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丹参素对高脂血症大鼠脂代谢调节机制研究
目的:探讨丹参素对高脂血症大鼠脂代谢的影响.方法:选用清洁级雄性SD大鼠60只,随机选取12只为基础对照组,饲以普通饲料,其余大鼠饲以高脂饲料,造模成功后随机分为高脂对照组和注射低、中、高(10,20,40 mg·kg-1·d-1)剂量丹参素溶液(溶解于生理盐水)的试验组,2个对照组腹腔注射等体积生理盐水,每天腹腔注射1次,连续30 d.检测血清TG,TC,HDL-C及LDL-C含量及肝脏ACCl,FAS,HMGR,CPT-I的mRNA表达水平.结果:注射丹参素后,大鼠血清中TG,TC,LDL-C含量降低,肝脏FAS和HMGR的mRNA表达水平显著降低.结论:丹参素通过降低TC含量,抑制LDL-C水平,及时清扫多余的胆固醇,有效调节高脂血症大鼠血脂水平;通过降低FAS mRNA表达减少脂肪酸的合成,抑制HMGR mRNA表达来减少内源性胆固醇的合成.
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RUNX3基因在膀胱移行细胞癌组织中转录水平的定量研究
我们应用实时荧光定量RT~PCR技术检测膀胱移行细胞癌(BTCC)组织标本中RUNX3基因的mRNA表达水平,探讨其临床意义.
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早搏灵胶囊对快速性心律失常家兔模型心肌L型钙通道mRNA表达的影响
目的:通过观察快速性心律失常家兔模型心电图变化和心肌组织L型钙通道αlC亚基mRNA的表达水平,探讨早搏灵胶囊防治心律失常的作用机制.方法:将新西兰家兔随机分为4组:生理盐水组、模型组、早搏灵组、维拉帕米对照组,每组6只.采用静脉注射乌头碱的方法复制快速性心律失常的家兔模型,观察记录每组家兔室性心律失常出现时间,并采用RT- PCR技术测定家兔心肌组织L型钙通道mRNA表达水平.结果:早搏灵组、维拉帕米组比模型组出现室性心律失常的时间均延迟,早搏灵组更明显.模型组与生理盐水组相比,心肌组织L型钙通道mRNA表达明显上调;早搏灵组、维拉帕米组与模型组比较均明显下调;早搏灵组与维拉帕米相比较无显著差异.结论:早搏灵胶囊能够干预乌头碱导致的心肌组织L型钙通道mRNA表达水平上调,可明显延缓室性心律失常的发生.
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原发性肝癌患者外周血甲胎蛋白mRNA表达水平及其意义
甲胎蛋白(AFP)是肝癌发生、发展过程中表达的蛋白质,长期以来被认为是标志性蛋白而用于肝癌的早期诊断;但灵敏度和特异性均不够理想,尤其是它不能反映肝癌有无转移,而及早发现微小病灶对于原发性肝癌(PHC)患者治疗具有重要意义.近年来国外研究者用高敏感的反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术在肿瘤患者的循环血液中查找癌细胞,用于早期发现PHC患者外周血中是否存在肝癌细胞[1].这对于肝癌的早期诊断、预防及治疗有着重要的指导意义.本研究应用实时荧光定量(FQ -PCR)方法检测各种慢性肝病患者外周血中甲胎蛋白mRNA表达水平,探讨其在肝癌血源性播散及肝癌早期诊断中的临床意义.
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T-STAR在胃癌组织中的表达及临床意义
端粒酶与胃癌的发生、发展有十分密切的联系,目前研究认为端粒酶逆转录酶(hTERT)是人类端粒酶活性的主要调控亚单位,其mRNA表达水平随着端粒酶活性增加而增加,hTERT一旦表达,就和其他亚单位一起组装成具有高活性的端粒酶全酶[1-6].
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基因mRNA表达水平在晚期胃癌化疗敏感性预测中的应用
目的 探索切除修复交叉互补基因1(ERCC1)、胸苷酸合成酶(TS)、β-微管蛋白和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1A1(UGT1A1)检测的对于胃癌化疗敏感性的关系.方法 将120例进展期或术后复发的胃癌患者随机分为2组,对照组采用FOLFOX4方案、FOLFIRI方案或者DCF方案,试验组进行基因 mRNA表达水平检测,并根据检测结果针对性地选择上述3种方案.观察2组患者的近期疗效和生活质量.结果 2组患者均接受2个周期以上的化疗.试验组有效率及生活质量改善率均显著高于对照组(P<0.05).结论 ERCC1、TS、β-微管蛋白和UGT1A1的表达水平对于晚期胃癌化疗敏感性的预测有着重要的意义,值得临床进一步研究.
