首页 > 文献资料
-
高效液相色谱法检测酱油中羟脯氨酸的含量研究
酱油是人们日常生活中必备的调味品之一,在酱油当中,具有羟脯氨酸的成分,在检测酱油中羟脯氨酸含量的实验中,可应用高效液相色谱法。利用乙醇提取样品,衍生试剂采用2,4-二硝基氟苯,采用360 nm的波长,采用5μm 4.6 mm×250 mm的色谱柱。通过相应的实验操作,获得酱油当中羟脯氨酸的含量数据。
-
《口腔发育生物学》研究生课程的开发与实施
进入研究生阶段的口腔医学生将不仅要学习和记忆口腔医学相关知识,还要面临做科学研究的挑战.初接触科学研究工作,学生们普遍反映会遇到选题困难、阅读文献困难和实验操作技术困难等重重困难.为了帮助口腔医学研究生建立科研思维和创新精神,我校口腔医学院开设了《口腔发育生物学》课程,帮助研究生快速克服上述重重困难,尽快融入到科研学习和工作中去.本文将系统介绍《口腔发育生物学》这门研究生课程的开发与实施.
-
热灭活和紫外线照射灭活结核分枝杆菌的实验效果分析
我国卫生部公布的《人间传染的病原微生物名录》中结核分枝杆菌被列为第二类病原微生物(危害程度为Ⅲ级),属高致病性病原微生物[1].实验室研究课题中,大部分涉及到结核分枝杆菌的操作,实验室生物安全是首先要解决的问题.至今,已有一些关于实验室工作人员患结核病的报道,其中呼吸道吸入感染是实验室感染的主要类型[2].根据传染病发生必须存在的3个条件:传染源、传播途径和易感者.在实验操作中如果做好传染源的控制,如避免产生活菌气溶胶、有效灭活细菌等,实验室生物安全就有了根本的保障.本实验探讨了实验室结核分枝杆菌传染源控制中的热灭活和紫外线照射灭活方法的效果,为保障生物安全提供参考依据.
-
中药生物效应鉴定法探索——脑神经系统抑制性递质受体γ-氨基丁酸受体中药活性成分研究
将受体学理论和实验技术引用到中药鉴定研究领域,从受体角度,从中药生物效应入手,提出了中药生物效应鉴定法.即"在中医药理论指导下,以中药的归经、功能主治为线索,通过高效液相、液一质联用、气-质联用等现代分离分析手段和放射性配体-受体结合分析法研究中药活性成分对机体生物分子(受体)的作用,在此基础上建立国际承认的中药质量评价、控制方法,方法的表征体现为有效成分含量或有效成分半数有效浓度ECso值、半效抑制浓度IC50值、表观解离常数K值".本文是继2002年本刊第3期"受体技术与中药研究"一文之后,以脑神经系统抑制性递质受体γ-氨基丁酸受体中药活性成分为研究对象,进一步就中药生物效应鉴定法的技术路线及实验操作进行介绍.
-
中医药科研实验室标准操作程序目标建设与基本思路
实验室是科技人员从事研究工作的重要场所,是产生可靠的实验数据、培养科技人才的基地.科学研究的重要条件之一就是要有科学、可靠的实验数据.由此,才能揭示客观事物的本质规律,产生科学理论,指导技术发展等实践活动.要保持实验室研究数据的科学性和可重复性,规范化的实验操作是核心环节之一.必须在实验的全过程遵循相对稳定的实验程序和标准的操作方法,这也是培养科技人员严谨科学作风的重要环节.因此,实验室必须建立标准操作程序(Standard operating procedure,SOP).所谓标准操作程序,是实验室在长期实验工作中积累并不断完善所形成的相对稳定的规范化实验操作程序,实验室SOP又是实验室相对成熟的标志,它反映了实验室工作的积累程度、技术水平、技术发展方向和实验室的技术特色.因此,是实验室对外开放的基础条件和技术保证.
-
设计性实验引导本科《实验针灸学》教学的新模式探索
培养学生的科研思维和创新能力是实验针灸学教学的主要目标之一.设计性实验因具有实验技能的综合性、实验操作的独立性、实验过程的研究性特点而成为提高学习兴趣、激发创新能力、开拓科研思维的有效途径.
