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肠道T细胞淋巴瘤的研究进展
肠道T细胞淋巴瘤是一组异质性肿瘤.本文主要综述肠病型肠道T细胞淋巴瘤与不伴肠病的肠道T细胞淋巴瘤不同病变实体的病因学、临床病理特征、免疫表型、基因型以及诊断和鉴别诊断.二者均以肠道溃疡形成为特点,瘤细胞多为中等至大细胞性,表达T细胞标记,TCR 基因重排.但前者多见于欧美国家,中老年患者居多,以腹痛、贫血和肠梗阻为主要症状,预后较好,与麦胶病相关,瘤细胞源自黏膜上皮内 CD8(+)a/β细胞毒性T细胞.后者多见于亚洲国家,青壮年多见,以贫血、便血、B症状、肠穿孔为主要临床表现,预后差;与EB病毒高度相关,肿瘤前体细胞尚不确定.肠道T细胞淋巴瘤的其他病变实体尚需进一步定义.
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应用生物发光成像技术示踪植入的骨髓间充质干细胞
以间充质干细胞(MSC)为基础的细胞治疗已进入临床试验阶段,用于多种组织修复,而移植细胞体内存活是影响疗效的重要因素.为了体内示踪MSC,构建了萤火虫荧光素酶基因(fluc)逆转录病毒表达载体pL(fluc)SN,并筛选出稳定表达fluc的GPE+86细胞克隆.将逆转录病毒上清转染C57小鼠来源的MSC,经G418筛选后得到稳定表达fluc的MSC.将2×106个标记好的细胞注射正常骨骼肌,应用生物发光技术检测移植后不同时间细胞的存活情况.结果表明,随着时间的延长,细胞存活数目逐渐减少;移植后1天细胞死亡率高迭(43.2±11.7)%.3天后细胞存活(8.6±2.5)%,6天后仅为(5.4± 3.1)%,10天时未检测到荧光信号.结论:生物发光成像技术可用于移植的MSC体内示踪,但是即使将MSC植入正常的骨骼肌组织,大部分注入的MSC也将在短期内死亡.
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CD20阳性的T细胞淋巴瘤
近Rahemtullah等[1]研究了9例CD20阳性的T细胞淋巴瘤并复习文献报道的26例类似病例后提出,存在一类CD20阳性的T细胞淋巴瘤.9例病例中,T细胞淋巴瘤的诊断都采用免疫组织化学、流式细胞术、原位杂交和基因重排加以证实,除了明确的T细胞标记阳性外,5例为CD20的一致强阳性,4例为弱阳性或部分阳性表达.对于T细胞淋巴瘤为何会表达CD20,提出了两种假说.
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量子点在临床相关研究中的应用
量子点是一种新型小分子荧光染料,具有独特的光学特性,使其在临床医学研究方面具有广泛的应用.如肿瘤的研究、金属离子含量的测定、微生物的检测以及靶向药物开发治疗方面,对疾病的研究、临床的诊断和治疗都具有很大的潜在应用价值.
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Gd-DTPA标记骨髓间质干细胞在脊髓损伤模型中的磁共振示踪研究
目的 探讨用钆-二乙烯三胺五乙酸(Gd-DTPA)标记大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)用于细胞示踪的可行性.方法 用jetPEITM-FluoF结合Gd-DTPA形成顺磁性颗粒,标记MSCs,电镜观察标记情况,并用MTT法测定标记细胞的活力.对标记的细胞进行体外和大鼠脊髓内磁共振成像(MRI).结果 Gd-DTPA可高效标记MSCs,同时对MSCs生长无影响.体外及MSCs移植大鼠脊髓损伤模型MRI T1wI均显示,标记细胞呈高信号强度.结论 Gd-DTPA成功标记的MSCs在体外和大鼠脊髓组织内均可检测到明显的MRI信号强度改变.Gd-DTPA可以用于MSCs标记的MRI示踪.