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RTP801基因在结直肠癌和结直肠腺瘤中的表达及其临床意义
RTP801(hypoxia-inducible factor 1-responsive gene,RTP801)初是作为低氧诱导因子-1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)的应答基因被发现的,缺氧可诱导其表达急剧升高.近我们通过研究发现,RTP80l mRNA的表达在结直肠癌(colorectal calncer,CRC)及其癌前病变--结直肠腺瘤(colorectal adenoma,CRA)组织中较正常结直肠黏膜显著升高,其在mRNA表达水平的异常升高与结直肠腺瘤-癌序列有一定的相关性[1].但是,关于该基因在大肠腺瘤-癌序列中的蛋白质表达水平的研究尚未见报道.本研究首次采用免疫组织化学SP法检测CRC和CRA中RTP801蛋白的表达状况,并对RTP801蛋白异常表达与各临床病理参数的相关性展开了分析,探讨RTP801基因在结直肠癌发生及演进过程中的可能作用机制.
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人和鼠下尿路组织中5型磷酸二酯酶的表达以及他达拉非对自发高血压大鼠的前列腺氧供的影响研究
先前的研究表明5型磷酸二酯酶在前列腺血管床的内皮和平滑肌细胞中显著高表达,这一现象可能导致PDE5抑制剂对前列腺的血流产生调控.本研究旨在研究PDE5在人和鼠的包括脉管系统在内的下尿路组织(LUT)中的表达,并评估以他达拉非为代表的PDE5抑制剂对前列腺血流的影响.本研究作者采用的主要研究指标是:人膀胱-输精管动脉(分支于膀胱和前列腺的主要供血动脉膀胱下动脉)的PDE5的表达情况和活性.本研究的他达拉非对前列腺氧供的影响的研究在以泌尿生殖道缺血/缺氧为特征的自发高血压大鼠(SHR)模型中进行.使用定量逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学法对组织中的PDE5的表达进行检测.SHR分别接受他达拉非[2 mg/(kg·d)]治疗1、7或者28 d后,将其与为治疗的SHR和为干预的Wistar-Kyoto (WKY)鼠进行比较.前列腺氧供情况使用缺氧探针法和缺氧标志物(缺氧诱导因子-1a[ HIF1a]和8型内皮缩血管肽1[ETB])免疫荧光法进行检测.研究结果显示人膀胱输精管动脉高表达PDE5,表达量与阴茎海绵体类似并且定位于内皮和平滑肌层.在该动脉中,他达拉非抑制循环鸟苷一磷酸的分解(半数大抑制浓度(IC50)和海绵体一样除以低浓度水平),增加硝普钠的输血管反应.SHR前列腺组织显著高表达缺氧指标(缺氧探针免疫阳性率),HIF-1A和ETB,而他达拉非在所有时间点均使氧供水平恢到WKY水平.HIF-Ia靶基因的mRNA表达水平和BCL2/腺病毒E1B 19 kDa相互蛋白在SHR中显著升高,并且可被他达拉非部分恢复到WKY水平.基于此结果,作者认为人膀胱输精管动脉高活性高表达PDE5,可以在体内被他达拉非抑制.在SHR中,他达拉非增加前列腺的氧供水平,这有可能是PDE5抑制剂具有改善下尿路症状的作用的原因.
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白癜风患者外周血白介素17和孤独核受体的表达
目的 探讨Thl7细胞在白癜风免疫发病机制中的作用.方法 采用双抗体夹心ELISA法检测白癜风患者进展期、稳定期和正常人外周血血清中白介素17(IL-17)水平;采用实时荧光定量RT-PCR方法检测外周血单一核细胞中孤独核受体(RORγt)mRNA表达水平,并分析其与疾病活动的相关性.结果 进展期与稳定期白癜风外周血中IL-17、RORγt表达水平与正常人对照组相比显著升高(P<0.01).结论 Th17细胞可能与白癜风的发病机制密切相关.
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增生性瘢痕中mu型、kappa型和delta型阿片肽受体mRNA表达水平与痛痒的关系
我们采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time fluorescence quantitative-PCR)技术检测增生性瘢痕患者3种阿片肽受体( MOR、KOR、DOR)的表达水平,并分析其临床意义.
