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人谷胱甘肽硫转移酶M1文献资料
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人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的克隆及在大肠杆菌的温控表达
人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的克隆及在大肠杆菌的温控高效表达,采用RT-PCR技术从人肝脏组织总RNA中扩增谷胱甘肽硫转移酶M1基因的cDNA序列,将其插入到原核温控表达载体pBV220多克隆位点中,构建重组表达质粒,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定,并进行了温控表达,表达量约达到28.3%.人谷胱甘肽硫转移酶M1基因克隆到原核表达载体pBV220中,测序结果同Genbank中的人谷胱甘肽硫转移酶M基因序列比较,在619位点C→A,氨基酸由Pro→Thr,在528位点C→T,编码氨基酸仍为Asp.通过温控诱导,在28kDa的表达量约达到28.3%.人谷胱甘肽硫转移酶M1原核温控表达载体pBV220的构建,为毒理学、遗传药理学的研究提供了应用基础.
关键词： 人谷胱甘肽硫转移酶M1 基因克隆 温控表达
