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如何加强手术室消毒隔离工作管理
手术室的消毒隔离灭菌质量是医院感染管理的重要环节,必须把好无菌质量才能确保手术在无菌条件下进行,防止手术切口感染,提高治愈率.现将我们的具体做法介绍如下.
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一次使用性输液器与输液针细菌内毒素检测方法的改进
按标准方法(GB/T4233@2-93)检测一次使用性输液器与输液针上的细菌内毒素,系在无菌条件下将输液(血)器吸人10 ml或适量无热原水,将输液针或头皮针浸泡于10 ml或适量无热原水中,于37℃温箱中保温2 h,而后收集浸提液进行检测.该法制备浸提液所需时间较长,即使如此,输液针与头皮针因孔径小仍难以浸提充分.为此,对该法作如下改良:在无菌条件下,将输液器剪碎,输液针、头皮针截成小段,置于装有30~50 ml无热原水的三角瓶内,用力振荡5 min.取该液检测.
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生肌橡皮膏在植皮中的临床应用
1983~1997年在临床植皮中外敷生肌橡皮膏(天津医院处方)216例,取得了满意效果,特报告如下。1 临床资料 216例病人中男156例,女60例;年龄11~69岁;损伤程度:大部为严重污染的开放伤和皮坏死的感染创面,其中有不同程度的骨质外露者45人。2 治疗方法 严重污染的开放伤或感染性开放骨折,临床上除采取一系列的治疗措施外,创面主要是外敷生肌橡皮膏,待肉芽新鲜平整后行中厚皮片“邮票”状移植。具体操作方法和传统的方法一样。不同的是移植皮片完成后,再把涂有生肌橡皮膏的脱脂棉片敷到创面上,纱布松紧适度包扎即告结束。4~5天换药,即见移植的皮片完全成活,创面大部愈合。因移植皮片间距不等而存在皮片之间尚未完全连接,或个别皮片坏死者,在不需要严格的无菌条件下,再外敷生肌橡皮膏2~3次,创面则完全愈合。创面愈合后,对裸露的骨面,继续外敷生肌橡皮膏,隔日一次,便在骨面上滋生不少点状肉芽组织,大小不等“骨的肉芽岛”,相互融合成片,覆盖骨面,使外露的骨质不坏死。当肉芽平整后,在其中又长出散在的“皮岛”,不用再植皮,创面则迅速愈合。3 治疗结果 216例中有196例皮片完全成活(成活率为98%),创面愈合。10例因术后受压磨擦致部分皮片卷曲坏死,经外敷此药3~5次,创面完全愈合。4 讨论 采用皮片移植外敷生肌橡皮膏的方法,是依据生肌橡皮膏具有促进细胞增生、分化,加速创面的血液循环,增强创面的抗感染作用。所以术前对创面既不需严格的无菌,术后也不需要加压包扎,而且又有效地控制创面感染,所以皮片成活率高,创面愈合快,换药方便简单,病人痛苦小,费用亦低。 总之,皮片移植外敷生肌橡皮膏,不需严格的无菌条件,方法简便,皮片成活率高,创面愈合快,换药无痛苦,费用低廉,病人易接受,可以在各级医疗单位开展,尤其适于基础医疗单位。 (编辑:李为农)
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钢针撬拨内固定治疗跟骨骨折
我们采用透视下经皮钢针撬拨复位后钢针内固定术治疗跟骨骨折获得较好的效果,体会如下.1 临床资料 32例中男23例,女9例;年龄15~59岁.手法复位石膏固定者12例,钢针撬拨复位内固定者20例.2治疗方法腰麻下取仰卧位,常规消毒术野,铺无菌巾.在无菌条件下,用一斯氏针在跟骨外侧于跟骨结节处横行打进跟骨,复位时起牵引作用.
