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大动物高级别生物安全实验室设计建设要点
第二次世界大战结束后,美国出于其全球战略考虑,对各类致病微生物均表现出浓厚的研究兴趣.然而在普通实验室进行致病微生物的研究不可避免的会发生实验室感染和泄漏事件.
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成年猪胰岛分离纯化方法的改良
目的:改良成年猪胰岛分离纯化技术,以优化胰岛制备方法.方法:采用体、尾部区段猪胰腺胰管内灌注复合胶原酶震荡消化(胶原酶V+DNA酶)和改进的Dextran不连续密度梯度离心法分离纯化猪胰岛,并进行生物学活性测定和形态学观察.结果:胰腺被消化组织平均15±3.4 g,消化后胰岛获得量4 130±976 IE/g胰腺组织.纯化后胰岛获得量为2 320±669 IE/g胰腺组织,胰岛纯度80%左右.胰岛素释放试验结果显示分离纯化后胰岛功能良好.病理切片,HE染色显示细胞团结构完整,细胞核清晰可见,胞质丰富.结论:经本方法分离纯化获得的猪胰岛具有较高的产量和纯度、结构完整、功能良好,可满足大动物移植实验和临床移植的需要.
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犬、猪、羊冠状动脉心房支分布的血管铸型比较
大动物冠状动脉心房支及其分布范围的研究,特别是对比分析犬、猪、羊心脏冠状动脉心房支分布及其几何形态学数据,对于选择合适的大动物模型,确定有效的冠状动脉置管部位,有效灌注并获得理想分离锁定区域的心房肌细胞,具有非常重要的现实意义.
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小切口二尖瓣腱索拉伤联合冠脉回旋支Ameroid环植入建立小型猪缺血性二尖瓣返流模型
目的:探索一种简便、稳定、均一的建立大动物慢性IMR模型的方法。
方法:12只西藏小型猪,体重20~25 kg,雄性。动物术前禁食12~16 h,常规麻醉(氯胺酮35 mg/kg,地西泮1.5 mg/kg),行气管插管并接呼吸机。于左侧腋后线水平第2-3肋间开胸,暴露左心耳,利用小切口自制拉钩定位拉伤二尖瓣后叶腱索联合冠脉左回旋支Ameroid环植入建立小型猪IMR模型。分别在术前、术后即刻、1周、2周、4周和8周和12周通过心电图、血清学、冠脉造影、超声心动图、核磁共振检查对动物模型进行评价。 -
心率与心血管病危险性
人们早已发现心率较快的小动物寿命较短,而心率较慢的大动物,寿命较长.这一心率与寿命负相关现象,除人类外存在于所有哺乳动物.人类的平均心率为70次/min左右,其预期寿命为80岁.分析提示,如人类平均心率由70次/min降低到60次/min,可使预期寿命增加到93.3岁.
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简易静脉转流装置在30例猪原位肝移植中的应用
大动物的原位肝移植实验是开展临床肝移植的重要动物模型,术中无肝期采用门静脉、下腔静脉至上腔静脉的体外转流是手术成功的重要保障.
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实验性大动物肝移植
近年来,随着基础理论研究的不断深入,免疫抑制治疗的不断改进,临床移植技术日趋熟练和提高,使肝移植已成为一个有实用意义的终末期肝病病人的重要治疗方法.
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钳夹法制作犬良性胆道梗阻模型
建立大动物肝外胆道梗阻与扩张模型常用的方法是将胆总管下端结扎或横断,但在进一步实验中如需恢复胆道再通就必需进行胆肠吻合术,增加了实验的难度和复杂性.我们在大量动物实验中摸索出一种新的胆管阻断方法,可以达到与传统方法同样的效果,且避免了传统方法的弊端,现介绍如下.
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小肠移植关键技术的发展
小肠移植是肠衰竭患者为理想的治疗方式.自1988年德国Deltz成功进行首例人体小肠移植以来,经过20年的发展,小肠移植的关键技术有了突破性的发展.小肠移植的患者和移植物的存活率大大提高,国际上已将小肠移植作为肠衰竭患者的常规治疗方式,而国内小肠移植仍处于临床起步阶段.我们在20世纪90年代初成功建立大动物小肠移植模型的基础上,1994年完成亚太地区第1例小肠移植,在小肠移植起步阶段的环孢霉素A时代取得了存活近1年的疗效,成为当年国家十大医药新闻之一[1],2003年我们又完成国内首例肝小肠联合移
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大动物灌注固定方法的探讨
在动物实验结束后取材过程中,为了避免抗原的损失,需要对动物进行灌注固定,由于大动物作为实验对象相对来说比较少,其固定方法 一直没有完善,本文将就大动物的灌注固定方法 做一探讨.
