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膀胱移行细胞癌患者外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞检测的临床意义
目的:检测外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞评价膀胱移行细胞癌患者的免疫系统,进一步评价T淋巴细胞亚群和NK细胞与肿瘤分期及肿瘤细胞分级之间的关系.方法:应用T淋巴细胞亚群、NK细胞单克隆抗体采用APAAP法检测34周表浅膀胱移行细胞癌患者,16例侵润性膀胱移行细胞癌患者和30例正常人外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞水平.结果:侵润性移行细胞癌的T淋巴细胞亚群水平和NK细胞水平对照组显著性降低,而表浅膀胱移行细胞癌组与对照组无显著不同.表浅膀胱移行细胞癌患者外周血T细胞和NK细胞水平与侵润性移行细胞癌患者外周T血细胞水平和NK细胞水平相比较,侵润性膀胱移行细胞癌的T细胞水平和NK细胞水平显著降低.高分级肿瘤患者外周血T和NK细胞水平比低分级肿瘤患者显著性降低.结论:结果表明分析外周血T细胞和NK细胞及CD4+/CD8+细胞比值有助于评价膀胱肿瘤的临床分期和患者的免疫功能.
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MMP2和CA50在膀胱移行细胞癌、癌旁组织及正常膀胱组织中的表达及临床意义
膀胱移行细胞癌是泌尿系常见的肿瘤,术后易复发,肿瘤在侵袭和转移过程中基质金属蛋白酶类(MMP2)和糖链抗原CA50起重要作用,采用免疫组化法,联合检测MMP2和CA50在各组织中的表达,据其不同的阳性表达程度,分析其与肿瘤分期、分级的关系及意义.
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P53、凝血酶敏感蛋白-1与膀胱移行细胞癌中血管生成的关系
目的:检测人膀胱移行细胞癌组织中P53蛋白、凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)表达及微血管密度(MVD),探讨P53蛋白、TSP-1与膀胱移行细胞癌临床病理特征之间的关系.方法:以免疫组化法检测膀胱移行细胞癌50例以及正常膀胱组织10例石蜡标本中P53蛋白、TSP-1表达及MVD.结果:膀胱移行细胞癌组织中,P53蛋白表达及MVD随病理分级的升高和临床分期的进展而增高(P＜0.05),TSP-1表达随病理分级的升高和临床分期的进展而降低(P＜0.05);TSP-1表达与P53表达呈负相关(r=-0.4223,P＜0.01),MVD在TSP-1阳性表达组明显低于TSP-1阴性表达组(P＜0.01).结论:膀胱移行细胞癌组织中P53蛋白过表达及TSP-1低表达与肿瘤血管生成及侵袭进展密切相关.
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膀胱移行细胞癌中Ki-67抗原的研究进展
膀胱移行细胞癌(BTCC)是泌尿生殖系常见的恶性肿瘤,具有多发性、易浸润性和易复发性的特点,细胞增殖在BTCC的发展中起着重要的作用,因此,关于细胞增殖的研究对于BTCC的发展及预后有着重要的意义,细胞核增殖抗原Ki-67是一较新的与细胞周期相关的抗原,Ki-67指数常被作为反映肿瘤细胞增值程度的指标,Ki-67能较准确的反映细胞增生情况,可作为判断肿瘤恶性程度和预后一个独立的生物学标志物.本文以Ki-67及其在BTCC中的临床研究近况做一下综述.
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藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响
目的:应用基因表达谱芯片研究藏花素(crocin)对膀胱移行细胞癌T24细胞基因表达谱的影响.方法:MTT法测定藏花素对T24细胞的生长抑制率,选出藏花素佳作用时间和浓度,运用高通量的基因表达谱芯片检测藏花素作用T24细胞前后基因表达谱的变化,筛选差异表达基因.RT-PCR和免疫细胞化学验证上调基因p21WAF1和下调基因cyclinD1.结果:MTT实验结果显示3 mmol·L-1藏花素作用T24细胞48 h的抑制率与对照组相比有显著意义(P<0.05).基因芯片检测发现3 mmol·L-1藏花素作用T24细胞48 h引起该细胞系基因表达谱广泛地改变,其中表达差异2倍以上的基因共836个,这些差异表达基因的功能涉及多个方面,为明显的是与细胞生长调节相关的细胞周期调节基因、细胞凋亡调控基因、DNA复制相关基因等类型.RT-PCR检测其中的细胞周期调节相关基因p21WAF1和cyclinD1,结果与基因芯片相符.同时免疫细胞化学结果从蛋白表达水平上佐证p21WAF1和cyclinD1变化与芯片结果一致.结论:藏花素可以诱导T24细胞基因表达谱广泛的改变,并可能通过调控细胞周期相关基因的表达来抑制T24细胞的增殖.