-
BSL-3实验室实验活动及意外事故对室内环境生物污染的定量分析
目的 对 BSL-3 实验室内常见的实验活动及意外事故进行模拟,定量研究产生的微生物气溶胶浓度,分析各种实验活动的风险程度,为相关实验操作的风险评估和人员防护提供参考.方法 用粘质沙雷菌和噬菌体 ΦX174 作为替代微生物,在BSL-3 实验室对 6 种实验活动及意外事故进行模拟,通过空气和表面采样检测,对实验活动的生物风险进行定量分析研究.结果 6 种实验活动及意外事故都会产生不同浓度的微生物气溶胶.注射攻毒实验动物意外喷出可产生浓度达104CFU/m3的气溶胶,培养瓶意外坠落和冻干粉意外洒落产生的气溶胶浓度可达 103CFU/m3(PFU/m3),吹吸混匀、离心时离心管破裂及超声裂解产生的气溶胶浓度为 10 ~100 CFU/m3(PFU/m3).结论 BSL-3 实验室内实验活动及意外事故产生的气溶胶浓度不可忽视,会引发生物污染与人员感染风险.
-
一种简易的免疫组织化学阳性对照新方法
随着现代化病理学实验室规范化管理的发展,免疫组织化学实验操作也日趋规范化,"香肠"技术、组织芯片技术不断在免疫组织化学阳性对照中得到应用,我们采用多种方式进行免疫组织化学阳性对照实验,通过对比总结出一种简便易行的实验方法.
-
血浆基质浓度的稳定化:氨基酸等代谢研究模型
涉及血浆基质浓度变化的代谢检查通常在隔夜禁食后进行.但此时正值就餐后和开始饥饿的过渡期,因此伴有多种基质血浆浓度的快速变化.在实验操作中,这种变动可能干扰对血浆浓度改变的正确阐释.静脉滴注葡萄糖[250 mg/(kg·h)]1小时,继而在3小时内完成滴注葡萄糖162 mg/(kg·h)和氨基酸50 mg/(kg·h)可用于稳定多数基质的血浆浓度,且这种状况可维持5小时甚至更长时间.本研究提供的这一模式比隔夜禁食更适宜于在多数代谢检查中使用,而且其准备所需时间更短、费用更低.
-
动脉粥样硬化模型小鼠心脏中 Movat染色技术的应用
目的::ApoE基因敲除小鼠为目前研究动脉粥样硬化的常用模型之一,其在高脂饲养下可加速形成主动脉粥样硬化斑块。动脉粥样硬化的病灶成分有平滑肌细胞、泡沫细胞、胆固醇结晶、胶原纤维、弹力纤维和蛋白聚糖。 Movat染色技术可以在一张切片上直观显示出这几种成分的病理变化,规范和细化的实验操作步骤可以保证染色结果的一致性,为动脉粥样硬化的深入研究提供清晰可靠的实验依据,从而更客观的评估实验结果。方法:ApoE基因敲除小鼠,雄性70只随机分为8组:ApoE空白组,阳性对照药组,治疗药物A高、中、低剂量组,治疗药物B高、中、低剂量组,以及6只C57小鼠对照组。高脂饲养26周后,采血后处死。取心脏,石蜡包埋后进行定位切片。分批进行染色,染色过程中摸索和细化了染液配置、染色温度、染色时间等条件,规范实验操作。成片后进行组织病理学观察,并对胶原纤维、弹力纤维、蛋白聚糖、泡沫细胞等进行定性和定量分析。结果:通过试验建立了细化、规范化的Movat染色操作流程。光镜下观察染色结果可见各结构成分着色分明:胶原纤维和弹力纤维分别为黄色和黑色,蛋白聚糖呈绿色,泡沫细胞呈淡紫色,心肌平滑肌呈红色。主动脉粥样硬化斑块病灶部位结构清晰,病理表现为血管平滑肌增生,胶原纤维、平滑肌细胞和蛋白聚糖形成纤维帽,纤维帽下泡沫细胞形成并向下延伸,脂质大量沉积,弹力纤维断裂。与空白组和阳性对照组相比,治疗药物A和B均对病症的严重程度和病程进展有一定的治疗效果。结论:在本实验中对Movat染色的染液配置、染色时间、染色温度等进行细化和调整,为实验操作流程的规范化提供依据。在保证了实验统一性的基础上,可客观评估药物对动脉粥样硬化的治疗效果,同时因粥样斑块各结构成分颜色分明,利于镜下成像鉴别,可对各成分进行定量统计分析,为实验结果提供了可靠的实验数据。
