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乌灵菌粉对慢性癫痫大鼠诱发记忆再现障碍的作用机制
目的:研究乌灵菌粉对慢性癫痫大鼠记忆再现障碍的作用及其可能的机制.方法:将SD大鼠随机分为4组:戊四唑点燃模型组(模型对照组),低剂量乌灵菌粉(0.3g· kg-1,ig)组,高剂量乌灵菌粉(0.6g· kg-1,ig)组和空白对照组.大鼠在放射状八臂(四臂放食物)迷宫训练成功后,隔日腹腔注射亚惊厥剂量(35 mg· kg-1)的戊四唑共12次.乌灵菌粉在每次注射戊四唑前0.5h灌胃.完全点燃后在同一迷宫中测记忆的再现过程.应用Western免疫印记法测定磷酸化的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(p-CERB)的水平,脑病理切片采用HE染色,在光学显微镜下计数海马完整神经元.结果:慢性癫痫大鼠在八臂迷宫中的参考记忆和工作记忆再现能力均受损,乌灵菌粉表现出改善作用.慢性癫痫导致大鼠海马p-CREB表达下降,海马CA1区和CA3区神经元破坏,乌灵菌粉逆转了海马的p-CERB表达水平的下降,保护了海马的神经元.结论:乌灵菌粉能改善癫痫诱发的记忆再现障碍,其作用可能与提高脑内p-CERB的表达及对海马神经元的保护有关.
关键词： 乌灵菌粉 癫痫 戊四唑 记忆障碍 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CERB) -
HPLC测定乌灵菌粉中腺苷含量
乌灵菌粉系真菌乌灵参Xylaria sp经深层发酵而得的菌丝体干燥粉末.据四川中药志[1]记载,乌灵参具有利尿,补心神,治失眠吐血及产后失血等药用价值,腺苷是乌灵菌粉的主要成分之一.本文参考文献报道[2,3],采用HPLC法,测定乌灵菌粉中的腺苷含量,方法简便,结果准确,可用于该药的含量测定.
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应用基因芯片技术探讨乌灵菌粉的抗抑郁机制
目的 采用基因芯片技术探讨乌灵菌粉的抗抑郁作用机制.方法 以慢性轻度应激(CMS)致抑郁模型小鼠为观察对象,提取对照组、CMS组、乌灵菌粉组、氟西汀治疗组大脑皮层的总RNA,应用Clontech公司的小鼠1.2表达谱芯片进行各组间1176个基因的比较.结果 基因芯片比较发现,CMS组小鼠与对照组相比皮层有130个基因发生改变,其中上调116个,下调14个;与CMS组比较,乌灵菌粉组有85个基因发生改变,其中上调34个,下调51个;氟西汀组133个基因发生改变,上调35个,下调98个.这些基因涉及受体活性、蛋白激酶、炎性因子、转铁蛋白、神经发生等各个方面.结论 CMS致抑郁模型小鼠脑内多种功能基因的表达出现亢奋或低下,而通过乌灵菌粉和氟西汀干预后可使多个基因表达趋向正常水平.
