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化学农药对大白兔的眼刺激性
目的我国对于农药的需求量很大,国际农药构成与发展趋势以高效、低毒、与环境相容性好为特点,主张以生物农药为主.近10年有相当的资料显示化学农药中毒对眼刺激症状特征变化报道甚少.
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可逆性输卵管节育器对新西兰兔子宫、输卵管组织病理学影响的研究
目的:通过放置可逆性输卵管节育器,研究放置后子宫、输卵管黏膜的组织病理变化,了解可逆性输卵管节育器对局部组织的影响,判断该器械的可行性和安全性.方法:将6～8月龄体重3.5～4kg的新西兰大白兔32只随机分为4组,受试器械组输卵管内放置新型可逆性节育器;阳性对照组子宫内放置"新爱母"宫内节育器;假手术组只行手术不放置任何器械;阴性对照组不做任何处理.4组在同一环境下进行饲养、称重、取血等操作.手术后1个月,手术剥离新西兰兔子宫、输卵管行HE染色作组织病理学检查.结果:病理切片可见受试器械组、阳性对照组、假手术组子宫内膜上皮,输卵管均见炎细胞侵润,局部组织水肿,子宫腺体基本正常,周围部分固有层水肿;而阴性对照组子宫、输卵管黏膜结构整齐,腺体排列规整,未见炎细胞侵润.结论:输卵管放置节育器对局部组织无明显损伤,各手术组均见炎细胞侵润为手术所致.
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低切应力对动脉粥样硬化血管平滑肌细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响
目的研究低切应力对颈总动脉粥样硬化形成及其血管平滑肌细胞凋亡的影响. 方法应用低切应力颈总动脉粥样硬化模型,采用免疫组织化学方法观察大白兔血管平滑肌细胞的Bcl-2及Bax蛋白表达的变化.结果颈总动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的Bcl-2表达减少、Bax表达增高.结论在低切应力作用下动脉粥样硬化的形成过程中,低切应力与高脂协同作用,可使促进凋亡的因素增强,抑制凋亡的因素减弱,从而调控VSMC的凋亡.
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“克疣灵”治疗尖锐湿疣的实验研究
尖锐湿疣(CA)为难治性病毒性疾病,缺乏有效的治疗手段,为探讨中药"克疣灵"外搽剂(主要含生药苦参、黄连等)治疗CA的作用机理,我们开展(1) 兔包皮表皮细胞、CA细胞的原代与传代培养:无菌条件下剥离CA组织、雄性大白兔包皮表皮组织,修剪成1mm2大小置含20%胎牛血清的25ml无菌培养瓶,待组织块固定后翻转培养瓶,加RPMI 1640培养液1.5ml 37℃,5% CO2无菌培养箱中静置3～4 h后轻轻翻转,使组织小块浸于培养液中,14 d后待细胞贴满瓶底后传代至第5代.(2) 不同浓度的"克疣灵"对CA细胞、兔包皮表皮细胞增殖的影响:
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实验性肝病血清生化学及肝组织脂质过氧化
通过建立大鼠CCl4肝纤维化、酒精营养性肝病以及大白兔肝纤维化和高胆固醇血症肝病模型,比较这些模型血清透明质酸(hyaluanic acid,HA)、脯氨酸肽酶(prolidase,PLD)、脂质、肝功能以及肝组织脂质过氧化物丙二醛(malonaldehyde,MDA)和三酰甘油(triglyceride,TG)含量的改变,探讨不同动物实-验性慢性肝病模型血清和肝组织生化学变化特征[1-6].
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应用纤连蛋白片段建立椎间盘退变动物模型
目的:探讨应用N端30kDa纤连蛋白片段(Fn-f)建立模拟人类椎间盘退变规律的椎间盘退变动物模型的可行性,为椎间盘退变的防治提供实验模型及实验依据.方法:选取雄性6月龄新西兰大白兔28只,麻醉后使用30G微量注射针和微量注射器,在透视引导下经皮将25μl 1.5μmol/L Fn-f(Fn-f组)或25μl磷酸缓冲液(PBS,0.01mol/L,pH值7.2;PBS组)随机分别注射入不同节段的腰椎间盘中心区.分别于注射4、8、12、16周后获取椎间盘,对椎间盘进行组织学检测(HE、Masson三色及番红O染色),并以RT-PCR法对椎间盘聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原的基因表达水平进行分析.结果:与注射PBS椎间盘相比,注射Fn-f椎间盘造模后4周时椎间盘的髓核、纤维环结构以及胞外基质蛋白聚糖等无明显差别；8周时髓核细胞数量减少、细胞簇状分布,被胞外基质分隔开来,纤维环层状结构排列部分出现紊乱,蛋白聚糖染色变浅；12和16周时髓核细胞数量明显减少,细胞变圆,呈明显的成簇聚集分布,纤维环排列明显不规整,各层间出现裂隙,甚至断裂,蛋白聚糖染色明显变浅,甚至部分未见染色.Fn-f组椎间盘聚集蛋白聚糖mRNA表达水平在8、12和16周3个时间点均明显低于PBS组(P＜0.05)；Ⅱ型胶原mRNA表达水平在12和16周时明显低于PBS对照组(P＜0.05).结论:透视引导下兔椎间盘内注射N端30kDa Fn-f可诱导椎间盘产生渐进性退行性病变,该法建立的动物模型可作为研究椎间盘退变的发病机制及防治的实验模板.