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2.102十二指肠灌流盐酸对犬消化间期和餐后胃十二指肠运动的影响
目的观察十二指肠灌流盐酸对犬消化间期移行性复合运动(MMC)和餐后胃肠收缩的作用.方法健康雄性犬6只,体重15~20 kg.麻醉后无菌条件下进行胃肠测压管、十二指肠造瘘管和颈外静脉插管埋植.用PCPOLYGRAF HR胃肠多功能检测仪记录胃肠收缩,然后用Polygram软件分析.每次实验相隔2~3d,记录观察:1.自发MMC和餐后胃肠运动2.十二指肠腔内灌流盐酸后MMC的变化3.十二指肠腔内灌流盐酸对餐后胃肠运动的作用.
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微囊化施万细胞异种移植对大鼠脊髓损伤修复的影响
在无菌条件下取日本大耳兔坐骨神经,经胰酶消化、低速离心后制成细胞悬液,置RPWⅠ 1640培养基中培养,差速贴壁法分离纯化.倒置显微镜下观察,免疫组织化学检测S-100、NGF,证实为施万细胞.
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“克疣灵”治疗尖锐湿疣的实验研究
尖锐湿疣(CA)为难治性病毒性疾病,缺乏有效的治疗手段,为探讨中药"克疣灵"外搽剂(主要含生药苦参、黄连等)治疗CA的作用机理,我们开展(1) 兔包皮表皮细胞、CA细胞的原代与传代培养:无菌条件下剥离CA组织、雄性大白兔包皮表皮组织,修剪成1mm2大小置含20%胎牛血清的25ml无菌培养瓶,待组织块固定后翻转培养瓶,加RPMI 1640培养液1.5ml 37℃,5% CO2无菌培养箱中静置3~4 h后轻轻翻转,使组织小块浸于培养液中,14 d后待细胞贴满瓶底后传代至第5代.(2) 不同浓度的"克疣灵"对CA细胞、兔包皮表皮细胞增殖的影响:
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抗骨质增生胶囊对大鼠实验性骨折的疗效分析
1 材料与方法1.1 大鼠骨折模型的制作90只健康Wistar大鼠,雌雄各半,9-10个月龄重量,170-200g,平均180.5g.速眠新Ⅱ号1ml/kg臀部肌注麻醉,3min后起效.注意保持呼吸道通畅.在无菌条件下,选左胫骨结节下外侧纵切口长约2cm,切开皮肤皮下,沿胫骨骨膜分离,注意勿伤隐动脉,胫前动脉和相应的神经.用小薄锯横切胫骨,横断点在胫骨结节下1.2cm处.缝合各层皮肤,以石膏绷带做长腿管状固定,7天后拆除.
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应用0.22μm终端滤器预防霉菌入血的研究
目的应用0.22μm终端滤器预防细菌入血已有报告(中华外科杂志1985,23:75).但在霉菌方面的研究,国内尚无报告.完全胃肠外营养支持(TPN)虽然有效,但也有经导管感染的可能性,这种感染的可能来自营养液的污染.终端滤器能否减少经导管霉菌感染,是值得研究的问题.方法24例较长时间TPN支持病例(疗程28~180天).随机分为两组,每组12例,一组应用终端滤器,另一组不用终端滤器,研究组的病人每2~3天更换终端滤器及输液管道.使用后的终端滤器,在洁净台内剖开滤器,在无菌条件下取出滤膜.滤膜均作霉菌培养及扫描电镜检查,瓶内营养液及经滤膜过滤后的营养液均取样作霉菌培养.剪下lcm导管尖作霉菌培养.营养液的制备在层流通风厨内按配方要求配制.输液瓶的进空气管道有过滤器.结果两组病人的疗程相似,对照组平均24±2天,研究组平均27±3天.两组病人均无败血症.两组病人营养液培养霉菌全部为阴性,研究组病人中心静脉导管霉菌培养也均为阴性.但对照组病人的中心静脉导管霉菌培养的阳性率高于研究组(对照组8.2%,研究组0%).研究组56个滤器的滤膜霉菌培养结果:10个培养阳性,阳性率17.9%.电镜观察结果:在56次滤膜扫描电镜的检查中,凡输人营养液超过3000ml以上的滤器,在扫描电镜照片上均可见到不同形态的异物;48次看到微生物形态物,占85%.56个滤器有10个滤器的滤膜霉菌培养阳性.酵母菌3次,占30.0%,硝酸盐阴性杆菌5次占50.0%,黑曲霉菌2次占20.0%.结论静脉输液使用终端过滤器可以阻挡霉菌和异物入血.对营养不良的危重病人,用终端滤器预防微生物入血可能起到重要作用.