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肝脏干细胞研究进展
干细胞是不分化而长期生存,具有自我更新能力且保持多种分化潜能的一种细胞群.从功能上定义,肝脏干细胞(hepatic stem cell,HSC)是指在特定的条件下能增殖分化为有功能的肝脏组织的细胞.根据肝脏干细胞的存在位置,分为内源性肝脏干细胞和外源性肝脏干细胞2种.内源性肝脏干细胞存在于肝脏组织本身,是未分化的、多潜能的、具有干细胞以及肝细胞或胆管细胞标记的、非肝实质细胞的上皮细胞前体细胞,目前认为卵圆细胞和小肝细胞属于这一类.外源性肝脏干细胞,本身不存在于肝脏内,包括:骨髓细胞、胰腺细胞、胚胎干细胞、脐带血细胞等,但在特定的微环境中可以分化为肝细胞和(或)胆管上皮细胞.
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肺原发恶性纤维组织细胞瘤3例
临床资料例1,男,42岁.咳嗽,气促3个月入院,无咳血.查体:右颈部淋巴结肿大,右上肺呼吸音弱,CT示右上肺大片不均匀软组织影,右上叶支气管截断现象,右肺门影增大,纵隔淋巴结肿大,腹膜,小网膜区广泛占位,纤支镜检,见右上支气管尖、后段淡黄新生物,0.5×0.5cm大小凸向管腔,涮片察见"低分化癌细胞",镜检为梭形细胞恶性肿瘤,免疫组化:肿瘤组织细胞波形蛋白(+),巨噬细胞标记抗原(+),溶酶体酶(+)肌动蛋白及神经细胞标记抗原(-),诊断为右上肺恶性纤维组织细胞瘤.
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平衡门电路法核素心室造影评价心衰患者左室射血分数的回顾分析
目的：探讨平衡门电路法核素心室造影（ERNA）在评价心衰患者左心室射血分数（LVEF）方面的临床分析方法。
方法：回顾性分析74例（男性51例，女性23例，年龄13-81岁，平均50.1岁）99mTc体外红细胞标记ERNA检查的心衰患者。所有患者均在72小时内接受超声心动图检查。按照超声心动图测得的左室舒张末期内径大于55 mm作为心腔扩大的参考标准，将患者分为心腔扩大组51例和不扩大组23例。ERNA检查结果与超声心动图进行比较，对重要参数LVEF进行探讨。 -
不同标记方法对大鼠骨髓间充质干细胞标记的研究
目的 观察Hoechest33342、BrdU、DAPI对大鼠BMSCs标记情况,比较其标记效果的差异性;培养转基因绿色荧光小鼠的BMSCs,观察细胞生长情况和其荧光持续时间,比较其与荧光标记后的干细胞之间的优越性.方法 贴壁筛选提取大鼠BMSCs,培养至第三代,流式细胞仪检测其表面抗原,成骨、成脂诱导后染色;Hoechest33342、BrdU、DAPI标记大鼠BMSCs,检测标记后的大鼠BMSCs增殖率,显微镜下观察其荧光持续时间;观察转基因绿色荧光小鼠BMSCs在培养的不同时间段的细胞形态、荧光持续时间以及同上边3种标记方法比较的优缺点.结果 Hoechest33342、BrdU、DAPI可用于对BMSCs的标记;BrdU标记过程较长,在前期不存在荧光猝灭缺点,标记后经过荧光免疫组化处理后可见阳性细胞,Hoechest33342、DAPI标记过程较短,荧光持续时间较长,但此过程中必须避光,对操作带来了一定的困难.3种方法标记后对细胞增殖率无影响;转基因小鼠BMSCs生长较大鼠干细胞生长较慢,其优点是不用标记且荧光持续时间较长,用于细胞追踪研究更为方便可行.结论 干细胞有多向分化的潜能,因此有很好的研究价值和应用价值,对干细胞进行标记,为干细胞迁移、归巢机制的研究提供更好的研究平台.
