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成年猪胰岛分离纯化方法的改良
目的:改良成年猪胰岛分离纯化技术,以优化胰岛制备方法.方法:采用体、尾部区段猪胰腺胰管内灌注复合胶原酶震荡消化(胶原酶V+DNA酶)和改进的Dextran不连续密度梯度离心法分离纯化猪胰岛,并进行生物学活性测定和形态学观察.结果:胰腺被消化组织平均15±3.4 g,消化后胰岛获得量4 130±976 IE/g胰腺组织.纯化后胰岛获得量为2 320±669 IE/g胰腺组织,胰岛纯度80%左右.胰岛素释放试验结果显示分离纯化后胰岛功能良好.病理切片,HE染色显示细胞团结构完整,细胞核清晰可见,胞质丰富.结论:经本方法分离纯化获得的猪胰岛具有较高的产量和纯度、结构完整、功能良好,可满足大动物移植实验和临床移植的需要.
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肠癌细胞BAI1基因表达的检测及其抗肿瘤作用
目的:探讨大肠癌细胞和组织中BAI1基因的表达情况及BAI1对血管和肿瘤生长的抑制作用.方法:提取大肠癌细胞总RNA,按RT-PCR试剂盒的步骤反转录成cDNA,PCR产物行20 g/L脂糖凝胶电泳分析.BAI1对血管和肿瘤生长的抑制作用应用微血管数量(MWQ)和肿瘤移植实验的方法进行.结果:大肠癌细胞、癌组织中大多数BAI1不表达或表达下降,在全部转移的淋巴结中不表达,在小鼠CC95大肠癌细胞移植肿瘤内注射Ad-hBAI1表达载体可以有效的影响肿瘤的血管生成(P<0.05),并抑制肿瘤的生长(P<0.01).结论:BAI1在肠癌细胞、组织及转移的淋巴结中表达降低,该Ad-hBAI1表达载体可抑制肿瘤新生血管的形成并抑制肿瘤的生长.
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同种异体静脉移植实验和临床研究进展
血管重建术是血管外科临床的主要治疗手段.尤其在我国静脉疾病具有很高的发病率,特别是对下肢深静脉血栓形成后综合征和原发性深静脉瓣膜病因无理想的静脉替代品多以保守治疗为主.然而,目前布-加氏综合征、上下腔静脉阻塞综合征、下肢深静脉阻塞和瓣膜功能不全多采用人工血管移植、静脉瓣成形术、自体静脉移植等.人工血管价格昂贵且易形成血栓而致通畅率低,静脉瓣成形效果亦欠佳.自体静脉因有较高的通畅率一直是首选材料.
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遗传印记在人类恶性肿瘤中的研究进展
自1984年McGrath和Surani通过核移植实验首先揭示亲代基因组对子代的不等贡献以来,遗传印记作为一种对孟德尔定律的发展与扩充,这种新的遗传现象正受到越来越多的关注。遗传印记与胚胎发育、细胞增殖和细胞分化有着密不可分的关系。印记调控一旦发生紊乱,将影响个体的发育,导致遗传性疾病甚至恶性肿瘤的发生。对遗传印记的研究有利于全面地阐明癌变的机制,并可能开发出新的肿瘤防治措施[1]。本文就人类恶性肿瘤中遗传印记的研究进展做一简要综述。
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肿瘤干细胞理论在泌尿外科学领域的研究进展
传统观点认为,肿瘤是由体细胞突变而成,每个肿瘤细胞都可以无限制地生长.从20世纪60年代,Nadler等人[1-3]进行的肿瘤细胞自体/异体移植实验都证实,并非每个肿瘤细胞都有再生肿瘤的能力,只有很少数的肿瘤细胞能再生形成肿瘤.2006年,美国癌症研究协会(American Association for Cancer Research)将肿瘤干细胞定义为:肿瘤中具有自我更新能力并能产生异质性肿瘤细胞的细胞.目前,我们认为肿瘤干细胞是肿瘤中具有干细胞特性的一类细胞,既具备高度增殖能力与自我更新能力,也具备多向分化潜能的细胞,这部分细胞虽然只占极少部分,却是肿瘤发生、发展的关键.
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肿瘤干细胞与滑膜肉瘤相关研究进展
20世纪50年代Makino等[1]通过肿瘤细胞自体移植实验发现肿瘤组织中极少数细胞具有干细胞特性能诱发新的肿瘤组织,首次提出肿瘤干细胞(cancerstem cells,CSCs)理论.该理论认为,肿瘤干细胞作为一类特殊的干细胞,具有自我更新能力和分化潜能,以及高致瘤性和耐药性的特点,可以通过分化为肿瘤细胞而产生肿瘤,即认为肿瘤干细胞是肿瘤启动、增殖生长、转移复发的根源.
