大鼠环形剪毛,针刺后出现与宏观显影线走行一致的立毛线或立毛带,表明交感物质分布线即立毛线.皮内注射苯肾上腺素或垂体后叶素后出现相似的立毛线;在去中枢神经支配的皮条上也观察到延伸至在体皮肤上的立毛线;全部切断皮肤阻断了立毛线的跨切口传递;仅切断部分真皮则没有影响,如果在切断部分真皮的切口内微量注射普鲁卡因同样可以阻断立毛线的跨切口传递.说明立毛线的产生是由于立毛肌收缩的机械牵拉及由之引起的局部真皮深层轴突反射传导介导,或者说针刺信号的传递机制为立毛肌机械牵拉-皮内交感神经轴突反射传递.后,将大鼠全身毛剃光后,首批生长出来的毛呈线状和环状,构成皮肤毛线环路系统,与交感物质分布线一致,且更加周全.本文为经络的形态学研究提供了依据.
-
万寿菊茎叶中2种黄酮类化合物的体外抗肿瘤活性
目的:研究万寿菊茎叶中两种黄酮类化合物4'-甲氧基-泽兰素-3-O-β-D-葡萄糖苷(化合物Ⅰ)和山柰酚-3,7-O-α-L-双鼠李糖苷(化合物Ⅱ)的抗肿瘤活性.方法:人胃癌细胞SGC7901与人肝癌细胞SMMC7721经20,40,80,120,160μmol·L-1的两种化合物作用24,48,72 h后,使用MTT法测定抑制率,并以5-氟脲嘧啶作为阳性对照.使用吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色法观察浓度为160 μmol·L-1的两种化合物作用于细胞密度为1×106个/mL的2种肿瘤细胞48 h细胞形态学变化及细胞凋亡情况.结果:不同浓度的两种黄酮类化合物均可抑制人胃癌细胞SGC7901和人肝癌细胞SMMC7721的增殖,且呈现浓度与时间依赖性.化合物Ⅰ作用这2种癌细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为111.7,330.4 mg·L-1.化合物Ⅱ作用这两种癌细胞48 h的IC50分别为683.8,464.7 mg·L-1.2种化合物作用肿瘤细胞后细胞形态发生改变,并有部分细胞发生凋亡.结论:万寿菊茎叶中分离的2种黄酮类化合物具有体外抗肝癌和胃癌活性.
-
凝胶上蛋白质染色方法研究进展
凝胶电泳是分离蛋白质及多肽的一种强有力的生化分析工具.而蛋白质染色在凝胶电泳系统中则是一个重要的组成部分,随着蛋白质组学的飞速发展,凝胶蛋白质染色技术已成为衔接二维电泳和下游质谱分析的关键环节.目前,常用的凝胶上蛋白质染色方法主要有染料染色法、银染法、负染法和荧光染色法.本文对近几十年来在凝胶上蛋白质染色技术方面所取得的进展和突破进行总结,并对未来的发展方向做出展望.
-
琼脂糖凝胶中DNA检测方法的研究进展
作为研究生命遗传物质载体——核酸的工具,琼脂糖凝胶电泳已成为高效分离和分析核酸分子的必备手段,而在电泳后对DNA的检测是关键环节,因为它直接关系到实验结果显现与否.目前,常用的琼脂糖凝胶上DNA检测方法有荧光染色法、染料染色法、金属离子染色法、负染法等.近几十年来,许多研究者对染色方法进行了改进,使灵敏度和线性动态范围都有较大程度提高.本文主要对琼脂糖凝胶电泳后的DNA检测技术方面的研究历程进行总结,并展望其未来的发展方向.
