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发光二极管荧光适配器显微镜的实验室诊断效果评价
涂片显微镜检查是结核病实验室检查的重要手段之一,主要包括萋-尼(Ziehl-Neelsen,Z-N)染色技术和荧光染色技术.Z-N染色技术具有操作简便、廉价和特异度高等优点,目前使用广泛;荧光染色法较Z-N染色法检出率高而阅片强度低,但由于传统汞灯光源的荧光显微镜(fluorescence microscopy,FM)价格昂贵,在一定程度上限制了其使用范围.发光二极管荧光显微镜(light emitting diodes,LED)是结合了发光二极管与荧光显微镜技术的新型显微镜,已有的数据显示LED显微镜较Z-N染色-普通光学显微镜检查敏感度高,具有与荧光显微镜媲美的高敏感度和相似的特异度,而LED显微镜的价格远远低于荧光显微镜[1-2],这些优势预示着未来在结核病领域,LED显微镜有逐步替代传统光学显微镜和传统荧光显微镜的可能.
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荧光原位杂交及TLE1免疫组织化学在小细胞低分化型滑膜肉瘤诊断中的应用
滑膜肉瘤(synovial sarcoma)占软组织肉瘤的5%~10%,以青壮年多见,主要发生于四肢大关节附近,多数生长缓慢.根据组织学形态及分化程度,滑膜肉瘤分可为5种类型;单相纤维型、单相上皮型、双相型、低分化梭形细胞型和小细胞低分化型(small cell variant of poorly differentiated synovial sarcoma),其中后者较为罕见,是病理学诊断中的难点.
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荧光原位杂交检测精子细胞膨胀成功的改良方法
近些年,在研究精子非整倍体与流产、畸形、不育及环境化学物质对人类生殖功能等影响时,荧光原位杂交(FISH)方法因适合大量间期核精子的检测得到广泛应用.因为精细胞变形成蝌蚪状时,核组蛋白被精蛋白替代,DNA以一种特殊方式被压缩、凝聚,正常情况下很难实现杂交,因此DNA去凝聚是精子杂交前期处理的关键步骤.
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靶向微泡造影剂超声分子成像的研究进展
分子影像学是指在传统的影像学方法中引入成像造影剂在分子或细胞水平观察、分析和测量生物体内某一生物学过程或疾病某一阶段特定分子标志物(如肿瘤特异性抗原、血管生成因子和凋亡标志物)的影像学方法,包括分子磁共振成像(molecular magnetic resonance imagming, mMRI)、生物发光显微镜(optical bioluminescence)、荧光显微镜(optical fluorescence)、单光子发射计算机断层成像术(single-photon emission computed tomography,SPECT)和正电子发射断层成像术(positron emission tomography,PET)、靶向超声成像等[1,2].超声分子成像(ultrasound molecular imaging)从广义上讲是指在靶向微泡造影剂的介导下,应用超声成像技术对活体生物化学过程进行细胞和分子水平上的定性和定量研究的分子影像学方法.其总的思路设想是:将靶向配体(蛋白质、抗体、肽类等)连接在微泡造影剂表面,造影剂进入血循环后与靶点部位受体分子选择性结合并积聚,靶区与正常组织间的超声信号对比度升高,实现对靶点(受体表达上调)的选择性成像.这种成像技术将在了解疾病发生的分子机制、指导肿瘤治疗、研发新的治疗靶点和药物等方面发挥重要作用,预计未来的几年内将会有大量这方面的研究,有望十年内可应用于临床.
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眼-皮肤黑色素细胞增多症二例
例1 男性,66岁,患者2009年10月因双眼一过性异物感,在外院检查意外发现眼部脉络膜肿块,经荧光素眼底血管造影(fundus fluorescence angiography,FFA)、眼部B超、眼眶MRI等检查后,考虑:“脉络膜血管瘤”,遂诊断为“左眼脉络膜血管瘤”,行多次激光光凝治疗,肿块大小无变化,一直定期随访.直至2011年3月复查眼眶MRI,提示:“病灶较2009年10月增大伴出血”,为进一步诊治,于2011年3月到我院就诊.患者否认系统病史和家族疾病史.体检:患者左侧前额,上、下眼睑区域皮肤均有蓝黑色素沉着(图1A).眼部检查:采用国际标准视力表检查视力,双眼裸眼视力:右眼0.6,左眼0.8,佳矫正视力均为1.0.右眼未
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中心性浆液性脉络膜视网膜病变喷出型渗漏
患者男性,37岁.因左眼视力下降20 d,于2010年7月19日来中山大学中山眼科中心就诊.既往双眼正常,无类似病史.全身检查无异常.眼科检查:左眼视力0 9,眼前节检查未见异常,眼底检查见精粹图片1和2.诊断:左眼中心性浆液性脉络膜视网膜病变( central serous chorioretinopathy,CSC).CSC是眼科临床常见的眼底病变,该病急性发作期荧光素眼底血管造影(fundus fluorescence angiography,FFA)的典型改变以两种形式为主,即扩散型(又称墨渍弥散,inkbot diffusion)和喷出型(又称烟囱现象.smoke stack phenomenon),临床以前者多见,后者少见,而同—患眼出现2处喷出型渗漏罕见.