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尿膀胱癌抗原作为膀胱肿瘤标志物的临床评价
为评价尿膀胱癌抗原(urinary bladder cancer antigen,UBC)在膀胱移行细胞癌(BTCC)中的诊断价值,采用ELISA法对53例BTCC患者、25例泌尿系统良性疾病患者和13例健康志愿者进行UBC检测,并同时行尿细胞学检查.结果显示:(1)BTCC患者UBC平均含量为26.26±28.49μg/L,与泌尿系统良性疾病患者和健康志愿者相比(9.41±9.63μg/L、1.73±0.79μg/L),均有显著性差异(P均＜0.01).(2)以7.5μg/L为适临界值时,UBC诊断BTCC的敏感性和特异性分别为86.8%、76.3%,与尿细胞学检查(32.1%、97.4%)相比,均有显著性差异(P均＜0.01).结论:UBC具有简便、敏感和无创的特点,可作为辅助诊断BTCC的尿肿瘤标志物.
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尿膀胱癌抗原作为膀胱肿瘤标志物的临床应用
膀胱肿瘤是泌尿系统常见的恶性肿瘤,大多为膀胱移行细胞癌(BTCC),约有70%属于Ta期和T1期的浅表性肿瘤,可经尿道电切术治疗,但5～15年内的复发率高达60%～85%,且约20%将进展为浸润性肿瘤[1],因此及早发现膀胱肿瘤和复发肿瘤是治疗的关键.
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采用尿survivin和NMP22诊断膀胱移行细胞癌的临床评价
尿核基质蛋白(nuclear matrix protein,NMP22)测定在临床上已经被广泛用于膀胱癌的早期诊断,但尿survivin用于检测膀胱癌才刚刚开始[2].我们对48例膀胱癌患者同时行尿survivin、NMP22和脱落细胞学检测,探讨其诊断早期膀胱癌的临床价值.
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E-cadherin、α-catenin和MMP2在膀胱癌中的表达及预后意义
目的研究钙黏附分子(E-cadherin,E-cad)、α-连接蛋白(α-catenin,α-cat)和基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinase-2,MMP2)在膀胱移行细胞癌中的表达及预后意义.方法应用SP免疫组化染色法,检测96例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜E-cad、α-cat及MMP2的表达情况.结果正常膀胱黏膜E-cad、α-cat呈正常表达,MMP2为阴性;96例膀胱移行细胞癌中E-cad及α-cat的异常表达率分别为44.8%(43/96)和58.3%(56/96),MMP2阳性表达为53.1%(51/96).E-cad和α-cat的异常表达率、MMP2的阳性表达率与肿瘤的病理分级、临床分期及生存率显著相关.结论 E-cad、α-cat和MMP2在膀胱移行细胞癌的演变过程中起重要作用,可作为监测肿瘤恶性程度和判断预后的指标.