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简易静脉转流装置在30例猪原位肝移植中的应用
大动物的原位肝移植实验是开展临床肝移植的重要动物模型,术中无肝期采用门静脉、下腔静脉至上腔静脉的体外转流是手术成功的重要保障.
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FasL在肝门部胆管癌免疫逃逸机制中作用的研究
FasL能触发表达细胞表面受体(Apo-1/CD95)的致敏淋巴细胞的凋亡[1].FasL介导的凋亡在耐受识别、T细胞活化诱导的细胞死亡及免疫反应终止等免疫系统的调节方面发挥重要的作用.而在眼和睾丸固有细胞中FasL的表达通过诱导浸润的前炎性免疫细胞的凋亡而介导了它们的免疫赦免.已证实在组织移植实验中FasL也可介导免疫赦免.在啮齿类动物实验中,表达FasL组织的同种移植及非免疫特赦细胞(胰岛细胞)联合表达FasL细胞共同进行的同种移植均获得成功的存活.稳定转染FasL基因的鼠肿瘤细胞的同种移植显示,FasL能导致局部的同种移植特异性的体液及细胞免疫反应的抑制.
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云芝胞内多糖抑制肿瘤血管生成和移植性乳腺癌生长的实验研究
国产云芝胞内多糖(IPPV)是从常见真菌云芝中提取的一种蛋白多糖,本实验采用BalB/C小鼠乳腺梭形细胞癌模型[1]及肿瘤诱导的皮肤血管生成技术[2],探讨IPPV对肿瘤血管生成和乳腺癌生长的作用机制。材料与方法 1. 材料: 3月龄未受孕BalB/C小鼠60只,体重22~28g及乳腺梭形细胞癌瘤株购于第三军医大学实验动物中心。云芝胞内多糖粉,由重庆市大新药业股份有限公司惠赠,批号980608。TGF-β1多抗、SABC试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司。 2. 方法: (1)实验1:肿瘤诱导的血管生成技术:取鼠20只参照Linder[3]的方法,每只鼠腰背部中间部分同一部位皮内接种106个瘤细胞,分为对照组和治疗组(IPPV 1g*kg-1*d-1,管饲给药)各10只。第5天,处死小鼠,显露注射部位。在XTL-Ⅱ型体视显微镜(×10倍)下,观察计数肿瘤结节周围的新生血管数目。(2)实验2:皮下移植实验:取鼠40只,每只鼠右腋下接种2×106瘤细胞,24h后分为对照组和治疗组(IPPV 1g*kg-1*d-1,管饲给药)各20只。第12天处死小鼠,解剖瘤体,称重,常规制片,HE染色,光镜检查及癌组织中TGF-β1免疫组化检测(SAB法,采用Gorsch的判断标准[3])。 抑瘤率=(对照组瘤重-治疗组瘤重)/(对照组瘤重)×100% 3. 统计学分析:用t检验。计数等级资料采用Wilcoxon两样本比较法。X
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几丁质-胶原蛋白膜与自体刃厚皮片联合移植的实验研究
为有效地改善创面愈合的质量,采用合理的措施修复真皮十分必要.我们将胶原蛋白与脱乙酰几丁质结合,冻干成膜后,应用低浓度戊二醛交联,制成几丁质-胶原蛋白膜,并连同自体刃厚皮片进行复合移植实验,探讨其作为真皮替代物的可行性及对创面愈合质量的影响,以期为临床提供较为经济实用的真皮替代品.
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胶质瘤生成细胞及其在胶质瘤起源中的作用
关于胶质瘤生成细胞,早在上个世纪20年代,Bailey就推测是同名的始祖细胞.到了上个世纪下半叶,随着电子显微镜技术和免疫组化技术的应用,这种推测得到了部分证实.我们在先前的胶质瘤细胞诱导分化实验中,也见到了瘤细胞由双极(梭形)向多极(星形)方向分化,星形细胞特有的标记蛋白GFAP表达增强等现象[1].有鉴于此,大多数学者认为,胶质瘤细胞是由正常的胶质细胞在特定条件下恶变而成,而且这种转化在一定条什下还是可逆的.这种观点至今仍被大多数人接受.自从在成人脑中发现了神经干细胞,且其在移植实验中有潜在致瘤性,还在胶质瘤组织中分离到了与神经干细胞类似的具多向分化潜能的干细胞之后,对胶质瘤生成细胞的研究使众多学者发生了兴趣.