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彗星荧光原位杂交技术在检测特定基因损伤与修复中的应用
彗星荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization in combination with the Comet assay,Comet-FISH)是彗星试验(Comet assay,又称单细胞凝胶电泳)和荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术的结合,是一种在单细胞水平上检测特定基因损伤和修复的有效方法[1].
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荧光定量PCR检测HCMC DNA的临床意义与探讨
本试验采用荧光定量聚合酶链反应(fluorescence quantitativePCR,FQ-PCR)法检测人巨细胞病毒(HCMV) DNA,并探讨其在HCMV感染诊断和治疗中的应用价值.
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多波长氪激光治疗糖尿病视网膜病变
我科对218例糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)患者行多波长氪激光光凝治疗,现报告如下.1 资料与方法1.1 资料 2000年1月至2006年1月我科收治DR患者共218例(322眼),其中男性121例(178眼),女性97例(144眼);年龄32~76岁;糖尿病病程6个月至18年.Ⅰ型糖尿病9例(12眼),Ⅱ型糖尿病209例(310眼).经裂隙灯显微镜、检眼镜及眼底荧光血管造影(fundus fluorescence angiography,FFA)检查.增殖前期113眼,增殖期209眼;伴黄斑水肿61眼,轻度白内障112眼,玻璃体混浊91眼,糖尿病性肾功能衰竭3例,行肾透析,未行FFA(玻璃体切除+硅油注入术后32眼,人工晶状体眼69眼).
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荧光定量检测乙肝病毒含量在PHC患者中的临床应用
为进一步探讨HBV感染与原发性肝癌(PHC)的关系,本文采用实时荧光定量PCR法(Fluorescence quantitative PCR,FQ-MR)对238例PHC患者进行HBV-DNA定量分析,旨在了解PHC患者HBV的定量情况,探讨HBV-DNA定量检测的应用价值,以及与乙肝标志物(HBV-M)的关系.
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荧光原位杂交(FISH)产品质量标准及检验技术平台的建立和应用
荧光原位杂交(Fluorescence in situs hybridization,FISH)技术是20世纪80年代开始发展起来的一种新的分子定位检测技术,这一技术的问世,为人类基因组研究提供了一项有效的手段.
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他克莫司对HaCaT细胞干细胞因子mRNA及小鼠B16黑素瘤细胞c-kit mRNA表达的影响
目的 探讨他克莫司对角质形成细胞干细胞因子(SCF)mRNA及黑素细胞c-kit mRNA表达水平的影响.方法 分别培养人永生化角质形成细胞(HaCaT)和小鼠B16黑素瘤细胞,经他克莫司作用48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测SCF mRNA及c-kit mRNA的表达.结果 他克莫司作用后,HaCaT细胞SCF mRNA、B16黑素瘤细胞c-kit mRNA的相对表达量均升高,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).结论 他克莫司可以上调HaCaT细胞SCF mRNA及B16黑素瘤细胞c-kit mRNA的表达量.
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玫瑰糠疹患者单一核细胞转录因子T-bet mRNA及GATA-3mRNA的表达
目的 探讨T-bet、GATA-3在玫瑰糠疹发病机制中的意义.方法 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术检测17例玫瑰糠疹患者和20例正常人外周血单一核细胞中T-bet mRNA和GATA-3mRNA的表达.结果 玫瑰糠疹患者外周血中T-bet mRNA与GATA-3 mRNA Avg△Ct值分别为3.33±0.94与5.22±0.69,对照组分别为4.31±1.11与4.36±1.02.患者的T-bet mRNA表达高于对照组(P<0.05),GATA-3表达低于对照组(P<0.05).结论 玫瑰糠疹患者外周血中T-bet/GATA-3升高,Th1优势表达,细胞免疫异常在玫瑰糠疹发病过程中可能具有重要作用.