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腹腔内留置钛夹转归的实验研究
在腹腔镜腹部手术中,留置腹腔内钛夹的数量明显增多,为了探讨腹腔内留置钛夹的不良反应,我们用新西兰纯种大白兔进行实验,现报告如下.
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碘仿混合物绷带填塞治疗肝外伤时可能的局部副作用的实验观察
本实验通过对大白兔肝外伤术前、术后肝功能变化的对比研究,探讨碘仿混合物绷带填塞对肝功能的影响及其可能作用机制;同时通过对肝脏组织常规病理及免疫组织化学研究,探讨碘仿混合物对肝细胞的直接作用.
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骨髓移植诱导大白兔特异性免疫耐受模型的建立
目的通过供体与受体的骨髓移植来诱导受体对供体的特异性免疫耐受.方法30只雄性和30只雌性新西兰大白兔分别作为供者和受者,随机配对,将30对大白兔再随机分为5组,即无处理对照组、单纯照射组、单纯骨髓移植(BMT)组、实验组(照射+BMT)和无关皮肤供体对照组,每组6对.受者给予7Gy的全身照射(TBI),24小时后耳缘静脉输注骨髓单个核细胞,5天后再次回输相同供者的骨髓单个核细胞,两次总的细胞数量为1～1.5×108/kg,在第二次回输细胞的同时,移植皮肤.观察皮肤移植存活时间、对第三方皮肤的排斥反应及对供体的单向混合淋巴细胞反应,并用多聚酶链式反应(PCR)检测嵌合体的形成.结果单纯照射和骨髓移植不能延长移植物的存活时间,也没有形成供受者混合嵌合;实验组皮肤移植物存活时间(45.83±3.97 d)比无处理对照组(10.83±0.75)、单纯照射组(12.5±1.0488)、单纯骨髓移植组(11.33±0.8165)、无关皮肤供体对照组(12.17±1.169)明显延长(P＜0.01).结论对大白兔模型,采用全身照射加大剂量骨髓移植的方法,可形成较长时间的混合嵌合,并获得一定程度的特异性免疫耐受.
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兔心脏单次照射损伤的检测与观察
目的 观察新西兰大白兔心脏单次照射一定剂量后心脏损伤各指标的变化,并探讨使用乏氧显像剂99Tcm-HL91和凋亡显像剂99Tcm-Annexin V的心脏SPECT检测放射性心脏损伤(RIHD)的可行性.方法 取2.0～3.0 kg兔龄4个月的新西兰大白兔24只,CT模拟定位,TPS制定3DCRT计划.实验分为临床相关剂量组(16只)和高剂量组(8只),前者为0、10、14、18 Gy,只数分别为1、2、6、7只;后者为22、30、40、54、60、80 Gy,只数分别为3、1、1、1、1、1只.照射前后进行血清心肌钙蛋白(cTnI)、肌酸磷酸激酶(CKMB)检测,心电图和心脏SPECT检查(灌注显像剂包括99Tcm-MIBI,99Tcm-HL91和99Tem-Annexin V).照射后观察满5个月或死亡动物,解剖心脏行常规病理HE染色检测.结果 临床相关剂量组均无死于RHID者,Stewart心脏损伤评价仅1只为中等损伤.高剂量组2只死于RIHD(死于照射后74、124 d),心脏损伤评价2只严重损伤,1只明显损伤,5只中等损伤.心电图检查与心脏解剖病理结果一致性较好(2=0.08,P=0.771).血清cTnI值从照射后12 h开始上升,达高峰值后持续至照射后4个月,以后逐渐下降.CKMB值照射后的变化不规则.99Tcm-MIBI的SPECT显像照射前和照射后自身比较,心肌灌注均有不同程度减少,减少程度与剂量未显示相关性.在照射后心脏中未发现SPECT试剂(99Tcm-HL91,99Tcm-Annexin V)的浓聚.结论 大白兔心脏单次照射10～18 Gy(近似临床常规分割照射30-70 Gy)后,观察满5个月,其心脏急性放射性损伤并不明显.胸部肿瘤放疗时心脏多为部分照射,分割剂量也可能较低,实验结果提示产生急性放射性损伤可能性更小.单次剂量过高(如＞22 Gy近似临床常规分割照射110 Gy)时仍可能出现严重的心血管事件(如心肌梗塞、心衰等).SPECT试剂99Tcm-HL91和99Tcm-Annexin V检测心脏急性放射性损伤的意义不大.
