首页 > 文献资料
-
HIV-1 LTR区转录功能研究进展
作为获得性免疫缺陷综合症(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)的病原体,HIV-1基因组结构复杂,编码大量调节蛋白与辅助蛋白.转录水平调节主要依赖细胞内前病毒长末端重复序列(1ong terminalrepeats,LTR)和病毒因子及大量细胞转录因子的相互作用实现.本文就HIV-1 LTR区的转录调节功能的研究进展作一综述.
-
人胎儿骨髓间充质干细胞来源的类肝细胞的分子生物学鉴定
目的:对MMSCs来源类肝细胞进行分子生物学鉴定.方法:从人胎儿骨髓中分离MMSCs,在10 g/L Matrigel作基质,2.5 mmoL/L AZA预处理10-12 h,HGF 10 μg/L+FGF4 10μg/L+HGM培养基中培养和诱导.收集诱导培养4,7,14,21,28 d时的细胞爬片,SABC免疫组化法DAB显色检测肝细胞早期标志AFP,CK19及早期转录因子GATA4,成熟肝细胞标志ALB,CK18,GST-π,肝细胞转录因子HNF1α;提取诱导分化10 d和第28 d细胞RNA及蛋白质,设计AFP,CK19,ALB,CK18,CYP1B1,CYP2B6引物,进行RT-PCR,观察在mRNA水平肝细胞标志的表达,采用Western blot检测CK18,AFP,ALB的表达量.结果:未诱导培养的MMSCs中,有较少的细胞表达AFP,未见其他肝脏特有的转录因子或者胞质蛋白标志.免疫组化显示在诱导早期可见较多细胞呈GATA4,AFP和CK19阳性表达,至诱导后期表达下降,而ALB,CK18,GST-π和肝细胞转录因子HNF1α阳性细胞比例逐渐上升.RT-PCR显示,未诱导的MMSCs仅可表达微弱的AFP mRNA,诱导早期可见AFPmRNA和CK19mRNA表达,诱导后期未见扩增,而ALB,CK18,CYP1B1 mRNA早期和后期均可见表达,在诱导后期可见CYP2B6 mRNA表达,但很弱.Western blot检测显示诱导细胞中AFP,ALB和CK18蛋白的表达趋势同基因表达类似.在65 ku和68ku处诱导细胞组可见AFP和ALB目的条带,在45 ku处诱导细胞组可见CK18目的条带.未诱导的细胞和诱导早期细胞中AFP有表达,后期未见.诱导早期和后期CK18和ALB均有表达,且后期增强.结论:MMSCs向类肝细胞的横向分化是先分化为肝前体细胞,再分化为成熟肝细胞,在本实验诱导条件下可获得在复制及翻译各环节肝细胞标志阳性的类肝细胞.
-
创伤患者血清新喋呤的变化及临床意义/肌色素上皮源性因子基因与黑色素瘤发生相关/血管紧张素Ⅱ对人内皮细胞转录因子NF-κB的激活机制及其对血小板源生长因子B链基因转录的影响
-
急性炎症反应中真核细胞转录因子-κB的信号转导作用
真核细胞转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)是一种普遍存在于真核细胞中具有序列特异性二聚体结构的转录因子,是所有Rel家族DNA结合蛋白的总称,在调节免疫应答、炎症反应及细胞增殖、分化及凋亡等方面起关键作用[1] .NFκB转录复合体包括一系列由p50、p52、Rel A(p65)、Rel B和c-Rel等亚基构成的同型或异型二聚体,这些复合体结合到DNA的调控区域(称为κB位点)后,激活特异靶基因的表达活性[2].通常情况下,NF-κB存在于细胞浆中,并与其抑制蛋白(inhibitory-κB,I-κB)家族相结合,后者遮蔽了NF-κB的细胞核定位信号位点,并阻止了细胞核摄取NF-κB.