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精神性眩晕临床诊疗初探
目的：研究轻中症精神性眩晕的临床评价与干预方法。方法选取精神性眩晕患者37例，平均年龄46.1（20～68）岁，采用症状自评量表（Self-reporting Inventory），即90项症状清单（Symptom Checklist-90，SCL-90）、抑郁自评量表(Self-rating Depression Scale，SDS)和焦虑自评量表(Self-rating Anxiety Scale，SAS)评定为轻中度异常。对患者进行乌灵菌粉药物干预和心理干预，持续28天；安排2次随访（基线和第28天），随访中评估眩晕的症状（包括严重程度、持续时间及发作频率、伴随症状等）并进行精神心理评价。结果①原发性精神性眩晕17例，继发性精神性眩晕20例。原发性精神性眩晕主要表现为不稳感和漂浮感，而旋转感、倾倒感和站立困难均为继发性精神性眩晕；②治疗后，患者不稳感和漂浮感改善，与治疗前比较差别显著（P<0.05）；③治疗前，SCL-90躯体化障碍患者占91.9%（34/37），焦虑自评异常患者占91.9%（34/37），抑郁自评异常患者占56.8%（21/37）；心理评价为轻度异常的占86.5%（32/37），中度异常占13.5%（5/37）；治疗后躯体化障碍、焦虑和抑郁的异常率都有下降，且差别显著（P<0.05）。结论乌灵菌粉制剂可改善轻中症的精神性眩晕症状,对出现的轻中度焦虑和抑郁状态、躯体症状（本文主要为眩晕）有一定疗效；必要的心理干预有助于建立医患互信，实现良好的医嘱依从性。
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乌灵菌粉对脑卒中后抑郁大鼠海马区单胺类神经递质及行为学改变的影响
目的:观察乌灵菌粉对脑卒中后抑郁(PSD)大鼠的行为学改变及脑内单胺类神经递质的影响.方法:采用双侧颈总动脉永久性结扎后并给予行为限制的方法制作PSD大鼠模型,采用敞箱试验(open-field)观察大鼠行为学变化,并用高效液相法检测大鼠海马组织中4种单胺类神经递质去甲肾上腺素(L-NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)和5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)的含量,对比观察了乌灵菌粉组(0.3 g·kg-1,qd,ig,28 d)、盐酸氟西汀组(0.75 mg·kg-1,qd,ig,28 d)、模型组及假手术组的变化.结果:与假手术组比较,模型组行为学能力下降,脑内NE,DA,5-HT和5-HIAA下降(P＜0.05);与模型组比较,乌灵菌粉组及盐酸氟西汀组行为学能力改善,脑内5-HT和5-HIAA水平上升(P＜0.05),而两组间比较统计学差异不明显(P＞0.05).结论:乌灵菌粉可改善脑卒中后抑郁大鼠的行为学改变,其作用可能通过调节脑内5-HT水平.
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乌灵菌粉中总黄酮含量测定
目的：建立乌灵菌粉中总黄酮含量的测定方法。方法采用紫外-可见分光光度法，通过紫外扫描确定大吸收波长，在大波长处以芦丁为对照品对总黄酮含量进行测定。结果采用以亚硝酸钠-硝酸铝显色的可见分光光度法在510nm 处测定乌灵菌粉中总黄酮含量，芦丁对照品在5.5～55μg?ml-1范围内线性关系良好，线性回归方程：y=0.013x-0.0176（r=0.9997），平均回收率为99.430%（n=6），RSD%为1.268%。结论采用以亚硝酸钠-硝酸铝显色的可见分光光度法简便，准确可靠，可作为乌灵菌粉中总黄酮的含量测定方法。
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HPLC-ELSD法测定乌灵菌粉中甘露醇的含量
目的 建立HPLC-ELSD法测定乌灵菌粉中甘露醇的含量.方法 采用氨基柱(Ultimate XB-NH2,4.6mm×250mm,5μm),柱温:25℃,进样量:20μL,以乙腈-水(84∶16)为流动相洗脱,流速:1.0mL·min-1;ELSD漂移管温度:95℃,氮气压力:30 psi.结果 甘露醇在332～1992μg·mL-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9992,n=6)；方法回收率为98.86％,RSD为1.01％.结论 该方法准确度高、专属性强、重复性好,可用于乌灵菌粉的质量控制.
关键词： 乌灵菌粉 甘露醇 高效液相色谱-蒸发光散射检测法 含量测定 -
乌灵菌粉对慢性充血性心力衰竭伴抑郁患者心脏功能的影响
慢性充血性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)往往是各种心脏病终末期的表现,具有较高的致残率和病死率.由于病程长、反复发作、逐渐加重、家庭经济负担重,许多患者经常出现不同程度的抑郁症状,严重影响患者的生活质量,加重病情.乌灵菌粉是目前用于治疗抑郁症的中药制剂.本研究旨在探讨乌灵菌粉对慢性充血性心衰患者抑郁症状及心脏功能的影响.