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放射性肺损伤大白兔模型的构建及多层螺旋CT的评价
目的 研究大白兔放射性肺损伤影像学模型的制作方法,结合病理学改变评价多层螺旋CT(MSCT)对放射性肺损伤的早期诊断价值.方法 40只新西兰大白兔随机分为照射组和对照组,分别以30、40、50 Gy剂量行右肺2/3面积照射建立肺损伤模型,照射后第2、4、6、8周分别行MSCT检查并作pulmo曲线分析.结果 动物模型可安全建立,MSCT能够清晰显示大白兔放射性肺损伤毛玻璃改变、斑片状及纤维素条影.随着照射剂量的增大,肺泡腔厚度增厚明显,尤以50 Gy照射损伤为明显与对照组比较.各时间点分别均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).且各时间点右肺密度显著高于左肺.结论 大白兔右肺一次30、40、50 Gy照射可以制作放射性肺损伤的急性模型,且50 Gy照射损伤为明显.MSCT可以早期诊断放射性肺损伤.
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高脂饮食对大白兔DNA甲基化的影响及其与动脉粥样硬化的关系
DNA甲基化水平系真核细胞基因表达多层次调控机制中的重要环节.DNA甲基化作用和基因功能密切相关.整体甲基化水平的降低可使基因的调控能力下降.现认为,动脉粥样硬化(As)是一种以血管内皮细胞和平滑肌细胞增生为主要病变的疾病,与基因过度表达有关.据文献报道,在As斑块部位,伴随平滑肌细胞增生的同时,血管内皮生长因子(VEGF)基因、c-kit癌基因、H-ras癌基因等的表达也增高.为探讨DNA甲基化与As的关系,本研究随机将日本大耳兔(2个月龄、体重2.5～3.0 kg)分为正常对照组和高脂饮食组.
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元亨强心卡及配贴防治心血管病机理实验研究与临床疗效观察综合报告
为探讨元亨强心卡及配贴（卡及贴）对心血管病的作用机理和临床疗效，应用大白兔实验研究卡及配贴在生理学、形态学、生化指标以及体外培养的人冠状动脉平滑肌细胞、鼠成纤维细胞存活的对照观察；
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狂犬病疫苗新观察
当前狂犬病在我国的流行趋势日益严峻.人体被感染后,其潜伏期平均为2～8周,但不在此限的并非少见.另据罕见报告,某幼童被家养的大白兔咬伤后亦患此病.
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叠加法骨性关节炎模型软骨MMP-3、TIMP-1的表达
骨性关节炎(OA)是临床上常见的关节疾病,是引起老年人关节功能丧失的主要原因.前期的实验表明[1]:结扎股静脉引起骨内压升高,切断腓肠肌致使局部应力改变的叠加作用,二种作用制作的动物模型,能充分反映OA软骨的退变过程,是一个研究软骨退变得成功模型.研究应用此动物模型检测MMP -3、TIMP-1等因子在OA发病中的作用.寻找OA的早期检测指标.
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不同剂量神经生长因子促进骨折愈合的实验研究
神经生长因子(nerve growth factor,NGF)是Levi-Montalcini于1952年发现的生长因子,是一种能够促进神经细胞生长的生物活性复合蛋白[1].NGF在神经系统中调节中枢和外周神经元生长、发育、分化以及维持正常存活的作用已得到公认.近十余年国内外已广泛用于临床治疗神经系统的疾病.对于NGF非神经系统的作用现仍在积极探索之中,1995年Schuijers等进行的动物实验提示局部注射NGF可促进骨折愈合.本实验研究将应用不同剂量神经生长因子探讨其临床意义.