关键词： 绿色荧光 Hoechest33342 Brdu DAPI 细胞标记 -
嗅鞘细胞移植对急性脊髓损伤修复作用的实验研究
目的:研究嗅鞘细胞(OEG)的培养及其对大鼠脊髓挫伤加横断伤的修复作用.方法:用新生Wistar大鼠嗅球(OB)做OEG培养,OEG植人挫伤加横断伤的大鼠脊髓内(A组),设立注入DMEM培养液(B组)和单纯椎板切除(C组)的对照组.观察术后动物脊髓功能恢复情况.术后3个月取材,了解脊髓再生情况和双笨亚甲胺(Hoechst)标记的OEG在体内存活情况.结果:(1)手术4周后,BBB运动功能得分A组均高于B组.(2)在脊髓损伤区及其周围,神经纤维A组数量多于B组,均少于C组.(3)Hoechst标记的OEG大量存在于A组脊髓损伤段周围.结论:OEG移植具有明显促进脊髓挫伤加横断伤神经纤维再生和功能恢复的作用.
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脾窦岸细胞血管瘤的研究进展
脾窦岸细胞血管瘤(littotal cell angioma,LCA)是一种原发性脾脏血管性肿瘤,早是由Falk~([1])在1991年报道并命名的,因其同时表达内皮细胞和组织细胞标记,并经免疫组织化学技术和电镜证实,被认为是起源于脾脏红髓的窦岸细胞(littoal cell),故称之为脾窦岸细胞血管瘤.
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血管免疫母细胞性淋巴结病一例
患者女,81岁,因发现右腋下无痛性肿块1个月于1999年8月24日入院.体检:体温36℃,脉搏72次/min,血压136/82mmHg;全身皮肤黏膜无黄染;颌下、颈两侧、锁骨上、双腋下及腹股沟均扪及直径为0.5～1.5cm的淋巴结,质中,无触痛,活动可;右腋下可及一直径约5.0cm的实性肿块,表面光滑,界清,局部无红肿、破溃,活动可,无明显压痛,无波动感及搏动感;心、肺、腹未见异常.实验室检查:血红蛋白110g/L,白细胞25.6×109/L,中性0.62,淋巴0.33;白蛋白35g/L,球蛋白32g/L,免疫球蛋白IgG 16.1g/L,IgM 0.7g/L.B超示肝脾轻度肿大.局麻下行右腋窝肿块切除术,术中见肿块约4.5×2.5cm,呈肾形,质中,暗红色,表面光滑,与周围组织无粘连,完整切除后纵切观察:切面灰白、均匀,未见出血及坏死灶,未见钙化灶.冷冻切片示淋巴结增生,无需行腋窝清扫,结束手术.标本石蜡切片示:淋巴结正常结构破坏,分支状小血管弥漫性增生,淋巴细胞弥漫浸润,核型欠规则,有一定异型性,有丝分裂相可见.血管壁与细胞间有PAS阳性无定形嗜伊红物质沉淀(图1).免疫组化示:T细胞标记CD(++),CD45RO(++);B细胞标记CD20(-),灶性(+)(图2),CD45RA(-).术后患者恢复好,随访4年仍健在,局部无复发.
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转基因小鼠荧光神经元结构与功能之间关联的建立——膜片钳记录结合激光共聚焦三维重建
目的 在细胞水平建立神经元结构和功能之间的关联.方法 利用D1多巴胺受体表达红色荧光蛋白的细菌人工染色体(bacterial artifical chromosome,BAC)转基因小鼠制备脑片,对D1多巴胺受体荧光阳性纹状体中等多棘神经元(medial spiny neurons,MSNs)进行膜片钳电生理记录和细胞标记,再经激光共聚焦系统对该神经元进行结构的三维重建,观察MSN树突分支密度以及树突棘形态学特点.结果 (1)电生理结果提示所标记的细胞具有偏超级化的静息膜电位(-87 mV)、较小的输入电阻(16.4 MΩ)及较长的动作电位潜伏期(172ms)等典型的MSN电生理学特征.(2)三维重建结果可见细胞胞体略成圆锥体,树突呈放射状向四周发散.(3)进行树突棘重塑后发现MSNs平均树突棘长度(2.37±0.14)μm,平均宽度为(1.39±0.14)μm.结论 描述神经元功能的膜片钳数据与三维重建的细胞形态学数据相结合的方法可建立神经元结构和功能之间的关联.