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泌尿系统多原发性恶性肿瘤2例
例1男性,50岁.无痛性血尿1周.B超、CT及膀胱镜证实为膀胱肿瘤.手术探查发现左肾占位,疑为结石.行左肾输尿管及全膀胱切除直肠代膀胱术. 病理检查巨检:全膀胱8cm×5cm×5cm,底部三角区右侧见一肿块2cm×2cm,切面灰白色,侵及肌层.左肾14cm×10cm×7cm,切面见一肿块,大直径6cm,位于肾上极,未累及肾盂.精囊腺、前列腺未见异常.镜检:膀胱肿瘤呈乳头状生长,乳头表面被覆移行上皮,细胞层次增多,达6层以上,细胞有异型,核分裂易见.肿瘤浸润膀胱深肌层.肾肿瘤细胞排列呈肉瘤样,细胞短梭形,胞浆嗜伊红,核深染,有异型,浸润肾实质.癌组织周围肾小球未见异常.肾盂粘膜上皮正常,未见癌侵犯.表明肿瘤来源于肾小管,与肾盂无关.免疫组化染色:Keratin强(+)、Vimentin(+)、EMA(+/-)、actin和myglobin(-).病理诊断:多原发性癌:肾梭形细胞癌;膀胱移行细胞癌Ⅱ级(图1,2).
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多重癌1例
患者男性,80岁,僧人.因排便习惯改变伴便血1年,加重8个月入院.直肠指检发现肠腔呈环形狭窄,距肛门6～8 cm处可触及一肿物,质硬,有触痛.肠镜示直肠内有一半环状隆起肿物,表面高低不平,易出血,经活检病理诊断为直肠管状腺癌.腹部B超示膀胱右侧壁发现一面积为2.1 cm×1.7 cm的稍强回声区,向腔内突起.膀胱镜下见右侧壁与前壁交界、距输尿管开口上方2 cm处有一菜花样肿物,直径为3 cm,触之易出血,经活检病理诊断为膀胱移行细胞癌.此外,在右侧乳晕区还发现一个约3 cm无痛包块,质地硬,表面不光滑,边界不清,表面皮肤无红肿、破溃及糜烂.遂行肛门钬激光直肠癌烧灼术,经尿道钬激光膀胱癌烧灼术,同日行右侧乳腺包块切除术.
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腹膜弥漫性蜕膜细胞样型恶性间皮瘤一例
患者男,76岁.因膀胱癌术后14年,腹胀1年,加重半年于2003年4月入院.患者14年前因无痛性血尿于我院确诊为膀胱癌,行电凝切除术,术后病理:膀胱移行细胞癌.术后定期膀胱镜复查,未发现复发及转移.1年前出现反复腹胀,半年前加重伴体重下降,2个多月减少10 kg.既往有30多年吸烟史,无石棉接触史,无家族史.体检:生命体征平稳,胸部肺气肿征;腹丰满,叩鼓,张力稍高,未扪及确切包块.CT示:脾周、双侧结肠旁沟积液;腹膜增厚,并见小结节;大网膜密度增高呈饼状,其内密度不均;小肠系膜稍肿胀.右下腹肠曲分界不清,肠间积液伴肠曲粘连;肝脾胆胰及双肾未见异常,膀胱未见明显占位.胃镜示:慢性浅表性胃窦炎,未见溃疡.结肠镜示:全结肠、直肠未见异常.血清甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)正常,癌抗原CA-125,CA19-9正常.剖腹探查术中见:腹腔内中等量黄色腹水,腹膜及盆腔密布粟粒状红白结节;大网膜肥厚硬韧,满布结节,呈饼块状与腹壁、横结肠系膜浸润;上腹呈冰冻状浸润,无法扪及肝胆、脾及胃十二指肠;小肠系膜肥厚、质韧,满布同性状结节,小肠肠管浆膜间充血、粗糙,失去光泽,其上也满布粟粒大小结节;盆腔腹膜满布结节,膀胱无法完全扪及,膀胱底、盆底、后腹膜满布结节.取结节状两块组织行活检.
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膀胱癌分子病理学研究进展
近年来,分子病理学已经取得了巨大进步.我们对膀胱移行细胞癌(TCC)发生发展以及和生物学行为相关的分子改变作一综述,以阐明其主要的分子机制及临床意义.一、膀胱TCC发生的肿瘤干细胞学说肿瘤干细胞占恶性肿瘤中活细胞的1％～4％.这些细胞通过不对称分裂增殖形成不同的细胞分支,成为多向分化的异质性肿瘤细胞[1-2].不对称分裂的概念是指当母细胞分裂以后,一个子细胞与母细胞一样能够继续分裂,而另一个子细胞则生成与母细胞不同表型的子代.如果肿瘤是由肿瘤干细胞或祖细胞分化而来,其基因组、表观遗传以及微环境变化都对接下来发生的克隆增殖至关重要.所以,每个肿瘤干细胞及其后代都会具有独特的基因、表观遗传和表型.