-
姜黄素对细胞转录因子的调控作用研究进展
转录因子是类蛋白质,它能够与DNA在启动子和增强子的区域相结合,起到调控下游基因表达的功能.转录因子能够被其他的蛋白分子激活或失活,经常是作为信号转导的终步骤.真核生物的转录因子大多对转录进行正向调控,而仅有少数的转录因子是对转录过程起到负向的调控功能.转录因子与DNA的不同区域结合导致了其功能上的差异.目前一些转录因子已经被看作是治疗某些疾病的作用靶点.
-
核因子-κB在实验性酒精性肝病大鼠模型中的表达
近年来,随着人民生活水平的日益提高,酒精性肝病已成为危害我国人民身体健康的一个重要原因.因此,深入探讨酒精性肝病的发病机制并寻求有效的防治方法尤为重要.核因子-κB(NF-κB)作为一种多功能的细胞转录因子,在肝脏炎症、纤维化及肝细胞再生、凋亡等病理生理中起着重要作用[1].
-
玫瑰糠疹患者单一核细胞转录因子T-bet mRNA及GATA-3mRNA的表达
目的 探讨T-bet、GATA-3在玫瑰糠疹发病机制中的意义.方法 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR技术检测17例玫瑰糠疹患者和20例正常人外周血单一核细胞中T-bet mRNA和GATA-3mRNA的表达.结果 玫瑰糠疹患者外周血中T-bet mRNA与GATA-3 mRNA Avg△Ct值分别为3.33±0.94与5.22±0.69,对照组分别为4.31±1.11与4.36±1.02.患者的T-bet mRNA表达高于对照组(P<0.05),GATA-3表达低于对照组(P<0.05).结论 玫瑰糠疹患者外周血中T-bet/GATA-3升高,Th1优势表达,细胞免疫异常在玫瑰糠疹发病过程中可能具有重要作用.
-
LASIK术后皱褶对早期角膜修复反应的影响及临床应用价值
本课题实验动物由南京大学医学院附属鼓楼医院实验动物中心提供,健康成年纯种新西兰白兔,体重大于2kg,雌雄兼用,裂隙灯检查无眼前节疾患.本部分研究通过建立兔LASIK皱褶模型和对照模型对比研究,观察角膜基质细胞凋亡情况、角膜基质细胞数量、角膜基质炎症细胞数量和白细胞介素1 (IL-1β)、转化生长因子(TGF-β 2)、核细胞转录因子(Nuclear cell transcription factor,NF-κ B)和性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达情况来讨论LASIK术后皱褶对上皮瓣细胞保留对早期角膜创伤愈合反应的影响.核细胞转录因子是一种免疫球蛋白,它能够特异性结合到核蛋白质因子,刺激细胞核内的基因转录调节.有研究表明,角膜内的NF-κB有调节细胞凋亡的作用.它不仅能调节角膜细胞的炎症介质和伤口愈合反应,还对细胞凋亡,增殖和活化,以及调节愈合过程中发挥调节作用.
-
015 液体低切应力振荡流对血管内皮细胞转录因子NFκB的影响
目的: 核因子κB(NFκB)是一种具有多向性调节作用的蛋白分子, 存在于胞浆中, 一旦活化则可转位进胞核中与目标基因启动区域中特定序列结合而调控基因的转录. 在血管内皮细胞中NFκB参与白细胞粘附分子、 MCP-1、细胞因子等基因的转录调控. 已往工作已经证明, 流体低切应力振荡流动方式作用脐静脉内皮细胞可导致粘附分子VCAM-1表达上调, 这在动脉粥样硬化发生中起重要作用. 故进一步探讨这种VCAM-1的上调是否与NFκB参与调节相关. 方法: 接种的第二代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)玻片置于平板流动腔中, 在无菌条件下连接到灌流系统, 调节流动腔隙的高度及灌流液速率达到所需切应力(0.2 Pa), 在此基础上, 用T形管连接一个偏心轮使液面在HUVEC表面来回摆动为振荡流, 这种流动方式作用于HUVEC 4 h后, 用细胞免疫化学方法测定EC的NFκB阳性率及阳性强度. 结果: 经振荡流作用后内皮细胞中NFκB阳性率明显增高、强度明显增加、分别为81.52%±10.65%和198.60±32.61(P<0.001), 处于静态EC为对照组, NFκB阳性率和强度分别为28.93%±14.06%和43.40±22.59, 经γTNF-α(5 ng/ml)处理内皮细胞阳性率为99.42%±0.84%, 阳性强度为277.23±23.26(P<0.001). 结论: EC经低切应力振荡流作用后明显增加NFκB的核转位, NFκB的活化能上调粘附分子的表达, 增加了在动脉粥样硬化易发部位单核和内皮细胞的粘附.