关键词： 神经元 细菌人工染色体转基因技术 膜片钳 细胞标记 三维重建 -
磁共振成像及对比剂在细胞移植中的研究进展
随着细胞移植研究的不断深入,细胞移植在临床治疗中的应用逐渐增多.但不论是在科研工作还是临床治疗中进行细胞移植,都需要监测移植后细胞的命运.磁共振成像技术具有无创伤性、时间连续性等优点,是在活体上对移植细胞进行连续多时间点监测的理想方法之一.应用磁共振对比剂在体外标记细胞后将细胞移植入动物体内,可通过磁共振成像追踪移植细胞的迁移、分布并监测移植细胞的功能状态.本文就细胞移植研究中细胞磁共振成像技术及细胞标记对比剂的研究进展作一综述.
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开展干细胞标记和MR活体示踪研究推进分子影像学发展
近年来,干细胞研究领域取得了突破性进展,包括胚胎干细胞的建系和定向分化发育成功,以及成体干细胞多向分化潜能的发现.因而诞生了1个全新的领域:干细胞器官组织工程和再生医学.干细胞的临床移植治疗疾病具有广阔的前景,受到越来越多的关注.干细胞移植后,必须明确移植细胞的生存状态,患者临床症状改善的原因是因为移植细胞还是由于其他原因造成的.
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细胞核标记物5-乙炔基-2＇脱氧尿嘧啶核苷的研究及应用进展
细胞移植疗法是现代医学发展为迅速的领域之一，采用干细胞治疗技术修复退变的椎间盘，是治疗早中期椎间盘退变的理想方法[1]。为了解细胞移植后在体内的存活、迁徙、分布和转归等情况，需要依赖合适的示踪技术将细胞加以标记，以进行识别和监测。细胞核标记法是常用的示踪方法之一，5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷（5-Ethynyl-2'-deoxyuridine, EdU）是新一代细胞核标记物，近年来广泛应用于检测DNA复制、细胞增殖以及细胞标记。与传统的免疫荧光染色检测方法相比，EdU检测方法更为简单、快速、准确，且对细胞生长分化影响小[2，3]，具有良好的应用前景和发展空间。
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嗅鞘细胞移植促进急性脊髓损伤的修复作用
目的研究嗅鞘细胞(OEG)移植后在体内存活情况以及对大鼠脊髓损伤长期的修复作用.方法用新生Wistar大鼠嗅球做OEG培养,大量增殖并标记.80只大鼠,随机分为4组,每组20只.A、B、C组以250 mm·g打击T13脊髓致运动诱发电位和体感诱发电位完全消失,A组在打击区中央用尖刀横行切断脊髓;D组仅做与A、B组相同节段的椎板减压,不挫伤脊髓.A、B组在脊髓远近断端距离挫伤区边缘1 mm的脊髓中线上,深度分别为1.75、1.5、1.0、0.5 mm处,各注入200 000个OEG;C组用同样的方法注射等量的DMEM培养液;D组不做处理.术后观察脊髓功能恢复情况(BBB运动功能评分法)和体重变化.术后24周取脊髓标本,做HE染色、嗜银染色、抗神经原纤维(NF)免疫组化染色、荧光显微镜下观察Hoechst标记的OEG在体内存活情况.结果手术后4周,A、B、C组开始有运动功能恢复,术后4～24周BBB运动功能评分A、B组均高于C组(P＜0.01),16周以后BBB评分变化较小.HE染色A、B两组脊髓损伤区结构紊乱,纤维走行方向扭曲不一致,细胞数目较多,C组大鼠脊髓损伤段常有明显空洞存在,纤维含量少且扭曲.嗜银染色和免疫组化抗NF染色显示无论在损伤区还是损伤头、尾端,A、B组神经纤维数量多于C组,但都少于相同节段的D组(P＜0.01).荧光显微镜下观察到Hoechst标记的OEG大量存在于脊髓损伤段周围.术后各组大鼠均出现体重减轻.术后2周,D组大鼠体重恢复至术前重量,此后逐渐增加.术后4周,A、B、C组大鼠体重降至低,与D组(Sham组)比较差异有显著性(P＜0.01);此后,A、B组大鼠体重逐渐增加,而C组大鼠体重增加不明显;A、B组大鼠体重与C组比较差异有显著性(P＜0.05).结论OEG移植具有一定促进脊髓损伤神经纤维再生和功能恢复的作用.