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我是间谍我怕谁——人乳头瘤病毒的生存哲学
发现与命名乳头状瘤病毒(papilloma virus,PV)能广泛感染人类和动物,但有严格的物种特异性.PV的名称是根据每种PV的自然宿主而命名的.Shope于1933年从棉尾兔里发现了第一个乳头瘤病毒,他将病毒进行皮下移植实验,发生浸润性鳞癌.人乳头瘤病毒(Human Papillomavirus,HPV)首先由于1949年由Strauss在电镜下从寻常疣的浸出液中观察到病毒颗粒.1968年,Dunn等进一步证明,人生殖器疣组织内有病毒颗粒存在.
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亚洲存活长"换心人"度过"15岁"生日
新闻背景:早在1956年,著名外科专家赵士杰教授创建了哈医大二院心胸外科,成功实施了狗头移植实验的研究,并获得移植后存活5天零4小时的国内好纪录,从此开辟了我国器官移植领域的先河.
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为何微囊包裹胰岛移植在无过度纤维增生因素时仍会失败
通过动物移植实验,观察并分析了可能引起微囊包裹胰岛移植失败的各种因素 .
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猪原位肝移植围手术期肝功能的变化
猪的解剖、免疫特点与人较为接近,是原位肝移植实验的理想对象,因为种属原因,其术后长时间存活较犬及大鼠更为困难.肝移植术供肝缺血/再灌注损伤综合征是临床较为关注的问题[1-3].本院2000年5~7月开展了15只猪原位肝移植,其中有4只存活时间较长(长达67d).本文就肝移植术后血液动力学及肝功能变化结合本研究结果,探讨临床肝移植再灌注损伤的特点及其防治,为临床提供依据.
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肝移植手术护理配合
肝移植是治疗终末期肝脏疾病的主要治疗手段,常使用经典式肝移植(piggy back liver transplantation,PBLT),即切除病肝及肝后下腔静脉,于原解剖位置上重新置入一个新的肝脏.随着器官移植技术的迅速发展,肝移植手术已在各地普遍展开.我院于1998年开始在10例猪肝移植实验演练的基础上,进行了人体背驮式肝移植手术7例.现将手术配合总结如下.
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视网膜色素上皮细胞的培养和保证
视网膜色素上皮(RPE)细胞移植是近年来发展起来的一项新的医学科研技术,本研究首次在分离兔RPE细胞时应用了酶的二步消化法分离了兔RPE上皮与神经上皮,Bruch膜之间的插入连接,这种方法与机械分离法、冷冻法相比较,避免了RPE细胞完整性的破坏,细胞收获量大,体外生长旺盛,细胞存活率高,为在细胞及分子生物学水平上深入探索RPE细胞的生理生化特性及视网膜色素变性,光损伤等各种眼疾病机制的探讨和防治提供了研究基础.同时为建立细胞库奠定了基础,当应用于视网膜移植实验时,可不受时间、条件、供体来源的限制,为将来临床RPE细胞移植开拓了广阔前景.
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脂肪移植后皮下组织改变的研究
Vander Menlen在1889年报道了第一例关于游离脂肪移植在临床上的应用,之后一段时间关于脂肪移植的研究主要集中在把脂肪组织当作一种填充物,如何改善轮廓、增加脂肪细胞的移植成活率和增强其移植后的整体与长远效果.如今Ali Mojallal等学者发现,在手术区域自体脂肪注射移植不但能起到填充的作用而且能产生皮内胶原含量增加和真皮层增厚的皮肤改善效应.然而至今为止仍然不明确脂肪移植能够使皮肤质地产生改善的原因,本文通过皮下脂肪注射移植实验,探究移植脂肪对皮肤组织如何产生改善作用.
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大鼠原位肝移植动物模型制作
自1963年Starzl实施世界上第一例人体肝移植以来,历经近半个世纪发展,肝移植已成为治疗终末期肝病的有效手段,但目前仍有许多问题等待解决,例如供肝短缺、器官保存、排斥反应等等[1-3].动物器官移植实验研究为解决上述问题提供了有效手段,其中以大鼠为代表的小动物移植在器官移植实验研究领域中占有举足轻重的地位[4-5].我们以Kamada介绍的"套管法"建立500例经典大鼠原位肝移植动物模型,并总结在供体和受体手术中的手术要点.
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肝细胞移植实验及临床应用研究
肝细胞移植(HCT)是20世纪70年代发展起来的一项细胞工程技术,和原位肝移植(LT)相比,HCT具有移植技术简单、供体肝细胞保存方便、价格相对低廉和一个供体可以给多个受体提供肝细胞等诸多优点.