-
第二届哈尔滨NOTES暨内镜治疗技术国际高峰论坛
为推动NOTES及内镜下治疗技术的临床应用研究,加强同国际NOTES及内镜下治疗领域顶尖专家的切磋交流,展示中国NOTES及内镜下治疗技术研究成果,推进内镜微创治疗技术的提高。由哈尔滨医科大学附属第二医院消化科和首都医科大学附属北京友谊医院消化科共同举办的第二届哈尔滨NOTES暨内镜治疗技术国际高峰论坛拟于2014年07月18至20日在哈尔滨召开。届时,将有来自美国、欧洲、日本的国际知名专家及国内著名消化和内镜专家进行NOTES及内镜下治疗技术的讲座和临床及动物实验操作演示。大会还设有内镜微创治疗技术的手把手训练。将对参会人员颁发国家级继续医学教育学分证书。
-
改良Kamada法大鼠原位肝移植模型的建立
大鼠原位肝移植是进行肝移植基础研究的基础.目前手术方法主要是由Kamada等[1]报道的肝上下腔静脉(suprahepatic vena cava,SVC)缝合加肝下下腔静脉(infrahepatic vena cava,IVC)和门静脉(portal venae,PV)袖套吻合术式与Miyata等[2]报道的三套管法.SVC缝合能够达到通畅的血流动力学效果,更加符合生理.本实验在Kamada法的基础上对供肝获取和胆道重建方法作了部分改进,经过36次预实验操作,建立了稳定的实验模型.
-
病原微生物实验室实验操作产生气溶胶风险定量研究
目的 使用指示细菌、病毒代替有传染性的细菌、病毒,研究实验操作产生的微生物气溶胶风险,为相关实验室活动的风险评估提供科学数据. 方法 负压实验室内用高浓度指示细菌和病毒(噬菌体)进行实验室中多种实验操作产生的气溶胶风险,包括高浓度吹吸混匀、高浓度培养瓶意外跌落、离心管破裂产生的气溶胶风险实验. 安德森六级采样器主动采样和沉降平皿被动采样两种方法进行微生物气溶胶采样. 根据采样结果得到各种实验操作产生的气溶胶风险. 结果 在模拟的各种正常和意外事故的实验室操作中,在模拟测试条件下高浓度气溶胶吹吸在局部环境中产生的细菌气溶胶风险高浓度为1174菌落形成单位( CFU)/m3、病毒气溶胶高浓度为1058噬斑形成单位( PFU)/m3 ,高浓度培养瓶破碎产生的细菌气溶胶风险高浓度为7957 CFU/m3、病毒为7942 PFU/m3 ,离心管破裂时产生的细菌气溶胶风险高浓度为80 CFU/m3、病毒为78 PFU/m3. 结论 病原微生物实验操作中存在着产生很高微生物气溶胶的风险. 实验人员要遵守操作规程,选择合适的防护装备.
-
药典标准规范化的探讨
<中国药典>2000年版自2000年7月1日正式执行以来已有一年半的时间,在学习和执行过程中深感新版药典与以往任何一版药典相比,无论在收载品种、数量、标准的科技水平,药品质量控制和检测方法的进展,还是品种的广泛性、市场的代表性等诸多方面均有长足的进步与提高,对保证和推动药品质量的提高将发挥重要作用.为了确保全国各地药检机构检验数据与结论报告的正确、可靠和一致,实施药品检验实验操作的规范化、标准化,中国药品生物制品检定所对1996年出版的<中国药品检验标准操作规范>进行了全面的补充与修订,新出版了<中国药品检验标准操作规范二○○○年版>,作为执行药典标准的重要依据和补充,它是一部指导药检人员正确理解和实施<中国药典>及有关药品标准的专业工具书.
-
铬黑T指示剂在活性钙冲剂含量测定中量的确定
活性钙冲剂为临床上健身补钙、预防和治疗某些慢性病的常用药物,其含量测定采用铬合滴定(鲁/WYB31-93),方法中铬黑T指示剂只注明加入少许,没有具体的量,在实际实验操作中,如果铬黑T指示剂的用量掌握不好,终点难以判断,结果有偏差,重现性也不好.