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非特异性肉芽肿性前列腺炎20例的临床病理特征
非特异性肉芽肿性前列腺炎（nonspecific granulomatous prostatitis,NSGP）是一种少见的非感染性良性前列腺炎性病变。临床上无法与前列腺癌区别，诊断主要依赖前列腺穿刺活检的病理组织学检查［1］。但有时NSGP在形态上易于和低分化前列腺癌及感染性肉芽肿混淆，尤其在穿刺活检标本中。因此，NSGP的重要性已日渐受到临床和病理医师的重视［2］。我们观察研究了19例穿刺活检和1例手术切除的前列腺组织标本中NSGP的病理特征，以探讨其发病机理和主要鉴别诊断。 一、对象和方法 我院于1994年2月～2000年2月，从306例前列腺组织标本中共检出NSGP 20例，其中穿刺活检19例，手术切除标本1例，分别占同期前列腺穿刺活检标本的6.2%和手术切除标本的0.4%。20例患者的平均年龄59岁。对20例标本除复查HE切片外，部分病例因鉴别诊断需要还曾作过高分子量细胞角蛋白,低分子量细胞角蛋白,前列腺特异性抗原(PSA)，白细胞共同抗原，组织细胞标记KP-1和Mac387,S-100蛋白，T细胞标记（UCHL-1），和B细胞标记（L-26）等免疫组织化学标记。并对所有病例的临床和病理资料作系统整理。NSGP患者的临床主要表现为下尿道梗阻、排尿困难及下尿道感染症状。直肠指检能触及前列腺硬块及结节6例，体积增大中央沟消失18例。经直肠前列腺B超检查在周围带或中央带发现低回声区者16例。活检前作血清PSA检测者共16例，结果均高于正常，平均值17.3ng/ml。临床上20例患者大多因怀疑前列腺癌而作前列腺穿刺活检，其中1例患者因术前临床诊断结节性前列腺增生（BPH）而作了经尿道前列腺切除，术后病理诊断为BPH伴NSGP。
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7.0T磁共振对磁标记单细胞的成像研究
目的 7.0T MR系统对氧化铁纳米粒子标记单细胞进行体外成像,并对成像参数进行探讨.方法 3D-FLASH序列对磁标记单细胞计数,对比梯度回波序列与自旋回波序列成像差异,对比梯度回波序列不同回波时间、不同分辨率成像差异.结果 7.0T MR能对磁标记单细胞进行成像,MR图像对细胞浓度为2×103/ml的琼脂糖模型进行细胞计数为1.7×103/ml,与实际浓度一致.2D-FLASH较SE序列对磁标记单细胞导致的T2*WI信号改变明显,差异有统计学意义;3D-FLASH序列随TE时间延长T2*效应增强,但图像伪影逐渐明显;分辨率降低单细胞导致的信号缺失明显降低,在200 μm时单细胞导致的信号波动已基本接近琼脂糖背景的内源性波动.结论 7.0T MR系统可对氧化铁纳米粒子标记的单细胞进行探测,选择适合的序列、优化序列内参数可有效提高磁标记细胞的探测敏感性.
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人脐带华通胶间充质干细胞的分离培养及标记方法研究
目的:探讨从人脐带华通胶中分离培养间充质千细胞的方法,并对细胞进行标记,为细胞移植奠定基础.方法:采用组织块贴壁法分离培养人脐带华通胶间充质干细胞并进行传代,观察细胞的形态学特征,测定细胞生长曲线,通过流式细胞仪检测细胞免疫表型;用荧光染料PKH26对获取的细胞进行体外标记,观察标记细胞形态并记录其生长曲线.结果:组织块贴壁法可以成功地从人脐带华通胶中培养出间充质干细胞,并且在连续增殖传代过程中细胞形态未发生明显变化,细胞生长曲线相似;细胞能够高表达基质细胞抗原(C D29、CD90、CD44、CD105),而低表达造血干细胞抗原(CD34、CD45)和白细胞相关抗原(HLA-DR);PKH26可以标记脐带间充质干细胞,显示红色荧光,且标记细胞形态良好,与未标记细胞的生长曲线相似.结论:组织块贴壁法是一种简便有效的分离脐带间充质干细胞的方法;应用PKH26体外标记细胞成功率高、技术稳定.
