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缺血预处理对大鼠肝移植早期的保护作用
缺血预处理(ischemic preconditioning,IPC)可调动机体内源性保护机制对组织或器官提供保护作用,越来越多地引起人们的关注[1].本研究采用大鼠原位肝移植动物模型探讨IPC对肝脏及补体的作用.
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苦参碱对大鼠原位肝移植冷缺血再灌注中肝窦内皮细胞损伤的影响
目的:探讨苦参碱对大鼠原位肝移植冷缺血再灌注中肝窦内皮细胞损伤的保护作用及其机制方法:本实验采用大鼠原位肝移植模型,供肝保存5 h,224只大鼠随机分为对照组、小剂量治疗组、大剂量治疗组和假手术组,分别检测移植术后1、2、4 h血透明质酸(hylluronic acid,HA)及肝组织细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的含量,并观察肝血窦内皮细胞形态学、肝功能及各组大鼠术后1 wk生存率的改变.结果:与对照组比较,两治疗组术后各时点的透明质酸和细胞间黏附分子-1表达均显著降低,肝血窦内皮细胞形态也发生改善,且两治疗组大鼠术后肝功能和1 wk生存率显著提高,而两治疗组间各指标比较均无显著差异.结论:苦参碱对大鼠原位肝移植冷缺血再灌注中肝血窦内皮细胞损伤具有保护作用.
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改良Kamada法大鼠原位肝移植模型的建立
大鼠原位肝移植是进行肝移植基础研究的基础.目前手术方法主要是由Kamada等[1]报道的肝上下腔静脉(suprahepatic vena cava,SVC)缝合加肝下下腔静脉(infrahepatic vena cava,IVC)和门静脉(portal venae,PV)袖套吻合术式与Miyata等[2]报道的三套管法.SVC缝合能够达到通畅的血流动力学效果,更加符合生理.本实验在Kamada法的基础上对供肝获取和胆道重建方法作了部分改进,经过36次预实验操作,建立了稳定的实验模型.
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一氧化氮在大鼠肝移植急性排斥反应中的免疫学监测作用
本文通过建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型,探讨了NO在其中的作用.
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VEGF在大鼠原位肝移植急性排斥反应中的表达研究
目前从血管内皮细胞和炎症反应相互作用横向联系角度来进一步探讨其机制的研究还非常罕见.参与移植器官急性排斥反应过程的细胞因子有多种,但血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)起着介导免疫炎症反应和血管新生相互作用.材料与方法1.动物模型与分组:采用经典的二袖套法建立近交系DA(RT1a),LEW( RT11)原位肝脏移植急性排斥反应模型,进行大鼠原位肝移植.48只大鼠分2组:对照组24只,LEW( RT11 )-DA(RT1a)大鼠间移植为同系移植耐受(syngeneic OLT,OLTS),实验组24只,DA( RT1a)-LEW( RT11)大鼠间移植为同种异体移植急性排斥(acute allograft rejection OLT,OLTR).对照组和实验组均按移植术后1,3,7天分亚组,每个亚组8只大鼠.
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大鼠原位肝移植的手术技巧初探
尽管大鼠原位肝移植的术式已建立多年[1],然而此领域的研究报道并不多见,原因之一在于手术难度偏大.我们自1995年4月始,重新开展大鼠原位肝移植的实验研究[2].现将手术体会总结如下:
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天津市2000年医药卫生科研进展
一、中国医学人参皂甙是人参的重要有效成分,对血液系统的作用,除能改善血液的流变性、降血脂、抗动脉粥样硬化外,还可促进骨髓DNA、RNA、蛋白质及脂质的合成.脐血富含造血干/祖细胞,是髓外造血细胞的主要来源,在治疗血液病、难治性贫血、重症免疫缺陷病和实体瘤方面均显示了广阔的前景,天津市血液中心采用体外半固体培养法和流式细胞技术,观察了人参皂甙对脐血细胞造血功能的影响.结果显示,人参皂甙可以刺激脐血造血干/祖细胞形成集落,同时与Epo、BPA、GM-CSF具有协同作用.人参皂甙对脐血细胞的细胞周期无影响,可抑制脐血细胞凋亡,该作用与PKC系统激活有关.由于肝的保存和再灌注损伤,大约15%~30%的患者出现移植后的初无功能,成为肝移植后的主要死亡原因之一.因此,对于肝缺血/再灌注损伤的研究,已成为当代外科重视的课题.天津市第三中心医院通过建立大鼠原位肝移植后肝缺血/再灌注损伤模型,并行趋化因子MIP-2表达情况检测,证实在肝缺血/再灌注损伤中mRNA及血浆蛋白的高表达并与中性粒细胞浸润、肝损伤程度之间,具有正相关关系及其对中性粒细胞的趋化作用.该研究同时观察了预防肠源性内毒素血症所用的承气方剂,对上述病理变化的预防作用,为防治肝缺血/再灌注损伤提供了理论依据.