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膀胱移行细胞癌各分期分级中荧光原位杂交检测敏感性比较
目的 评价荧光原位杂交(FISH)在诊断膀胱移行细胞癌各分期分级中的敏感性.方法 应用荧光标记的3、7、17号染色体及p16基因探针检测138例血尿患者尿液中脱落细胞的染色体及基因畸变情况,根据诊断标准计算FISH诊断膀胱移行细胞癌的敏感性.同时留取上述患者尿液送病理科行尿找瘤细胞检查,并比较两种方法对膀胱移行细胞癌的诊断效能.结果 FISH图像中细胞核大且不规则者更易观察到染色体基因异常情况,并可见具有较多染色体改变的细胞呈花斑状的染色图像.FISH和尿细胞学诊断膀胱移行细胞癌的总敏感性为83.9%和36.8%,在各分期分级中敏感性为T1期83.6%和31.3%,T2-4期100%和55.6%,G1级36.3%和9.1%,G2级95.2%和42.9%,G3级100%和50%.FISH诊断膀胱移行细胞癌的总敏感性及在肿瘤各种分期分级中敏感性与尿细胞学结果比较均有统计学差异(P<0.05).FISH诊断膀胱移行细胞癌敏感性高于尿细胞学.结论 FISH对膀胱移行细胞癌的诊断有较高的敏感度.
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细胞凋亡相关基因Bcl-2,Bax在膀胱移行细胞癌中的表达
目的 探讨细胞凋亡相关基因bcl-2,bax在膀胱移行细胞癌中的表达及其相关性和在膀胱移行细胞癌病理分级和临床分期中的意义.方法 采用免疫组织化学方法检测膀胱移行细胞癌标本58例,正常膀胱粘膜15例中bcl-2,bax的表达情况.结果 Bcl-2在膀胱癌组织中高表达,bax在正常膀胱粘膜组织中高表达,bcl-2的表达与膀胱癌病理分级和临床分期均呈正相关性而bax的表达与两者均无相关性.结论 Bcl-2基因蛋白表达增强及bax基因蛋白表达下降在膀胱癌的发生中起到重要作用,bcl-2基因蛋白的表达程度可以作为临床判断膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的较为町靠的指标.
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膀胱尿路上皮癌及尿沉淀细胞P16基因甲基化检测
目的 探讨膀胱尿路上皮癌组织及尿沉淀细胞中P16基因启动子的甲基化状况及其临床意义.方法 采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)的方法检测55例膀胱癌组织及尿沉淀细胞P16基因启动子异常甲基化频率.分析其甲基化程度与膀胱尿路上皮癌临床病理参数之间的关系.结果 膀胱尿路上皮癌组织及尿沉淀细胞P16基因甲基化阳性率分别为27.3％( 15/55)和21.8％(12/55)；癌组织及尿沉淀细胞P16基因甲基化阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).浸润性和浅表性膀胱尿路上皮癌组织及尿沉淀细胞P16基因甲基化阳性率的差异有统计学意义(P＜0.05).P16基因甲基化在不同病理分级和不同性别间其差异无统计学意义(P＞0.05).结论 P16基因甲基化是膀胱尿路上皮癌发生的早期事件,与膀胱尿路上皮癌的浸润性发展相关.尿沉淀细胞P16基因启动子异常甲基化状态可作为无创性诊断膀胱尿路上皮癌并且判断其预后的分子标志物.