-
噬菌体生物扩增法结合荧光染色法快速检测结核分枝杆菌
目的 通过用噬菌体生物扩增法(PhaB)结合荧光染色法检测51例标本中的结核分枝杆菌,与抗酸染色和X线比较,来探讨此检测方法的临床价值.方法 标本来源于门诊和住院病人,将每例标本进行噬菌体生物扩增法检测,并涂片进行抗酸染色法、结核杆菌荧光染色法检测,并与X线诊断结果和后临床诊断进行比较,数据采用x<'2>统计分析.结果 噬菌体生物扩增法检出阳性率与X线检查阳性检出相符率、临床后诊断相符率分别达95.0%和96.55%,诊断比较差异无显著性(P>0.75).而用单纯的抗酸染色法检查,相符率分别只达45.0%和62.07%,差异有显著性.结论 采用噬菌体生物扩增法结合荧光染色法较单纯的抗酸染色法检查结核分枝杆菌阳性检出率和与临床后诊断相符率显著增高,是一种敏感性高,特异性强,快速、简便和无创的检测方法,对防止漏诊,病情观察、疗效判断为临床提供了可靠的依据.
-
生长抑素对肝星状细胞的影响机制
目的:研究生长抑素(somatostatin,SST)与大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)增生、凋亡的关系.方法:分离、培养的原代大鼠HSC,经不同浓度SST(10-6-10-10mol/L)处理72 h后,以吖啶橙(acridineorange,AO)/溴乙啶(ethidium bromide,EB)荧光染色法、末端核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷原位缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)、透射电镜及流式细胞术检测其凋亡率的改变.SST作用120 h后,以甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测HSC增生率的变化.并通过对细胞动力学的观察,探讨SST的作用机制.结果:SST可通过剂量依赖方式抑制HSC增生,提高HSC凋亡率.浓度为10-6mo1/L或10-7mol/L时效果尤为显著.Go/G1期阻滞是SST发挥作用的重要途径.结论:低剂量SST即可抑制HSC增生,并促进其凋亡,提示SST在抗肝纤维化方面具有潜在价值.
-
几种抗癌药物诱导胰腺癌细胞凋亡能力的比较
目的:比较抗癌药物诱导胰腺癌细胞凋亡的能力,以期找到一种疗效较好的化疗药物.方法:根据临床常用的高及低剂量,分别将羟基喜树碱、三氧化二砷、紫杉醇、全反式维甲酸、奥曲肽及5-Fu与胰腺腺泡癌细胞SW1990系共同培养6、12、24h,利用光镜及电镜下的形态学方法及脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)确定细胞凋亡,并利用AO-EB双重荧光染色法及PI和Annexin-V FITC双重标记下的流式细胞术定量测定细胞凋亡率.结果:上述药物均可诱导SW1990细胞凋亡,凋亡诱导能力由强到弱依次为紫杉醇、5-氟尿嘧啶、羟基喜树碱、三氧化二砷、全反式维甲酸和奥曲肽.各药物的凋亡诱导能力呈剂量和时间的依赖性,其中紫杉醇的作用强且快.结论:紫杉醇可能是一种疗效较好的胰腺癌化疗药物.
-
三氧化二砷诱导人类大肠癌细胞凋亡的分子机制
目的:明确三氧化二砷(As2O3)注射液对人类大肠癌细胞株的诱导凋亡作用,并探讨其分子机制.方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、AO/EB荧光染色法、透射电镜观察、DNA电泳、流式细胞术法及免疫组化等方法,系统地观察了As2O3注射液对体外培养的人类大肠癌细胞株LoVo和CoLo-320的生长活力、细胞凋亡、细胞周期及其相关基因表达的影响.结果:用不同浓度(0.5,1.0,2.0,4.0 mg/L)As2O3作用LoVo和CoLo-320细胞不同时间(24,48,72 h),均能显著抑制其生长(P＜0.05),用药后诱导其出现了典型的细胞凋亡的形态学和生化学改变,癌细胞Bcl-2基因表达明显下降,Bax和Fas基因表达显著增强(P＜0.01).结论:As2O3注射液对人类大肠癌细胞具有显著的诱导凋亡作用,这一作用受到多种基因的调控,即Bcl-2基因表达下调,Bax和Fas基因表达上调.
-
荧光染色法与KOH湿片法在浅部真菌感染直接镜检中的应用比较
目的 比较荧光染色法和KOH湿片法在真菌直接镜检中的应用.方法 采集皮肤科门诊105例疑为浅表真菌感染的患者皮损标本,每例同时行荧光染色法及KOH湿片法检测,并对检测结果进行比较.结果 105份标本中荧光染色法检出85例阳性,KOH湿片法检出58例阳性,荧光染色法阳性率(80.95％)明显高于KOH湿片法(55.23％).结论 荧光染色法较KOH湿片法结果更快速、准确,可用于浅部真菌感染的快速诊断.