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雷公藤多甙对大鼠原位肝移植急性排斥反应的影响
目的探讨雷公藤多甙(TⅡ)对大鼠肝移植术后急性排斥反应的抑制作用和机制.方法用"二袖套法"建立Wistar →SD大鼠原位肝移植模型,分对照组(n=12)和TⅡ治疗组(n=13),移植术后第7 d两组各杀死部分大鼠,测肝功能、肝组织病理和脾淋巴细胞IL-2活性,其余大鼠留作观察存活时间.结果术后第7 d,TⅡ组肝功能损害和移植肝病理急性排斥反应程度轻于对照组,IL-2活性低于对照组.TⅡ组大鼠术后存活时间比对照组明显延长.结论 TⅡ可明显延长肝移植术后存活时间,减轻急性排斥反应程度.
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雷公藤多甙对大鼠原位肝移植排斥反应的治疗作用
目的:研究雷公藤多甙对大鼠肝移植诱导自发耐受过程产生的影响.方法:以SD→Wistar大鼠同种原位肝移植为模型,观察雷公藤多甙对大鼠原位移植肝脏排斥反应强度、浸润细胞变化及细胞凋亡的改变.结果:雷公藤多甙组排斥反应减弱,肝脏内浸润细胞明显减少.雷公藤多甙组肝脏内凋亡细胞记数明显高于单纯肝移植组,并且以间质细胞为主.结论:雷公藤多甙治疗后移植肝脏通过诱导间质中浸润细胞凋亡发挥保护移植脏器的作用,雷公藤多甙在大鼠肝移植后近期不仅全面移植了受体的免疫反应状态,而且还加快了免疫耐受状态的诱导.
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大鼠原位肝移植模型制作体会
目前大鼠原位肝移植已被广泛应用于肝移植术后免疫学、缺血-再灌注损伤及脏器保存效果等研究.我们根据Kamada[1]及张文海[2]等报告的双套管法对肝移植模型的制作加以改进,效果较好.
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大鼠原位肝移植模型制作的进展
稳定的肝移植动物模型是肝移植实验研究的基础,特别是大鼠原位肝移植模型(rat orthotopic liver transplantation model,ROLTM),是为常用的一种.本文对近十余年来国内外大鼠原位肝移植模型制作方面的进展进行综述.
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人IL-10逆转录病毒载体的构建及对大鼠原位肝移植存活期的影响
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大鼠原位肝移植动物模型制作
自1963年Starzl实施世界上第一例人体肝移植以来,历经近半个世纪发展,肝移植已成为治疗终末期肝病的有效手段,但目前仍有许多问题等待解决,例如供肝短缺、器官保存、排斥反应等等[1-3].动物器官移植实验研究为解决上述问题提供了有效手段,其中以大鼠为代表的小动物移植在器官移植实验研究领域中占有举足轻重的地位[4-5].我们以Kamada介绍的"套管法"建立500例经典大鼠原位肝移植动物模型,并总结在供体和受体手术中的手术要点.
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术前营养状态影响原位肝移植存活率的实验研究
大鼠原位肝移植是冷保存、缺血再灌注以及移植排斥等多项肝移植基础研究的重要模型手段.然而营养状态对供肝造成的内在影响,并由此是否会影响术后存活率,在国内尚无研究报道.