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普通级大动物实验设施建设体会
根据实验动物环境及设施国家标准(GB14925-2010)规定,结合公司的土建基础,综合考虑动物实验的要求,工程设计合理,施工规范.设施的各项指标均符合国家的相关标准.目前该设施总体运行良好,以下就该设施建设过程中的一些体会进行归纳.
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体外静脉转流原位肝移植
本院在完成大动物同种异体原位肝移植的基础上,于1999年1月成功地为1例肝癌患者施行了原位肝移植,体外静脉转流时间为123分钟,手术经过顺利,病理报告为肝脏透明细胞癌,现报告如下.
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巴马小型猪脑死亡模型建立的麻醉管理
脑死亡研究对阐明脑死亡后病理生理变化规律、探索脑死亡供体器官损伤机理及防护方法和缓解移植器官不足具有重要意义,有赖于建立稳定、可靠、持续时间长的大动物脑死亡模型.现将21头巴马小型猪脑死亡模型建立的麻醉管理经验总结如下:
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犬静脉注射乳化异氟醚与异丙酚麻醉的效果
挥发性吸入麻醉药直接静脉注射可引起严重的肺损伤和循环衰竭,甚至死亡[1].将异氟醚溶于20%脂肪乳剂,应用于小鼠、大鼠和猪,麻醉效果确切,而且可避免液态挥发性麻醉药直接静脉注射而导致的损害[2-4].但异氟醚在20%脂肪乳中溶解度较小,用药容量较大.本研究小组自1999年以来,将异氟醚溶入30%脂肪乳剂,并对其应用进行了前期研究[5,6],但大动物静脉注射的麻醉作用尚无定论.本研究拟观察测定Beagle犬静脉注射乳化异氟醚(8%容积比)的麻醉效果,并与临床常用的异丙酚相比较.
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核因子-κB在硫代乙酰胺所致比格犬肝纤维化的表达变化及意义
核因子-κB(NF-κB)是一个广泛存在于胞质的重要转录调控因子,在调节机体的免疫和炎症反应、凋亡调控等方面起关键作用。研究发现NF-κB与肝纤维化的关系密切[1]。硫代乙酰胺(thiacetamide,TAA)是一种弱致癌物,具有肝毒性。其诱导的肝纤维化模型简单可靠,模型成功率高[2]。比格犬为大动物,已成为目前研究用标准动物,其病理生理与人更为相似[3]。以往肝纤维化模型多以小动物小鼠、大鼠等为主,而对大动物的研究较为少见[4]。那么用TAA是否能诱导比格犬肝纤维化模型呢?其作用机制是否与NF-κB信号通路有关呢?本研究进行了初步研究,报告如下。
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幽门螺杆菌感染与胃十二指肠疾病
一、模型动物的选择用以进行幽门螺杆菌(Helicokacter pylori:Hp)实验的模型动物,分小鼠、大鼠等小动物和猴、狗等较大动物两类,前者较易饲养而且经济廉价,但胃的组织学表现多与人类迥异,且其寿命亦短.大动物虽然不易饲养,耗费亦高,但内镜与活检组织取材均易进行,而且寿命较长,宜作长期观察.
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小型猪原位肝移植术的体外静脉转流
大动物的原位肝移植实验是开展临床肝移植的重要的动物模型.我科于2001年11月至2002年4月间采用贵州小香猪行原位肝移植19次,全部行离心泵体外静脉转流,取得了较好的手术效果.
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治疗内镜新进展
经天然孔道穿腔内镜手术(natural orifice transluminal endoscopic surgery,NOTES)是指内镜经过胃或结肠腔进入腹腔施行各种手术.这一观点和技术首先由美国内镜医师在20世纪90年代末提出,作为新的热点颇受关注.但目前主要还处于对猪等大动物的实验阶段,进行阑尾和胆囊切除术和部分子宫切除术.2007年美国DDW期间,数个小组又报道了他们的新研究成果.
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中国组织工程学研究现状与未来
组织工程学(tissue engineering)从1987年正式提出到目前,在短短不到二十年中已取得了突飞猛进的发展,不仅在免疫缺陷的小动物体内构建出各种组织工程化组织,而且成功地修复了免疫功能完全的大型哺乳类动物各种组织缺损,更重要的是部分组织工程化组织已在初步的临床应用中取得了稳定而持久的疗效,在实践中从小动物到大动物到人体组织缺损修复均充分证实了组织工程技术的可行性.
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大动物准清洁系统试验研究设施探讨与实践
国内屏障系统啮齿类大、小鼠动物饲养及动物实验设施通过二十余年的努力,从布局、工艺、管理流程等诸多方面日臻完善.然而大动物饲养和动物实验设施特别是广泛应用于非临床药理、毒理学的犬、猴等设施在open system和barriersystem之间徘徊的局面.本文在中国国内首次提出了专门用于大动物饲养和实验的准清洁级系统的概念(Advanced Cleaning System)并用于客观具体的设施设计、施工和使用中.