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乌灵菌粉水提物对MCAO小鼠海马结构及BDNF,GABA水平的影响
目的:探讨鸟灵菌粉(xylaria nigripes,XN)水提物对脑缺血再灌注模型小鼠海马形态和高分子量神经丝蛋白(neurofilament high molecular weight,NF-H)表达以及脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和γ氨基丁酸(γ-arninobutyric acid,GABA)的影响.方法:将32只昆明小鼠随机分为对照组(sham)、模型组(MCAO)和乌灵菌粉水提物低、高剂量组,即XN(L)和XN(H).sham组进行假手术(皮肤切开,分离颈动脉),模型组(MCAO)及乌灵菌粉组进行大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO),sham组和MCAO组术后即刻腹腔注射生理盐水,乌灵菌粉组则注射不同剂量的乌灵菌粉水提物(0.3 g/kg和0.6 g/kg),术后24 h,通过尼氏染色、免疫组化染色和酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,Elisa)分别观察海马结构和NF-H的表达情况以及BDNF和GABA水平.结果:(1)模型组小鼠海马出现大量的空洞样改变,细胞排列不整齐,XN(H)组空洞样改变减少;(2)模型组NF-H染色的积分光密度显著低于对照组和XN(H)组,差异具有统计学意义(P＜0.05);(3)Elisa检测显示,模型组海马BDNF和GABA水平显著低于对照组和XN(H)组,差异具有统计学意义(P＜0.01),而且模型组与XN(L)组的GABA水平之间也存在显著性差异(P＜0.05).结论:鸟灵菌粉水提物对MCAO模型小鼠海马结构具有保护作用,这一作用可能与其调节GABA和BDNF水平有关.
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乌灵菌粉对脑缺血再灌注模型小鼠纹状体髓鞘的保护作用
目的 探讨乌灵菌粉水提物对脑缺血再灌注模型小鼠神经功能的保护作用及纹状体髓磷脂碱性蛋白(MBP)和高分子量神经丝蛋白(NF-H)水平的影响.方法 将40只昆明小鼠随机分为对照组、模型组、乌灵菌粉低剂量组和乌灵菌粉高剂量组.对照组进行假手术(皮肤切开,分离颈动脉),模型组及乌灵菌粉组通过右侧颈内动脉栓线术,建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,对照组和模型组术后即刻腹腔注射生理盐水,乌灵菌粉组则注射不同剂量的乌灵菌粉水提物(0.3 g/kg和0.6 g/kg),术后24 h进行神经功能评分及2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色;应用免疫组化观察小鼠纹状体内MBP和NF-H的表达情况.结果 (1)模型组小鼠出现明显的神经功能障碍,乌灵菌粉高剂量组神经功能评分明显高于模型组(P＜0.01).(2)TTC结果提示,模型组脑组织损伤侧出现明显梗死灶,给予乌灵菌粉水提物(0.6 g/kg)干预后脑梗死容积明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)模型组MBP和NF-H染色的吸光度显著低于对照组,乌灵菌粉高剂量组MBP和NF-H染色的吸光度均高于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 乌灵菌粉可以改善MCAO模型小鼠神经功能,并对髓鞘和神经纤维具有保护作用.
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乌灵菌粉对实验性动脉粥样硬化兔的抗氧化系统及炎症因子的影响
目的 探讨乌灵菌粉对实验性动脉粥样硬化兔的抗氧化系统及炎症因子的影响.方法 建立兔的动脉粥样硬化模型,同时连续给予乌灵菌粉(100 mg·kg-1·d-1)12周,测定兔血浆中总胆固醇、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)、C反应蛋白(CRP),白介素6,肿瘤坏死因子含量及超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,并观察主动脉病理学形态改变.结果 给予乌灵菌粉可有效减小高脂饲料引起兔动脉粥样硬化斑块的厚度,同时使动脉粥样硬化兔血浆TG、MDA、CRP含量显著下降(P＜0.01),HDL-C含量、SOD及GSH-Px活力显著升高(P＜0.01).结论 乌灵菌粉能降低动脉粥样硬化兔TG水平及增加抗氧化酶活力,抑制部分炎性因子的产生来达到降低或缓解动脉粥样硬化的目的.