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土牛膝治疗急性咽喉炎的实验研究
目的 观察土牛膝提取物对大白兔急性咽喉炎的治疗作用.方法 将18只大耳白黑眼兔(WHBE)随机分为3组,分别给予相当于临床用药量的10倍、20倍的土牛膝提取液及等体积蒸馏水,连续灌胃7 d,然后建立家兔声带炎症模型,观察、测试各组家兔炎症发生情况.结果 各土牛膝剂量组急性咽喉炎好转度好于模型组,且呈明显量效关系.结论 土牛膝提取物可以显著抑制家兔急性咽喉炎的症状.
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不同浓度地塞米松在体外定向诱导分化兔骨髓间充质干细胞为成骨细胞的实验研究
目的 探讨兔骨髓间充质干细胞(MSCs)体外定向诱导分化为成骨细胞所需的地塞米松的佳浓度.方法 抽取兔骨髓,采用全骨髓贴壁培养法体外培养,贴壁细胞进行传代.取第3代细胞,随机分为5组,在培养基中添加成骨分化诱导剂β-甘油磷酸钠、L-抗坏血酸,5组添加的地塞米松的浓度分别为1×10-6mol/L、1×10-7mol/L、1×10-8mol/L、1×10-9mol/L、1×10-10mol/L.培养10d后,在倒置显微镜观察细胞形态,计算细胞浓度,采用5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐(BCIP)/氯化硝基四氮唑蓝(NBT)底物显色试剂检测碱性磷酸酶(ALP),茜素红染色检测钙结节.结果 较高浓度(1×10-8mol/L、1×10-7mol/L、1×10-6mol/L)的地塞米松相对于较低浓度(1×10-9mol/L、1×10-10mol/L)的地塞米松可显著增加ALP表达(P均<0.05),并可增加钙结节的形成;1×10-9mol/L及其以下浓度的地塞米松对细胞增殖无明显影响(P均>0.05),1×10-7mol/L以上浓度的地塞米松可明显抑制细胞的增殖(P<0.01).结论 地塞米松在体外定向诱导分化兔骨髓间充质干细胞为成骨细胞,佳的浓度为1×10-8mol/L.
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富血小板血浆对兔烫伤创面愈合的实验研究
目的:应用富血小板血浆(PRP)治疗兔烫伤创面的动物模型,研究兔自体PRP治疗烫伤创面的效果.方法:参照Sonnleither法制作PRP,全过程遵循无菌操作要求.大白兔随机分为实验组和控制组,每组12只,并造两侧为深Ⅱ度创面的烫伤模型.实验组使用PRP,控制组使用磺胺嘧啶银(SD-Ag).利用SPSS17.0统计软件检测,以-x±s表达实验数据,P＜0.05为差异有统计学意义.结果:创面面积随时间延长而逐渐缩小,以实验组创面愈合尤为显著.7d实验组肉芽组织灶更显著；10d实验组较控制组毛细血管量及成纤维细胞更丰富,创缘上皮增殖更显著.14 d实验组显示毛细血管数少而大部分成纤维细胞转化为纤维细胞,大量新生表皮细胞覆盖伤口.两组愈合面积均数之差均有统计学意义(P＜0.05).结论:富血小板血浆可以促进大白兔烫伤创面愈合,愈合创面质软,无瘢痕形成.
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骨髓间充质干细胞肝中叶注射移植治疗新西兰大白兔肝脏衰竭
背景:肝细胞移植作为治疗肝脏衰竭的一种有效方法在各种动物模型及临床应用中得到广泛证实,但供体短缺及移植肝细胞增殖困难等问题严重困扰着肝细胞移植的发展.研究表明骨髓间充质干细胞具有向肝细胞及胆管上皮细胞双向分化的潜能,而且具有强大的增殖能力,它作为一种新的细胞来源为解决上述难题提供了新思路.目的:以肝中叶注射移植骨髓间充质干细胞治疗新西兰在白兔肝脏衰竭,验证其效果.方法:健康雄性新西兰大白兔给予D氨基半乳糖24 h后,移植组于肝中叶注射骨髓间充质干细胞悬液3 mL(1x109L-1),对照组注射相同体积不含骨髓间充质干细胞的培养液.移植后48 h、72 h、1周、4周取外周血测定谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性,移植后4周取肝脏做病理检测.结果与结论:移植后新西兰大白兔肝功能指标明显下降,存第4周时移植组谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性明显低于对照组(P＜0.05).移植后4周对照组表现为肝素紊乱.肝细胞肿胀变性、灶性及大片坏死,伴出血及炎性细胞浸润.移植组显示肝小叶结构可辨认,点状坏死肝细胞间再生肝细胞较前增多,汇管区、中央静脉及坏死灶周围可见核/浆比例较大的小细胞,并向肝组织内延伸,可见灶性增生.