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大鼠原位肝移植动物模型研究进展
大鼠原位肝移植动物模型是研究器官保存、肝脏缺血再灌注、免疫抑制剂、移植排斥反应及免疫耐受机制等方面常采用的动物模型.它与普通大动物相比,有许多优点:①可以应用显微技术及套管技术,建立一个稳定可靠的实验模型;②可以提供选择有大批基因型明确的纯系大鼠;③单克隆技术的发展,能鉴定大鼠的淋巴细胞亚型,及明确其在排斥反应,免疫耐受中的作用和转归;④对大鼠MHC系统及移植免疫中作用认识在不断提高;⑤大鼠繁殖快,成本低,不易被细菌感染;⑥术后并发症与大动物相比基本相同.
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大鼠原位肝移植受体手术处理技巧
大鼠原位肝移植是一个技术要求比较高的显微外科手术。在具备质量良好[1]的供肝以后,如何将供肝顺利地植入受体就显得非常重要。 一、良好的显露可以为供肝的顺利植入创造条件。固定四肢,背部垫高2.0~3.0cm ,头部垫枕,高约1.0cm,取斜坡体位,略呈反弓状,于中上腹作一正中切口,用爱丽斯钳夹住剑突向头侧翻转并固定,钳的高度要适当,避免压迫大鼠胸廓影响正常呼吸。然后将位于右上腹肝下的小肠提出腹腔,用浸过生理盐水的纱布包裹,放置于左下腹壁,便于以后行肝下下腔静脉吻合。肝上下腔静脉位置较深,范围较狭窄,吻合有一定难度,我们在大鼠左侧设置一悬吊装置,使Satinsky钳向头侧翻转,并略向腹部切口外提起,充分显露肝上下腔静脉后壁,同时将深部吻合变成浅部操作,加快了吻合速度。
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研究针刺肝俞对大鼠原位肝移植急性排斥反应的影响
目的:探讨针刺肝俞对大鼠原位肝移植急性排斥反应的影响.方法:建立肝移植急性排斥模型,80只模型大鼠按随机数字表法分为对照组(生理盐水组)、治疗A组(针刺肝俞组)、治疗B组(他克莫司组)、治疗C组(针刺肝俞+他克莫司组),每组20只.治疗A组针刺肝俞穴,1次/d,每次20min;治疗B组给予他克莫司0.05 mg/(kg·d)灌胃,1次/d;治疗C组给予他克莫司和针刺肝俞.观察各组大鼠生存率及生存时间,术后第7天取腔静脉血检测肝功能各项指标[总胆红素(TBiL)、结合胆红素(DBiL)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)及谷氨酰转肽酶(GGT)].结果:与对照组相比,治疗各组的大鼠术后存活时间明显延长,肝功能各项指标均明显下降(P<0.05);与治疗A组比较,治疗B和治疗C组的大鼠术后存活时间明显延长,其肝功能指标也均显著下降(P<0.05);与治疗B组比较,治疗C组的大鼠术后存活时间明显延长,其肝功能各项指标明显下降(P<0.05).结论:针刺肝俞能有效地减轻大鼠肝移植急性排斥反应,提高大鼠术后生存时间,其可应用于临床抗肝移植急性排斥反应治疗.
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大鼠原位肝移植术中胆道重建方法的改进
大鼠原位肝移植模型是肝移植实验研究中常用的动物模型.目前,"二袖套法"肝移植模型已经成为标准术式[1].在胆总管直径较细的情况下,常规的胆总管重建方法的插管难度较大,而反复插管容易使胆总管撕裂,导致插管失败和术后胆道并发症.本实验在大鼠原位肝移植动物模型中采用改进的胆总管单支架管方法进行胆道重建,报告如下.
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"开放灌注四牵三缝二横一拉"法行大鼠原位肝移植
Kamada等创建的双袖套法是进行大鼠原位肝移植的经典方法,其难点在于要充分显露手术野、快速高效地进行肝上下腔静脉吻合,有不少学者对双袖套法进行了改进[1,2],我们采用"开放灌注四牵三缝二横一拉"法行大鼠肝移植,取得了较好的效果.
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大鼠原位肝移植急性排斥模型的建立
我们以Lewis大鼠作为供体,BN大鼠作为受体,建立大鼠原位肝移植急性排斥的动物模型. 一、材料和方法 1.材料:健康雄性Lewis(RTl1)大鼠体质量200~220 g,作为供体;健康雄性Brown,Norway(BN,Rt1n)大鼠体质量220~250 g,作为受体.主要试剂:大鼠白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-10、干扰素(IFN)-γ和酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒均购自美国R&D公司.