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十溴联苯醚暴露对人胚胎干细胞分化潜能的影响
目的 探讨十溴联苯醚(BDE-209)暴露对人胚胎干细胞分化潜能的影响.方法 分别将对数生长期未分化的人胚胎干细胞FY-hES-10细胞暴露于含有终浓度为0(溶剂对照)、1、10和100 nmol/L BDE-209的培养基中培养96h后,采用悬浮法培养拟胚体(embryoid body,EB)自发分化10d,实时荧光定量PCR检测EB中OCT4、内胚层标志基因AFP、外胚层标志基因PAX6、中胚层标志基因SMA及氧化应激相关基因HIF1a、HIF2a和SOD1基因的表达,并测定SOD活性.结果 与对照组比较,各剂量BDE-209暴露组FY-hES-10细胞EB分化10d OCT4、SMA、HIF1a和HIF2a表达水平均较高,而AFP、PAX6、SOD1表达水平均较低,差异有统计学意义(P<0.05).且随着BDE-209暴露剂量的升高,FY-hES-10细胞分化10d EB中OCT4的表达水平均呈上升趋势,SOD1基因的表达水平呈下降趋势.同时BDE-209暴露后FY-hES-10细胞分化10d EB中SOD活性降低.结论 BDE-209可能通过影响早期胚胎的分化潜能从而产生发育毒性.
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神经干细胞与颅脑创伤的研究进展
长期以来,人们普遍认为中枢神经系统的神经细胞的发生在出生前不久或出生后不久就停止了,成年中枢神经系统的神经细胞没有再生能力,但是近年来研究发现成年哺乳动物的中枢神经系统中存在神经干细胞(neural stem cells,NSCs),它是中枢神经系统中保持分裂和分化潜能的细胞,它具有增殖和多向分化的潜能,在移植部位分裂增殖,并在局部微环境的作用下分化成相应的细胞来补充替代受损的细胞,恢复中枢神经系统的正常结构和功能.随着对神经干细胞及其相关领域广泛深入的研究,神经干细胞对中枢神经系统损伤后功能修复作用愈来愈引起人们重视,本文就此研究予以综述.
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干细胞研究
干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞.它具有自我更新能力(Self-renewing),能够产生高度分化的功能细胞.干细胞按照生存阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞.在胚胎的发生发育中,单个受精卵可以分裂发育为多细胞的组织或器官.在成年动物中,正常的生理代谢或病理损伤也会引起组织或器官的修复再生.胚胎的分化形成和成年组织的再生是干细胞进一步分化的结果.胚胎干细胞是全能的,具有分化为几乎全部组织和器官的能力.而成年组织或器官内的干细胞一般认为具有组织特异性,只能分化成特定的细胞或组织.
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神经干细胞诱导分化的研究进展
长期以来人们一直认为人脑的神经元缺乏再生能力,如遇损伤,失去的神经细胞是永久性的,它只能由胶质细胞所替代,这使得中柩神经损伤后的治疗与恢复非常困难.然而,随着研究的进一步深入,这一传统认识已被打破.1992年,Reynolds和Richards先从成年鼠的纹状体和海马中分离出能够不断增殖并具有分化潜能的细胞群落,提出了神经干细胞(neural stem cell,NSC)的概念.此后10年间,神经干细胞的研究成为当今生命科学的研究热点之一,从神经干细胞的分离、体外培养,到移植治疗神经系统疾病,都取得了较大发展.
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胚胎干细胞源表皮样干细胞分化潜能的初步研究
目的探讨胚胎干细胞(ES)源表皮样干细胞的分化潜能,为研究其分化的调控及寻找新的皮肤组织工程种子细胞奠定基础. 方法将Hoechst33342标记或未标记的小鼠ES细胞,与人羊膜共培养4 d,诱导其定向分化为表皮样干细胞克隆,胰酶消化后移植于裸鼠皮下,10、20、30和45 d,对移植后细胞的分化进行形态学和免疫组织化学观察分析. 结果 10~20 d后,标记的细胞可分化为由单层或复层上皮样细胞构成的管状或泡状结构,它们分别呈β1整合素、CK19、CK15、PK、套膜蛋白(involucrin)和CEA阳性;移植45 d后,可见角化复层扁平上皮、皮脂腺样、汗腺样和毛囊样等组织结构. 结论小鼠ES源表皮样干细胞具有分化为角化复层扁平上皮和毛囊样、汗腺样和皮脂腺样等结构的潜能.