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全膝关节置换手术铺单法的改进
在全膝关节置换术中,使用脉冲冲洗枪冲洗创面极易浸湿敷料导致污染,而且在手术中需要保证下肢力线的准确对线与足够的无菌活动区域.为此,我们对敷料的制作及铺单方法做了改进,巧用薄膜手术巾、立体铺单,快捷方便,保证了手术区域的无菌条件.现将具体做法和体会介绍如下.
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自胚囊胎膜及脐血中分离解脲脲原体二例
病例1:患者女,30岁.孕1产0.婚后5年未孕.后因泌尿系感染使用大量抗生素(红霉素、吡哌酸等)后受孕.孕28周后胎儿发育偏小,宫高腹围增长缓慢.宫颈涂片抗解脲脲原体免疫荧光染色阳性.给予加强营养、吸氧(15分钟,2次/日)及舒喘灵(2.4 mg,3次/日)治疗.至37周时宫高腹围不增长,胎儿监护无激惹试验(NST)可疑.遂于38周引产.产后胎儿正常,体重2 500 g.胎盘病理显示局灶较多钙化点,胎盘底板有一较小梗死灶.在无菌条件下取胎盘及胎膜各少量,用空针抽取脐血0.2 ml放入专用液体运送培养基中,立即送检解脲脲原体培养,结果胎膜及脐血培养均阳性.
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HBV慢性感染患者PBMC凋亡与血清病毒载量
目的:研究HBV慢性感染患者血清HBV载量与外周血单个核细胞(PBMC)凋亡的关系.方法:无菌条件下分离42例HBV阳性患者及健康献血员10名外周血单个核细胞(PBMC),在PHA的刺激下培养72 h后收集细胞.采用脱氧核糖核酸末端标记方法(terminal deoxyribonucleotidyl transferase-mediated biotinylated dUTP nick-end labeling,TUNEL)、流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测HBV慢性感染患者PBMC凋亡,并用HBV-PCR定量试剂盒检测血清HBV-DNA的含量.对不同组的PBMC凋亡及血清HBV-DNA含量进行单因素方差分析,并对凋亡情况及血清HBV-DNA含量进行相关性分析.结果:TUNEL法与FCM检测HBV阳性患者PBMC,证实PBMC存在凋亡,慢性乙型肝炎轻度组、中度组与肝硬化组凋亡率明显升高分别为(29.3±9.3%,24.8±10.8%,28.8±5.0%),与健康对照(18.0±6.4%)比较凋亡率显著升高(P<0.05).血清HBV-DNA含量在慢性乙型肝炎轻度组高(14.3±24.8×107cp/L),与其他组比较病毒含量明显增高(P<0.05).HBV慢性感染患者血清病毒载量与其PBMC凋亡率有一定的相关性,r=0.338,P=0.014(P<0.05).结论:HBV慢性感染患者PBMC存在凋亡,其凋亡率较健康组明显增加.慢性乙型肝炎轻度患者血清病毒含量高,其凋亡率亦高.凋亡状况与乙型肝炎的慢性化、机体的免疫状态相关.HBV慢性感染患者PBMC凋亡与其血清病毒载量有相关性.
