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移植冻融小鼠卵巢组织后显微及超微结构的变化
目的 探讨移植过程对冻融小鼠卵巢组织光镜结构及超微结构的改变情况,研究其对小鼠卵巢组织的影响.方法 采用4周龄小鼠全卵巢慢冻速融,并移植到同种异体小鼠肾脏被膜下,分别于移植后24 h、48 h、7 d回收移植物.卵巢组织分为新鲜组、冻融组、移植后24 h、48 h及7 d组.光镜和电镜下观察各组形态学的改变. 结果 光镜下各组小鼠卵巢各级卵泡数具有显著性差异(P<0.01),随着移植后时间的推移各级卵泡数和卵泡存活率逐渐下降;各组卵泡超微结构具有差异性,移植对小鼠卵巢卵泡和间质都有损伤,移植后48 h间质稀疏,大量红细胞渗出,组织损伤严重;移植后7 d可见有微血管生成,卵泡、细胞器及细胞骨架系统修复良好.结论 冻融小鼠卵巢随着移植后时间的推移各级卵泡数和卵泡存活率逐渐下降,组织损伤主要在卵泡和间质,以移植后48 h损伤严重;光镜结合电镜观察能更全面地评价移植过程对冻融小鼠卵巢组织的影响.
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角膜移植,给眼睛换个“镜头”
角膜移植术:手术中的“精细活”角膜移植手术,顾名思义就是把透明的角膜片来置换原先混浊或有病变部分的角膜,就像给眼睛换一个镜头,达到增加视力、治疗某些角膜病和改善外观的目的,是所有异体移植中效果好,术后排斥几率低、并发症极少的一种手术方法.
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冷冻与甘油保存鼠坐骨神经异体移植再生效果的对比研究
目的:通过比较液氮冷冻和甘油处理两种方法保存大鼠坐骨神经进行异体移植的效果,探索出一种较好的进行异体神经移植的方法.方法:取30只成年雄性SD大鼠,随机分为3组.液氮冷冻同种异体神经移植组(A)、甘油处理同种异体神经移植组(B)、自体神经移植组(C).术后分别于4周、8周和16周对移植神经行大体和光镜、电镜、电生理、轴突图像分析等检查.结果:3组中以自体神经移植组再生效果好,异体神经移植组中以甘油保存神经移植组神经再生情况优于液氮冷冻保存神经移植组.经统计学处理,神经电生理结果和轴突图像分析有显著性差异.结论:同种异体神经用甘油处理和液氮冷冻处理后,进行移植能够有效的促进神经再生,甘油保存同种异体神经为佳.
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冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植后止点转归研究
目的:比较自体骨-前交叉韧带(ACL)-骨移植和冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植重建ACL后,韧带止点的组织学和生物力学转归.方法:将日本大耳兔和新斯兰兔各60只随机分成自体骨-ACL-骨移植组和二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植组.术中及术后均不使用免疫抑制剂.术后4、8、12周分别切取ACL作大体、组织学观察和生物力学测试.结果:自体骨-ACL-骨移植组和冷冻保存骨-ACL-骨移植组在4周时止点处组织学上已有纤维组织与骨相连,但未见"潮线"形成,而在12周时两组均有潮线形成;4周拉伸时,止点处断裂分别为60%、66.7%,而8周分别为13.3%、13.3%,12周时则分别为6.7%、6.7%.结论:两组在止点处有相似的生物力学性能和组织学愈合过程.
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超低温冷冻及免疫抑制剂对异体神经移植的影响
目的:比较超低温冷冻预处理异体神经和宿主接受免疫抑制剂环孢素A(CSA)对异体移植后神经再生的影响.方法:SD大鼠80只随机分成4组.取Wistar大鼠坐骨神经2 cm为异体神经供体.A组为新鲜异体神经移植组,B组为超低温冷冻异体神经移植组,C组为新鲜异体神经移植应用CSA组,D组为自体神经移植组.术后6周、18周行大体观察、光电镜组织学观察及形态定量学分析、电生理等指标检测,来评价神经再生和局部免疫反应情况.结果:C、D两组比较,其运动神经传导速度恢复率、复合肌肉动作电位峰值恢复率、移植体再生神经纤维数量与直径、髓鞘厚度均无明显差异(P＞0.05),组织学变化相似;B组神经再生的各项指标优于A组(P＜0.01或P＜0.05),但组织学显示仍有较多单核细胞浸润,与C、D组比较仍存在差异(P＜0.01或P＜0.05).结论:超低温冷冻虽降低了异体神经抗原性,移植后神经再生仍不及宿主接受免疫抑制的异体移植.