关键词: 胚胎干细胞 表皮干细胞 胚胎干细胞源表皮样干细胞 分化潜能 小鼠 -
两种人羊膜细胞的表型鉴定和分化潜能测定
本研究旨在分离、培养和表型鉴定两种人羊膜细胞并分析其多向分化潜能.羊膜中可分离出来源于外胚层的羊膜上皮细胞和来源于中胚层的羊膜间充质细胞.用流式细胞术和免疫荧光法对其进行表型鉴定,同时用免疫荧光法分析其多向分化潜能.结果表明:两种人羊膜细胞阳性表达HLA-A,B,C和间充质干细胞的标志( CD29,CD73,CD44,CD59,CD90,CD105,CH166),不表达造血干细胞的标志(CD31,CD34,CD45,HLA-DR),弱表达协同刺激分子( CD40,CD40L,CD80,CD86),且这些表型的表达量在第3-7代都维持稳定.免疫荧光法显示羊膜上皮细胞表达角蛋白19,不表达波形蛋白,而羊膜间充质细胞则相反.对其多向分化潜能测定显示,羊膜间充质细胞更好地向心肌细胞分化,而羊膜上皮细胞更好地向神经细胞分化.结论:从羊膜中可分离出羊膜上皮细胞和羊膜间充质细胞,两种细胞的表型相似,多向分化潜能却不同.羊膜上皮细胞具有更好的外胚层分化潜能,而羊膜间充质细胞更好地向中胚层分化.此结论对细胞治疗有很好的指导作用.
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全球干细胞研究发展趋势与格局分析
在各国政府的推动下,再生医学研究在近年获得巨大发展,干细胞(stem cells)作为再生医学具活力的研究领域得到非常快的发展。干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞,可以作为肿瘤、移植和心血管疾病及其他人类疾病资源的研究或治疗,干细胞在生命科学、新药试验和疾病研究这三大领域中具有巨大研究和应用价值,现已广泛应用于医药再生细胞替代治疗和药物筛选等领域[1],成为世界关注和研究的焦点。
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自体骨髓衍生干细胞动员:骨坏死干细胞疗法新希望
干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞.骨髓衍生干细胞(bone marrow-derived stem cells,BMSC)不仅可以向多种组织细胞分化表现出形成不同细胞的可塑性,还具有广泛的迁移现象,参与各种组织的修复和再生.骨坏死是骨科疑难病症之一,其发病机制尚未明确,目前提出的有骨内高压学说、脂肪栓塞学说、微血管内凝血学说等.
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临床用间充质干细胞的质量控制研究
干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞.间充质干细胞(MSCs)是属于中胚层的一类多潜能干细胞,主要存在于结缔组织和器官间质中,如骨髓、脂肪、脐带、羊膜组织,间充质干细胞具有强大的增殖能力和免疫调节功能,在适宜的体内或体外环境下具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力.间充质干细胞由于具备多向分化和免疫调节功能,因此在治疗一些退行性和自身免疫性疾病等方面具有广阔的临床应用前景.
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成人骨髓来源间充质干细胞对伴刀豆球蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤的影响
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一群来自中胚层的具有强大自我更新和分化潜能的成体干细胞,因其兼具可跨越个体及种属的免疫调节特性,而在组织再生及免疫损伤修复领域被视为重要的种子细胞[1].
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脂肪来源干细胞-组织工程学的新亮点
脂肪来源干细胞( Adipose derived stem cells,ADSCs)是来源于脂肪组织,具有多向分化潜能的干细胞群。它贴壁生长,显微镜下呈长梭形。没有特定的表面标记物,除了CD45以外,与骨髓间充质细胞具有相同的表面抗原。经特定条件诱导,ADSCs有分化为脂肪、骨、软骨、神经、血管内皮等多种器官或组织的细胞的潜能,经免疫组化、RT-PCR技术、镜下观察及染色等方法可鉴定ADSCs具有该种器官或组织细胞的结构和功能。因此,常用作组织工程的种子细胞进行人工器官的再造或用作细胞治疗,来解决软骨组织工程、神经与皮肤的创伤和脂肪移植等临床方面的问题,并参与促进各种损伤的人体组织修复和再生。近年来,ADSCs已逐渐成为国内外新的干细胞移植的种子细胞来源。本文结合近年来的相关研究,就ADSCs的生物学特性、分化潜能与鉴定方法,国内外的研究进展、本实验室的工作积累及研究意义和所存在的问题等方面进行了综述。
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大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养与多向分化鉴定
目的::建立体外分离、培养及纯化大鼠骨髓间充质干细胞( mesenchymal stem cells, MSCs)的方法,并对细胞进行形态学观察、表面标志物鉴定及分化潜能检测,为大鼠MSCs 进行细胞移植治疗脑损伤的研究奠定基础。方法:用全骨髓贴壁培养法分离、培养、纯化大鼠MSCs,倒置相差显微镜进行形态学观察,流式细胞仪检测细胞表面标记物,定向诱导向成脂、成骨方向分化。结果:72小时首次全量换液7天后观察可见呈放射状排列的细胞集落,以梭形细胞为主,细胞规则、生长旺盛,可连续传代10代以上;取3代MSCs流式细胞仪检测,CD90呈阳性表达,CD34、CD45均呈阴性表达;细胞传代后加入成脂、成骨诱导剂定向诱导分化,油红O染色及茜素红染色均呈阳性。结论:全骨髓贴壁筛选培养法可大量分离、纯化、扩增大鼠MSCs。经诱导鉴定MSCs 具有多项分化潜能。
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骨髓间充质干细胞在临床医学中的应用
骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,MSC)是存在于骨髓中的具有高度自我更新能力和多相分化潜能的成体干细胞,又称骨髓基质干细胞、间充质祖细胞,由于取材容易、培养简便、多相分化及应用前景广泛等特点成为干细胞中研究的热点,在医学各个领域都具有研究和应用价值,目前已在多个临床科室中应用.本文对MSC在临床医学中的应用做一综述.