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骨髓基质细胞在缺血心肌内存活及血管新生作用
目的观察体外扩增骨髓基质细胞(MSCs)在缺血心肌内存活以及其诱导血管新生作用.方法无菌条件下从兔股骨和胫骨抽取抗凝骨髓,采用密度梯度离心获取单个核细胞,接种于DMEM/F-12培养基差速贴壁粘附纯化MSCs,建立体外培养体系,体外扩增传代,收获第二代细胞行4,6二氨基-2-苯茚二酮(DAPI)标记.
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改构型和野生型aFGF对肠缺血-再灌注损伤后肝肾功能的影响
目的:观察肠缺血-再灌注损伤后肝肾功能的变化,并探讨不同类型αFGF对肠缺血-再灌注损伤后肝肾功能的保护.方法:将78只Wistar大鼠分成假手术组(C组)、生理盐水治疗组(R组)、改构型aFGF治疗组(rhF组)、野生型aFGF治疗组(wtF组).再灌注时间分为2h、6h、12h、24h 4个时间点.各组动物于不同时间点在无菌条件下腹主动脉取血5ml,利用全自动生化分析仪检测动物肝肾功能的变化.结果:R组、rhF组、wtF组与C组比较,肝、肾功能都有明显下降,但R组下降更明显;rhF组次之;wtF组的肝肾功能恢复好.组织病理学检查发现:R、rhF、wtF 3组动物均有小肠绒毛脱落、粘膜下层炎细胞浸润等改变,其严重程度与肝肾功能指标水平一致.结论:肠缺血-再灌注损伤导致多脏器功能损伤,野生型、改构型aFGF对其有明显的保护作用.
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覆膜支架腔内治疗白塞氏病致胸主动脉多发假性动脉瘤一例
患者,男性,57岁.因胸背部疼痛、胸闷、心悸半年,突发背部撕裂样疼痛加重一周就诊.查体:巩膜黄斑,口唇发绀,颊黏膜处多个疱疹样破溃,阴囊处有2处破溃,均为2cm×2cm大小.血、尿、粪常规检查无明显异常,胸片、腹部B超、心脏彩超均未查及明显异常,梅毒血清学检查阴性.计算机断层扫描血管造影(computed tomography angiography,CTA)检查显示胸主动脉3个直径为2~4 cm大小的假性动脉瘤,右锁骨下动脉异位发出(开口于左锁骨下动脉以远)(见图1).诊断为胸主动脉假性动脉瘤并于2010年9月1日收入院.入院检查:C反应蛋白为203.7 mg/L(9月3日),212.4 mg/L(9月6日);血沉:98 mm/h;皮肤针刺试验阳性(在无菌条件下用20号针头斜行刺入皮肤,24~48 h后针刺局部出现脓疮或毛囊炎,周边红晕).
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bFGF基因转染对成骨细胞生物学行为的影响
碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是调控成骨细胞增殖和分化的首选生长因子之一,而且还是一种强大的毛细血管增殖刺激剂。但外源性生长因子半衰期短,需反复给药,且价格昂贵[1,2]。我们将bFGF基因由体外转入兔骨膜源成骨细胞,观察了其对成骨细胞生物学的影响,报告如下。1.材料与方法:含有bFGF cDNA的克隆载体puc13-rbFGF由日本Inawashiro博士惠赠,用EcoR I酶切puc13-rbFGF及真核表达载体pcDNA3,用T4DNA连接酶连接后构建pcDNA3-bFGF重组表达质粒并鉴定。无菌条件下取2个月龄新西兰兔之双侧股骨和胫骨骨膜,37℃下用0.25%胰蛋白酶和0.1%I型胶原酶各消化30min及2 h,将分离细胞接种于50ml培养瓶,加入含15%胎牛血清、10-7 M地塞米松、50mg/L维生素C、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素的DMEM培养基,在37℃5%CO2培养箱培养,用钙钴法行碱性磷酸酶(ALP)染色对培养细胞进行鉴定。
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介绍一种微创无菌快速获取可移植脂肪颗粒装置
为确保无菌条件下尽可能快速获取可移植颗粒脂肪,2010年我们自行研制了一种由负压抽脂装置改装的获取可移植脂肪颗粒的装置,效果良好.