-
高效分离与裂解脑线粒体的方法
在人和动物的整个生命活动中,线粒体是真核细胞内的重要细胞器,在细胞活动中起着非常关键的作用.越来越多的证据[1-4]表明线粒体功能障碍在神经退行性疾病、脑卒中等的疾病发病过程中起着重要作用.因此提取分离高纯度、具有活性的脑线粒体是进一步深入研究线粒体功能变化的关键[5-6].脑组织内含有的脂类很多,用一般传统的蔗糖-差数离心法提取脑线粒体,往往得不到大量高纯度的线粒体,因而限制了许多研究,经比较作者发现美国GENMED(杰美)公司的试剂盒可以达到要求,但说明书仅笼统地作了介绍,在实际的实验操作还存在诸多不便.本实验室经过多次实验,对杰美公司的试剂盒说明书所介绍的操作步骤加以改进,摸索出了一套行之有效的提取分离、保存高浓度小鼠脑线粒体的方法,即组织匀浆法分离裂解脑线粒体的方法,现将具体的操作步骤介绍如下.
-
解析免疫组化实验中手工操作失误导致不良结果及对策分析
免疫组织化学技术(immunohistochemistry)是由免疫学和传统组织化学相互结合发展而来的一类实验技术,其是利用抗原(antigen)和抗体(antibody)间特异结合的原理,对组织片或细胞标本中的某些多肽和蛋白质等大分子物质进行原位的定性、定位或定量研究的技术,简称免疫组化[1,2]。随着免疫学、免疫化学和组织化学的不断发展进步,以及显微镜的更新进步,免疫组化技术也取得了长足发展,越来越多地渗透到医学及生命科学的各个领域。免疫组化种类很多,按照标记物的不同分类,可分为免疫荧光技术、免疫酶组织化学技术、免疫胶体金组织化学技术、亲和免疫组织化学技术四类,常用的是亲和免疫组织化学技术。因各类技术基本原理相同,使得不同类实验步骤大致相近,但因每一类技术的独特性,其操作步骤本身又都具有其特定性。免疫组化实验步骤繁琐,从取材、固定、组织处理、制片到抗原修复、染色步骤繁多,涉及的试剂至少十种,周期长,而且每个环节环环相扣,看似简单的实验操作,却往往不能得到理想的实验结果。本研究汲取多年科研工作中及培养研究生进行免疫组化技术操作中发现的一系列操作失误及所造成的不良后果进行分析总结如下。
-
实验应激致小鼠福利受损及音乐干预的效果
目的 探究常规实验操作对动物福利的损伤程度以及音乐干预的效果.方法 采用3周龄雄性ICR小鼠,实验操作组分别给予保定(E-r)、灌胃(E-g)、腹腔注射(E-p)和眼眶静脉丛采血(E-o)处理,音乐干预组采取相同处理后给予1h音乐干预(M-r,M-g,M-p,M-o).连续处理7d后,测定与福利相关的神经内分泌、免疫、生化、生长指标和饲料能效比.结果 ①与对照组相比,实验操作四组体增重和饲料能效比均显著降低;E-r组TG、HDL-C、WBC、IL-2、β-EP和脾脏、胸腺指数均显著降低,CORT、ACTH、EPI显著升高;E-g组的TG、WBC、IL-2和β-EP显著降低,CORT、ACTH和EPI显著升高;E-p组IL-2显著降低,CORT、ACTH和EPI显著升高;E-o组脾脏指数和WBC显著降低,CORT显著升高.②与实验操作组相比,M-r组体增重、饲料能效比、脾脏指数、IL-2显著升高,CHOL、CORT、ACTH和β-EP均显著降低;M-g组WBC显著升高,CORT显著降低;M-p组WBC显著降低;M-o组饲料能效比显著升高.结论 四种常规实验操作均对小鼠的健康福利造成了不同程度损伤,而音乐干预能够改善小鼠的操作应激和福利损伤程度.
-
我国实验动物专业人才培养的回顾与展望
1实验动物从业人员的培训和教育工作的回顾1.1从业人员的技术培训为迎合实验动物科学发展需要,1983~1985年,国家科委委托江苏农学院办了两期全国实验动物科技专业人员进修班;1985年,委托中国医学科学院实验动物研究所、上海生物制品所等单位举办了悉生动物饲养管理人员技术培训班;卫生部、农业部、中国科学院、国家医药管理局以及各地方实验动物工作主管部门和单位都举办了各种实验动物专业人员培训班,使有关人员从实验操作到基本理论都得到了提高.
-
实验操作禁忌及技巧
实验安全是实验操作的基本要求,有关实验安全的规则应严格遵守.现根据笔者几十年来的实验室经验,总结整理出一些实验操作禁忌及技巧,特供参考.