-
中国仓鼠卵巢细胞DNA国家标准品的研制
目的 建立中国仓鼠卵巢细胞DNA残留量定量测定用国家标准品.方法 使用QIAGEN Genomic-tip 500/G以及基因组DNA纯化试剂制备了中国仓鼠卵巢细胞基因组DNA作为标准品原料,通过紫外分光光度法和电泳进行纯度和含量测定后分装,采用紫外分光光度法对我国第一批中国仓鼠卵巢细胞DNA国家标准品进行协作标定,并评价其稳定性和适用性.结果 中国仓鼠卵巢细胞DNA国家标准品经检测,A260/A2so均在1.7 ～1.9之间,电泳图谱只有单一条带,符合规定.该标准品经6家实验室协作标定共90次,几何平均含量为93.63 μg· mL-1,平均含量的95％可信区间为92.86 ～ 94.40 μg·mL-1,单次测定的95％参考值范围为86.51 ～ 100.89 μg·mL-1,平均可信限率为0.81％.加速热稳定实验表明,该标准品在-20、4、25、37℃条件下放置4个月,DNA含量无明显改变,但37℃条件下A260/A280有下降趋势；-20、4、25℃条件下电泳结果为单一条带,37℃条件下DNA有降解条带.-20 ℃贮存1年的长期稳定性结果显示,标准品DNA浓度及A260/A280无显著性差异,电泳条带单一,因此-20℃条件下长期保存标准品稳定性较好.在标准品适用性研究中,利用该标准品进行荧光染色法测定,标准曲线r值为0.999 0以上,在0.781～100ng·mL-1之间线性良好,各稀释度RSD均小于10％；利用该标准品进行定量PCR法测定,标准曲线r值为0.990 0以上,在10-2～103 pg之间线性良好,熔解曲线可见单一峰出现.结论 该批中国仓鼠卵巢细胞DNA国家标准品各项指标均符合要求,可作为国家标准品用于荧光染色法和定量PCR检测中国仓鼠卵巢细胞DNA残留量,含量定为93.63 μg·mL-1,批号为270026-201101.
-
真菌性角膜炎临床实验室快速诊断方法的探讨
目的：观察荧光染色法应用于真菌性角膜炎临床快速诊断的效果。方法临床送检疑似真菌性角膜炎患者的角膜刮片标本60例为研究对象，所有标本均应用荧光染色法、真菌培养和墨汁-KOH湿片镜检三种方法检测，比较不同方法的检测结果。结果在45例真菌培养阳性标本中，墨汁-KOH湿片镜检有28例阳性，阳性率为62.22%(28/45)，荧光染色法阳性40例，阳性率为88.89%(40/45)，两种方法阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论荧光染色法具有快速、操作简便、阳性符合率高等特点，是真菌性角膜炎一种有效的实验室诊断方法。
-
真菌性角膜炎的实验室快速诊断方法分析
目的：探讨真菌性角膜炎快速而有效的临床实验室诊断方法。方法：对2012年6-12月53例临床疑似真菌性角膜炎患者送检的角膜刮片标本，同时进行墨汁-KOH湿片法镜检、荧光染色镜检和真菌培养。以真菌培养为诊断金标准，对墨汁-KOH湿片法与荧光染色法进行方法学比较。结果：32例真菌培养阳性标本，墨汁-KOH湿片法20例阳性，阳性率为62.5%，荧光染色28例阳性，阳性率为87.5%，两者阳性率比较差异有统计学意义（字2=6.125，P=0.025）；两种涂片镜检共为阳性的20例，共为阴性的4例。结论：荧光染色法镜检可以提高真菌性角膜炎的阳性诊断率，是真菌性角膜炎快速、简单、有效的临床实验室诊断方法。
-
7690-Xu荧光染色法在泌尿系统疾病的应用研究
目的:探讨7690-Xu荧光染色法在泌尿系统疾病的应用.方法:用7690-Xu荧光染色法,根据细胞的分化程度所呈现的不同颜色的荧光及其形态学变化,对尿路脱落细胞进行诊断.结果:在100例血尿患者中28例检出了癌细胞,并经临床确诊对比或经手术证实为癌,与临床诊断结果比较,阳性符合率为87.5%.结论:该染色法简单,细胞的荧光图像清晰,颜色对比鲜明,不受各种血细胞干扰,可快速检测泌尿系统癌细胞.