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环状胎盘前置一例
患者25岁,孕3产1.因孕37周+3,有不规律宫缩,于2000年9月10日晚8时入院.次日凌晨3时始出现有规律宫缩,每3~4 min持续25 s,胎心正常,左枕前位.肛诊宫口开大1 cm.7:40宫缩进一步加强,中等强度,左枕前位,胎心142次,耻骨联合上可闻及血管杂音.肛诊宫口开大3 cm,先露棘平,入待产室待产.8时10分发现宫缩强度欠佳,给予平衡液500 ml加缩宫素3U静脉滴注,8:40时宫缩35 s/3 min,强度尚可,左枕前位,胎心率148次,耻骨联合上仍可闻及血管杂音.因产程进展缓慢,在宫缩间歇行人工破膜术,无菌条件下阴道检查:宫口开大4 cm,胎先露平棘,胎头无产瘤形成,颅缝无重叠,骨盆腔未见异常,羊膜囊不突,偏厚,破膜后发现羊水少,色清,破膜处四周羊膜外推有阻力,宫口内可扪及2 cm×2 cm的破裂口,四周可触及较粗糙的似胎盘样组织,但无阴道流血,估计胎儿体重3 000 g左右,考虑可经阴道分娩,严密观察产程,继续静脉滴注缩宫素3 U.9:10时顺利分娩一体重2 900 g男婴,Apgar评分1分钟、5分钟均为10分,胎盘以子体面自行娩出,胎膜娩出顺利.?
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良恶性脑膜瘤T淋巴细胞Ag-NORs表达活性的研究
一、材料和方法12例健康人为自愿献血,32例脑膜瘤患者为2000年8月~11月间本院神经外科收住病例依据病理诊断和WHO1993年分类标准,其中良性脑膜瘤16例,恶性脑膜瘤16例.均在无菌条件下取静脉血0.5ml,加到rDNA培养瓶中,进行培养、制片、印染和图片分析(2).主要仪器:KL型肿瘤免疫图像分析系统,北京健而康医疗设备有限公司产品.主要试剂:RPMI-1640培养液GIBCO产品;银染液(5%硝酸银)、固定液及其配套试剂由开隆仪器公司提供.统计学方法:采用SAS6.12统计软件包,进行检验F和q检验.
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低剂量辐射诱导蛋白对紫外线、电离辐射细胞损伤的保护作用
本研究通过直接提取低剂量辐射(LDR)诱导蛋白并观察其对紫外线、电离辐射所造成细胞损伤的保护作用。 一、实验方法 昆明小鼠随机分成非照射组和照射组,分别在20℃~24℃条件下接受0 cGy及10 cGy的γ射线照射,照射后2 h颈椎脱臼致死,无菌条件下取出脾脏,制成单细胞悬液,加蒸馏水以溶解红细胞,离心后按每6×107脾细胞2 ml比例加入含PMSF 4℃0.01 mol/L PBS,在冰浴下超声破碎脾脏细胞,破碎液在高速冷冻离心机上离心,上清液即为小鼠脾脏细胞蛋白提取液及含有LDR诱导蛋白的提取液,4℃冷藏待用。 取小鼠新鲜脾脏,制成RPMI 1640单细胞悬液,培养瓶培养细胞,各培养瓶装含10%小牛血清之RPMI 1640培养基2 ml,脾细胞悬液0.2 ml(脾细胞2×106个),接受UV(照射2 min,实测紫外线辐照强度为460 μW/cm2)或电离辐射损害(4 Gy)后分3组培养,分别加0.01 mol/L PBS、小鼠脾脏细胞蛋白提取液及含有LDR诱导蛋白的提取液0.1 ml,加3H-TdR20 μl,培养6 h、细胞收获、制膜后测放射线强度。