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实时荧光定量PCR法与常规PCR法及细菌培养法检测沙门菌的比较
沙门菌是一种常见的重要人兽共患病原菌,在自然界中分布广泛,它极易污染水源、食品及畜产品,引起人食物中毒、急性胃肠炎和动物腹泻等疾病.目前国内外对该菌的快速检测主要集中在免疫酶试验、免疫扩散法、乳胶凝集试验和免疫荧光法及酶联免疫吸附试验(ELISA)、聚合酶链反应(PCR)技术等方法上[1~2].
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荧光分析法测定水发食品中过氧化氢残留量
过氧化氢是一种强氧化剂,具有消毒、杀菌和漂白等功能,被广泛使用.在食品中,根据我国<食品添加剂使用卫生标准>的规定,只允许在袋装豆腐干和生鲜牛奶的生产过程中使用,但成品中不得有过氧化氢残留[1].近年来,食品中残留的过氧化氢引起的食物中毒事件时有发生[2],而我国目前尚无定量的标准检测方法,文献报道多用滴定分析法、分光光度法[3],且费时、容易受混杂因素的影响,选择上受到一定限制.作者基于Fe(Ⅱ)与H2O2在酸性介质中,经Fenton反应产生羟基自由基,与苯甲酸发生羟基化反应产生羟基苯甲酸,在碱性介质中可产生很强的荧光,而苯甲酸本身几乎不产生荧光[4],在优化的条件下,荧光强度的增加与过氧化氢的含量有定量关系,据此建立荧光分析法测定水发食品中过氧化氢残留量.
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荧光原位杂交技术(FISH)在泌尿系统肿瘤领域的应用
一、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术概述1969年,Gall和Pardue等首次将同位素探针用于原位杂交实验,获得成功.1987年,染色体原位抑制杂交法的创建,使FISH技术得以迅速发展.随后,Cremer等用生物素和汞或氨基乙酰荧光素等非放射性物质标记探针,创立了双色FISH技术.1990年,Nederlof等用3种荧光素成功探测出了3种以上的靶位DNA序列,从而宣告了多色FISH技术的问世.
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增生性瘢痕中mu型、kappa型和delta型阿片肽受体mRNA表达水平与痛痒的关系
我们采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time fluorescence quantitative-PCR)技术检测增生性瘢痕患者3种阿片肽受体( MOR、KOR、DOR)的表达水平,并分析其临床意义.
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先天性巨结肠肠壁内去甲肾上腺素能神经支配的荧光组织化学观察
本文用改良的乙醛酸荧光组化及乙酰胆碱酯酶染色方法观察了15例先天性巨结肠患儿手术切除的肠段.粘膜中的荧光神经纤维的数量及分布方式在"正常"段及狭窄段间无明显的差异,而在粘膜下层及肌层,交感神经荧光强度及分布方式则有明显差异.在狭窄段中缺乏荧光纤维末梢形成的篮样丛结构及胆碱酯酶阳性的粘膜下、肠肌神经丛及其内的神经节细胞.
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神经母细胞瘤儿茶酚胺诊断的研究
神经母细胞瘤因就诊晚,诊断方法欠敏感,常延误诊断.本文根据该肿瘤儿茶酚胺代谢异常的生物学特征,开展多项儿茶酚胺诊断的研究,以期达到早期诊断的目的.
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眼底荧光血管造影不良反应的防治与护理
眼底荧光血管造影(fluorescence fundus angiography,FFA)是眼科用于眼底病极有价值、重要的临床诊断检查技术,可观察到检眼镜所不能发现的细微病变,为提高眼底病诊断的可靠性及制订眼底病的治疗方案提供了有效证据[1-2].荧光素钠目前是常用、性质相对稳定、较安全的眼底血管造影剂,但是也可致轻重不一的不良反应,如恶心、呕吐等,甚至可发生过敏性休克、心脏停搏、呼吸停止及其他严重并发症.因此,分析荧光素钠注射液不良反应,探讨其预防措施,对于提高FFA检查的安全性和确保患者的生命安全具有十分重要的意义.