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Ki-67及p27基因产物在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义
目的,探讨膀胱移行细胞癌(TCC)中P27和Ki-67的表达与膀胱细胞增殖的关系.方法用鼠抗人P27单克隆抗体及Ki-67抗原单克隆抗体对79例膀胱移行细胞癌和30例癌旁组织进行免疫组化染色.结果 TCC中P27表达明显减少,Ki-67指数(Ki-67L1)明显增高;且P27表达与Ki-67指数(Ki-67L1)捉瘤病理分级,临床分期和淋巴结转移呈负相关.结论P27和Ki-67LI从细胞和一筹莫展抑制和增殖活性两个不同的侧面反映了肿瘤细胞的侵润能力,联合检测,P27和Ki-67LI对预测膀胱癌的的生物学行为及预后具有重要的意义.
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肝癌缺失因子1在膀胱癌中的异常甲基化与肿瘤病理特征的关系
膀胱肿瘤是我国常见的泌尿系统恶性肿瘤,其中膀胱移行细胞癌(Bladder transitional cell carcinoma,BTCC)占膀胱肿瘤的90%以上.肿瘤的发生是癌基因激活、抑癌基因失活和基因组不稳定性增加共同作用的结果;甲基化是抑癌基因失活的主要原因之一,且在肿瘤发生发展中起重要作用.
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免疫组化技术检测膀胱癌尿脱落细胞角蛋白20的临床价值
非侵入性的尿脱落细胞检查对膀胱癌早期诊断、监测复发及预后判断具有实用性，但受主、客观因素的影响，其敏感性受到一定限制。细胞角蛋白（CK）是一个大家族，其中CK20正用于膀胱癌早期诊断及预后观察的研究。用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法检查尿标本CK20，目前认为是比常规尿脱落细胞（HE）染色更敏感的方法。但RT-PCR需特殊的仪器设备，价格昂贵。免疫组化技术用于细胞学诊断，可以通过直接观察抗原在细胞中的表达来证实和解决许多在常规染色中难以解决的问题，同时也克服了RT-PCR的不足。我们以免疫组化技术检测尿脱落细胞CK20的表达，报道如下。 一、材料和方法 1.检测对象：(1)肿瘤组：40例膀胱癌为本院泌尿科收治的住院患者。全部病例经病理证实，其中膀胱移行细胞癌Ⅰ级26例，Ⅱ级、Ⅲ级分别为11及3例。初发30例，复发10例。年龄47～79岁。(2)对照组：全部20例病例均为临床明确诊断的住院患者，其中前列腺增生16例，尿路结石4例。 2.方法：免疫组化法使用链霉素亲生物素过氧化物酶连接法（S-P法）。收集晨尿，离心后取沉渣涂片，固定液（无水乙醇∶冰醋酸=3∶1）固定30 min，3%过氧化氢浸泡10 min，胰酶消化10 min，加一抗CK20单抗30 min，加二抗及S-P复合物各10 min，重氮氨基苯(DAB)显色，苏木素复染，各步之间用0.01 mol/L磷酸盐缓冲液（PBS，pH 7.2）洗片，以PBS液代替一抗作阴性对照。结果判断：有棕黄色颗粒着色的细胞为阳性细胞。判断标准，本文分“阳性(+)”“阴性(-)”两级。
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氯吡格雷抵抗二例
例1 男性,83岁.因头晕、视物旋转1 d于2005年3月9日入院.既往有高血压,支气管炎、膀胱移行细胞癌术后史.自2004年12月31日因椎-基底动脉供血不足开始服用氯吡格雷(波立维)75 mg,每日一次.体检:血压110/70 mm Hg,神志清楚,语言利索,颅神经正常,四肢肌力正常,反射对称,双侧下肢Babinski征(±),无感觉障碍,关节位置觉正常.头MRI检查:老年性脑改变,未见梗死及出血改变.MRA检查:右颈动脉起始部略细,左椎动脉未显影,右椎动脉显影,基底动脉未见异常,大脑前、中、后动脉走行无异常,未见局限性狭窄.颈动脉B超检查:双侧颈动脉斑块形成,左椎动脉闭塞.血生化检查:甘油三酯1.77 mmol/L,肌苷117.6 μmol/L,余均正常.入院诊断:椎-基底动脉供血不足.入院后给予对症及改善血液循环治疗,并继续服用氯吡格雷75 mg, 每日1次,2 d后头晕症状明显好转,2005年3月12日查血小板聚集试验显示,对ADP无抑制作用.