-
萋-尼氏抗酸染色法和金胺O荧光染色法在结核分枝杆菌痰涂片检测中的对比
目的:比较萋-尼氏抗酸染色法(简称Z-N)和金胺O荧光染色法(简称荧光染色)在痰涂片镜检中对结核分枝杆菌的检测效果差异.方法:纳入580份痰标本,挑取相同部位制成两份涂片,分别使用Z-N和荧光染色进行染色镜检,比较两种方法的阳性检出率、阳性分级标准及读片时间上的差异.将涂片后余下的痰标本采用全自动分枝杆菌检测/药敏系统做液体培养.结果:Z-N法阳性检出率为10.8％,荧光染色法为15.3％,两种方法比较差异有统计学意义(P＜0.05).对两种方法每一级别的结果进行X2检验,结果表明两种染色方法在各个分级没有统计学差异(P＞0.05).荧光染色法的读片时间要明显短于Z-N.结论:荧光染色阳性检出率略高于Z-N,证明荧光染色法是一种快速、灵敏的检测方法,对肺结核的临床诊断具有重要意义.
-
荧光染色法检测重组乙型肝炎疫苗中残留DNA含量
目的 采用荧光染色法检测重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)纯化工艺中间产品、原液及半成品中残留DNA含量.方法 采用《中国药典》三部(2010版)附录ⅨB荧光染色法检测重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)纯化工艺主要中间产品[丁基琼脂糖层析收集液(以下简称BA富集液)]、原液及半成品中残留DNA含量,对该方法的准确度、精密性进行验证,并用建立的方法检测10批BA富集液、原液及半成品中残留DNA含量.结果 该方法线性范围1.25～80 ng/ml,r2≥0.999,低检测限为1.25 ng/ml;DNA标准品在BA富集液、疫苗原液及半成品中的平均回收率分别为105.8％、101.4％和108.5％,准确度较好;不同时间点重复测定同一批样品的变异系数(CV)在1.6％～6.56％之间,不同试验间重复测定同一批样品的CV在1.4％～3.6％之间,试验内和试验间精密性较好;10批BA富集液中DNA浓度均较高,经过纯化后,原液中DNA含量明显降低,半成品中除个别批号外,均基本达到低于10 ng/剂的要求.结论 荧光染色法可用于重组乙型肝炎疫苗(酿酒酵母)纯化工艺中间产品、原液及半成品中残留DNA含量的常规监测,具有简便、快速、自动化程度高等特点,测定前样品无需进行处理.
-
沙眼衣原体宫颈炎疗效分析
近年来,沙眼衣原体感染在世界各地广泛流行,在西欧和美国等发达国家和地区,其感染已超过淋病而占所有性传播疾病之首.我院自1998年以来,在妇科门诊对就诊1100例病人行宫颈刮片检查,采用荧光染色法,发现沙眼衣原体感染阳性¨0例,阳性率10%.对检查阳性患者予罗红霉素及美满霉素口服,疗效满意,现报告如下.
-
荧光染色法玻片保存与结果报告的评价
目的 为促进痰涂片荧光染色法的发展.方法 根据结核病细菌学检验规程制作痰片,荧光染色后采用10倍目镜和40倍物镜确认,20倍物镜进行镜检和报告结果,将报告后的阳性痰片31张贴上标签,记录日期和报告结果,放入玻片盒内室温保存,满1年后由笔者复核报告结果,复核时的报告方式按表2、40倍物镜的标准报告.结果 复核结果与保存前的报告结果基本一致.结论 荧光染色法的痰片符合痰检质控保存三个月的要求,值得推广使用.