-
丙戊酸钠对急性髓系白血病细胞周期相关因子的影响
目的 探讨组蛋白脱乙酰化酶(HDAC)抑制剂丙戊酸钠(VPA)诱导急性髓系白血病细胞周期阻滞的分子学机制.方法 用急性髓系白血病细胞系Kasumi-1细胞皮下接种裸鼠,建立裸鼠移植瘤模型,用VPA处理(VPA治疗组).采用RT-PCR及Western blot方法分析对照组(每天向腹腔内注射生理盐水)和VPA治疗组瘤组织的细胞周期相关调控因子P21 mRNA及E2F-1蛋白的变化;染色质共沉淀(Chip)法检测P21启动子区域组蛋白乙酰化程度;蛋白免疫共沉淀(Co-ip)法检测Rb/E2F-1复合体的改变.结果 VPA治疗组裸鼠移植瘤组织E2F-1蛋白的表达水平明显降低,Rb/E2F-1复合体的水平增加,P21 mRNA水平上调,P21启动子区域组蛋白乙酰化水平增强(P<0.01).结论 VPA作为HDAC抑制剂,能够提高P21启动子区域组蛋白乙酰化程度,使基因转录增强,增加P21基因表达,抑制pRb磷酸化,阻断了E2F的转录激活作用,这可能是VPA诱导细胞周期阻滞发挥抗肿瘤作用的机制之一.
关键词: 丙戊酸钠 急性髓系白血病 细胞周期 细胞周期蛋白激酶抑制因子P21 细胞转录因子 -
抗氧化剂与大肠癌细胞MMP-3表达关系研究
核因子-kB(nuclear factor kappa B,NF-κB) 是一种重要的细胞转录因子,参与多种细胞增殖、凋亡和癌基因等的转录调控.细胞核因子-kB通过上调与侵袭和转移有关的多个基因蛋白表达,从而参与肿瘤的侵袭和转移.因此,通过抑制NF-κB的活化,间接下调相关下游基因蛋白表达,从而抑制肿瘤的侵袭和转移正成为一种新的抗肿瘤治疗方法.本实验旨在探讨大肠癌MMP-3蛋白表达及NF-kB抑制剂二硫氨基甲酸吡啶PDTC(pyrrolidine dithiocarbamate)对大肠癌MMP-3蛋白表达的影响,为大肠癌转移的治疗提供新的理论依据.
-
TCF7L2与糖尿病的关系
1 TCF7L2基因位于人类染色体10q25.3的TCF7L2基因,长度为215.9 kb,包括14个外显子,其表达产物为高迁移率组盒包含的T细胞转录因子-4(TCF-4),是T细胞因子/淋巴细胞增强子结合因子(TCF/LEF)中的一个,是Wnt信号传导通路的重要组成成分,参与细胞增殖与分化的调节[1,2].
-
NF-kB在神经元变性中的作用
细胞核因子kB(Nuclear Factor-kB,NF-kB)是1986年由Sen和Baitirmore首先描述,是一种B细胞核因子,可与免疫球蛋白的轻链(k链)增强子结合并具有结构性转录激活活性,故命名为细胞核因子或称k基因核因子.随着研究的进一步深入,发现NF-kB是一类普遍存在的细胞转录因子,在其它细胞中也有表达[1].它调控着编码细胞因子、生长因子、细胞粘附分子和一些在健康和疾病状态下的急性蛋白因子.