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乌灵菌粉化学成分研究
目的 对乌灵菌粉的化学成分进行研究.方法 采用硅胶柱层析、制备液相等多种分离手段,对乌灵菌粉中石油醚、乙酸乙酯部分进行提取、分离、纯化,通过核磁数据进行结构鉴定.结果 分离并鉴定4个化合物,分别为:5-hydroxymellein(1)、5-carboxylmellein(2)、金雀异黄素(3)和5-methylmellein(4).结论 化合物2,3,4为首次从乌灵菌粉提取分离得到;化合物1,2,4为乌灵菌粉的特征性成分.
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乌灵菌粉抗大鼠戊四唑诱导癫痫的作用
目的:研究乌灵菌粉对大鼠戊四唑的癫痫点燃过程和点燃后学习能力的影响及其可能的机制.方法:将SD大鼠随机分为4组:戊四唑点燃模型组(模型对照组),低剂量乌灵茵粉组(0.3 g.kg-1),高剂量乌灵菌粉组(0.6 g.kg-1)和空白对照组.各组大鼠隔日腹腔注射亚惊厥剂量戊四唑(35 mg·kg-1),空白对照组注射生理盐水,共12次.乌灵菌粉于每次戊四唑注射前30 min灌胃.采用放射状八臂迷宫(四臂放食物)测试大鼠学习能力.化学荧光法测定大鼠脑内组胺含量.结果:(1)与模型对照组相比,低剂量乌灵菌粉组第7次注射戊四唑后发作级别显著降低,第6次注射戊四唑后肌阵挛潜伏期明显延长,第7次注射戊四唑后癫痫泛化潜伏期明显延长(P＜0.05)；高剂量乌灵菌粉组第6、7和8次注射戊四唑后癫痫发作级别明显降低,第8和9次注射戊四唑后肌阵挛潜伏期显著延长,第6次注射戊四唑后癫痫泛化潜伏期明显延长(P＜0.05)；(2)与空白对照组相比,模型对照组在放射状八臂迷宫训练3天后工作记忆和参考记忆错误次数均明显增加(P＜0.05),乌灵菌粉部分逆转了这种戊四唑点燃癫痫诱发的学习能力受损；(3)模型对照组海马、皮层、丘脑和下丘脑组胺含量较空白对照组明显下降(P＜0.05),低剂量乌灵茵粉组海马、高剂量乌灵菌粉组海马、丘脑和下丘脑组胺含量较模型对照组上升(P＜0.05).结论:乌灵茵粉延缓大鼠戊四唑癫痫点燃的形成过程,改善癫痫大鼠的学习能力,增强脑内组胺能神经可能是其作用机制之一.
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乌灵菌粉早期应用对创伤后应激障碍模型大鼠行为及海马组织中IL-1β、IL-6水平的影响Δ
目的：探讨乌灵菌粉早期应用对创伤后应激障碍（PTSD）模型大鼠行为及海马组织中白细胞介素1β（IL-1β）、IL-6水平的影响。方法：50只SD大鼠随机分为对照组（生理盐水）、模型组（生理盐水）、阳性对照组（帕罗西汀，10 mg/kg）及乌灵菌粉低、高剂量组（0.4、0.8 g/kg）。除对照组外，其他各组大鼠经增强型单次延长应激复制PTSD模型，造模后立即ig相应药物，每天1次，连续7 d。给药完成后第7天进行旷场实验（记录大鼠10 min内进入中央区次数、中央区探索时间百分比）、第8天进行高架十字迷宫实验（记录大鼠5 min内进入开臂次数百分比、开臂停留时间百分比）以观察大鼠的行为；随后处死大鼠，用酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠海马组织中IL-1β、IL-6的含量。结果：与正常组比较，模型组大鼠行为学指标均显著降低，海马组织中IL-1β和IL-6的含量均显著升高（P＜0.05或P＜0.01）；与模型组比较，阳性对照组、乌灵菌粉高剂量组大鼠行为学指标均显著升高，海马组织中IL-1β和IL-6的含量均显著降低（P＜0.05），但乌灵菌粉低剂量组各指标则无显著变化（P＞0.05）。结论：高剂量乌灵菌粉可改善PTSD大鼠焦虑样行为，且这种作用可能与其降低海马组织中IL-1β、IL-6的水平有关。