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应用骨髓间充质干细胞修复皮肤损伤的研究进展
机体在受到创伤刺激时,骨髓间充质干细胞会向受损部位聚集,并能够向该受损器官的组织细胞转化,从而修复受损的组织.在异体移植时,骨髓间充质干细胞的免疫抑制作用能够延长移植物的存活时间.体外实验证实人的骨髓间充质干细胞的增殖和分化潜能不受年龄因素的影响,因此我们可以在一个很宽的年龄范围内抽取自体骨髓间充质干细胞在体外扩增后进行自体移植,扩大了成体干细胞自体移植的年龄应用范围.
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肝脏干细胞研究进展
干细胞是不分化而长期生存,具有自我更新能力且保持多种分化潜能的一种细胞群.从功能上定义,肝脏干细胞(hepatic stem cell,HSC)是指在特定的条件下能增殖分化为有功能的肝脏组织的细胞.根据肝脏干细胞的存在位置,分为内源性肝脏干细胞和外源性肝脏干细胞2种.内源性肝脏干细胞存在于肝脏组织本身,是未分化的、多潜能的、具有干细胞以及肝细胞或胆管细胞标记的、非肝实质细胞的上皮细胞前体细胞,目前认为卵圆细胞和小肝细胞属于这一类.外源性肝脏干细胞,本身不存在于肝脏内,包括:骨髓细胞、胰腺细胞、胚胎干细胞、脐带血细胞等,但在特定的微环境中可以分化为肝细胞和(或)胆管上皮细胞.
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肝干细胞研究现状
肝干细胞具有双分化潜能,可向肝细胞和胆管上皮细胞分化发育;胚胎期肝干细胞来源于肝始基,成年期肝干细胞可能来源于Hering管细胞和骨髓造血干细胞;细胞间作用和细胞基质间作用对于肝干细胞的分化成熟起重要作用;肝干细胞在肝脏疾病的基础研究和临床治疗方面具有广阔的应用前景.
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心肌梗死细胞治疗的临床应用前景
近年来,冠状动脉(冠脉)血运重建策略和抗心力衰竭(心衰)药物治疗的进展改善了心肌梗死患者的急性期存活率和远期预后,但毁坏的心肌细胞和血管结构并不可逆.干细胞的分化潜能和旁分泌功能为心肌再生提供了无限的想象空间.
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大鼠胎肝干细胞的鉴定和分化研究
胚胎肝脏中含有的原始肝细胞具有成体肝干细胞的基本特性,即具有自我增殖和向肝细胞或胆管细胞分化的双分化潜能[1].鉴定潜在的干/祖细胞,主要依赖离心法或细胞表面标志来实现.经典的利用细胞表面标志实现分选方法是流式细胞分选法和免疫磁珠分选法,但肝干细胞表而标志目前尚无公认的金标准[2]且标志分选策略的代价高,限制了其在肝干细胞分选中的应用.
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硼替佐米对多发性骨髓瘤患者间充质干细胞自噬活性和成骨分化潜能的影响
成骨减低是骨髓瘤骨病的主要发病机制之一.蛋白酶体抑制剂硼替佐米(Bzd)作为一种新型的生物靶向治疗药物对多发性骨髓瘤(MM)有很好的疗效[1],另有研究发现,Bzd可诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向成骨细胞分化[2],但其机制目前尚不明确.自噬是广泛存在于真核生物中的生命现象,在细胞和生物体的发育和分化过程中起重要作用,但在MSCs多向分化中的作用尚未见报道.本研究检测了Bzd对MM患者骨髓MSCs自噬活性与成骨分化潜能的影响,初步探讨自噬在骨髓瘤骨病中的作用.
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干细胞移植与糖尿病免疫稳态的重建
自从干细胞自我复制和定向分化潜能被证实,干细胞移植一度成为糖尿病治疗的焦点.既往对糖尿病干细胞治疗的理论认识主要基于干细胞向胰岛素分泌细胞的定向分化能力.然而近年来人们发现,迁移入并功能整合于受损组织的供体干细胞数量太少(仅占受损组织总细胞数的0.1%~2.0%),往往无法引起生理改变[1-2];而体内试验也揭示仅有1.7%~3.0%输注的干细胞可分化成为有功能性的β细胞[3],提示干细胞移植治疗糖尿病可能很大程度上不依赖于向胰岛素分泌细胞的定向分化能力,其在调控自身免疫与过度炎症中的作用越来越受到学者们的重视,并有望成为糖尿病细胞免疫治疗的新手段.