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邻苯二甲酸二丁酯致尿道下裂雄性仔鼠生殖结节发育异常的研究
我们通过对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)孕鼠染毒后子代尿道下裂雄性大鼠生殖结节进行病理学检查,并应用定时定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对生殖结节中Sonic hedgehog(Shh)信号通路中的关键因子:Shh、骨形态发生蛋白4(Bmp4)和受体补片1(Ptch1)的mRNA表达水平进行检测,从病理学和分子水平探讨DBP致尿道下裂的作用机制.
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细胞色素P450IIE1mRNA表达水平在酒精性肝病发病机制中的作用研究
目的:探讨细胞色素P450IIE1(CYPIIE1)mRNA表达水平和东北地区酒精性肝病发病机制之间的关系.方法:分别收集353名酒精性肝病患者、360名健康对照者的外周血2mL,采用实时聚合酶链反应(RT-PCR)用于检测CYPIIE1在酒精性肝病患者及健康对照人群中mRNA的表达水平.结果:在酒精性肝病患者中CYPIIE1mRNA水平(10.21%)明显高于对照组(2.05%)(P<0.001).结论:东北地区酒精性肝病患者与健康时照组相比CYPIIE1mRNA表达水平明显升高,该蛋白活性增加,致使体内氧自由基增加及线粒体损伤加剧.从而使肝脏发生炎症、坏死乃至纤维化,导致了酒精性肝病的发生和发展.
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ERCC1、TS基因的表达水平与晚期胃癌化疗的相关性研究
目的 探讨晚期胃癌组织中切除修复交叉互补基因1 (ERCC1)、胸苷酸合成酶(TS)基因的表达水平与胃癌患者化疗的相关程度.方法 54例晚期胃癌患者均接受2个周期以上的FOLFOX6方案化疗,并可评估疗效.用分支DNA-液相蕊片法检测其ERCC1、TSmRNA的表达水平.结果 全组化疗有效率为48.2%,ERCC1、TS单个高表达者化疗有效率分别为36.8%、28.0%,单个低表达者近期化疗有效率分别为75.0%、62.1%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05).ERCC1、TS均为低表达者近期化疗有效率为85.7%,均高表达者近期化疗有效率为18.8%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 胃癌组织中ERCC1、TS mRNA表达水平与应用FOLFOX6方案治疗晚期胃癌的疗效之间存在一定相关性.
关键词: 切除修复交叉互补基因1 胸苷酸合成酶 mRNA表达水平 胃癌 化疗 -
荧光实时逆转录PCR定量研究进展
荧光实时逆转录PCR广泛应用于稳态mRNA水平的定量,并且它已经成为基础研究、分子医学和生物技术的一种必不可少的实验工具.用此技术定量具有范围宽、敏感性高、精确度高,无PCR后处理步骤,避免了交叉污染,且产出率高,可以进行多重检测等特点.然而要成功地应用该技术并不是一件容易的事.现对方法学建立、扩增效率以及标准化等方面作一综述.
关键词: 荧光实时逆转录PCR mRNA表达水平 扩增效率 标准化 -
(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯对小鼠皮炎湿疹的治疗作用初步研究
目的 研究(E)-苯乙基-3-(3,5-二羟基-4-异丙基苯基)丙烯酸酯(THCA354)凝胶剂对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的治疗作用及机制.方法 通过对小鼠耳廓涂抹2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导建立ACD模型,测定给予DNFB刺激后24 h的耳肿胀厚度和对小鼠耳组织进行病理组织形态学分析来共同评价THCA354凝胶剂的抗过敏作用效果;采用ELISA法和RT-PCR定量检测小鼠耳组织中炎症细胞因子含量及mRNA表达水平,初步阐明其作用机制.结果 与阴性对照组相比,局部涂抹THCA354的小鼠耳肿胀程度、淋巴细胞浸润程度、耳组织匀浆中促炎细胞因子含量和mRNA表达水平均显著降低,抗炎细胞因子的含量和mRNA表达水平均显著升高.结论 THCA354可能是通过改变炎症细胞因子的分泌和mRNA表达水平,调节T细胞亚群的平衡从而发挥抗过敏作用.
关键词: THCA354凝胶剂 ACD模型 炎症细胞因子 mRNA表达水平 -
新疆维吾尔族肥胖胆结石患者脂联素水平测定
脂肪组织是功能活跃的内分泌器官,其所分泌的脂联素(adiponectin,APN)在体脂变化、糖、脂代谢、抗动脉粥样硬化中发挥有益的作用[1].本研究选取胆结石患病率较高的维吾尔族人群为研究对象,利用半定量RT-PCR技术检测不同部位脂肪组织脂联素mRNA表达水平,并探讨其是否是胆结石发病影响因素之一.