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骨髓间充质干细胞异体移植对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用
目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)异体移植对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用.方法 全骨髓贴壁培养法获得大鼠BMSCs,流式细胞术检测细胞免疫表型,并诱导成骨方向分化.取雌性C57BL/6小鼠,随机分为3组:正常对照组、PBS组和大鼠BMSCs组,用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)35～55联合完全弗氏佐剂诱导建立EAE模型.小鼠免疫后38d和48d腹腔注射PBS或大鼠BMSCs进行治疗,神经功能评分观察各组小鼠神经功能变化.二次治疗12d后取各组小鼠脊髓、脾脏和外周血.HE染色及Luxol fast blue染色观察脊髓炎性细胞浸润及髓鞘脱失情况;脾脏制成单细胞悬液,细胞CFSE标记后10mg/L刀豆球蛋白(ConA)和MOG3s ～55刺激培养3d,观察脾细胞增殖情况.ELISA检测大鼠BMSCs移植后外周血细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素17(IL-17)含量.结果 流式细胞术显示,大鼠BMSCs第3代(P3)细胞表达抗原CD29、CD90、CD106,不表达CD45.体外诱导其能向成骨分化.小鼠发病后,大鼠BMSCs组小鼠神经功能缺损症状较PBS组减轻,评分降低.HE染色和Luxol fast blue染色结果显示,大鼠BMSCs组脊髓炎细胞浸润和脱髓鞘比同时间点PBS组减轻(P＜0.05).ConA和MOG35-55刺激培养后,PBS组和大鼠BMSCs组脾细胞增殖增加,而大鼠BMSCs组又较PBS组降低.与PBS组相比,大鼠BMSCs组血浆细胞因子IFN-γ、IL-17含量降低(P＜0.05).结论 全骨髓贴壁培养法能有效分离纯化BMSCs,大鼠BMSCs异体移植对小鼠EAE模型有治疗作用.
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二例异体手移植的病理改变
1999年9月21日,我院在同一天完成了世界第3、4例异体手移植术,获得成功, 经过1年的追踪随访,移植手功能及感觉恢复良好,临床观察无排斥反应.为调查异体移植手存活过程中的免疫排斥反应等变化,对受者的皮肤进行了为期7个月的系列追踪观察,选择性的对神经、肌肉、肌腱和骨组织等进行了病理学观察,报道如下:
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近红外线光学成像诊断微小肝癌的初步研究
目的 探讨近红外线光学成像在动物活体的皮下HepG2移植瘤的成像表现.方法 取HepG2皮下荷瘤鼠10只,应用小动物分子成像仪和非特异性探针Cy5.5对裸鼠移植瘤行近红外线光学成像(Near Infra-red Optical Imaging),以得到早期肿瘤的大小和荧光强度信息.结果 10只HepG2皮下荷瘤裸鼠中有8只肿瘤清晰成像,成像敏感度为80%,成像瘤体的平均径线为3.717 mm×2.612 mm,平均体积为15.768 mm3.其余2只受背景荧光影响而肿瘤边界显示不清.结论 近红外线光学成像具有敏感性高的优点,应用非特异性探针即可在较早期阶段发现微小肿瘤.而背景荧光干扰和成像深度有限是影响实验结果的瓶颈.
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异体角膜缘干细胞移植术的护理
目的：探讨异体角膜缘干细胞移植术的护理方法。方法：探讨该手术的护理难点，制 定并实施针对性护理措施。结果：14眼移植物全部成活，睑球粘连解除。结论：针对性护理 措施能有效地帮助异体角膜缘干细胞移植重建于严重化学烧伤性眼表面结构。
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脐带间充质干细胞在骨组织工程中的研究进展
骨折是临床常见病,我国每年约有骨折患者1200多万,给社会和个人都带来了痛苦与负担[1].现有骨折和骨缺损的外科治疗方法包括自体移植、异体移植和人工植入物[2].然而这些方法又有各自的缺陷:自体移植可利用度有限并会导致供区的缺陷,异体移植和人工植入物会引发免疫应答.因而组织工程方法构建的人工植骨材料为临床上修复各种原因所致的骨缺损提供了一条崭新而广阔的道路[3].
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应用骨髓间充质干细胞修复皮肤损伤的研究进展
机体在受到创伤刺激时,骨髓间充质干细胞会向受损部位聚集,并能够向该受损器官的组织细胞转化,从而修复受损的组织.在异体移植时,骨髓间充质干细胞的免疫抑制作用能够延长移植物的存活时间.体外实验证实人的骨髓间充质干细胞的增殖和分化潜能不受年龄因素的影响,因此我们可以在一个很宽的年龄范围内抽取自体骨髓间充质干细胞在体外扩增后进行自体移植,扩大了成体干细胞自体移植的年龄应用范围.
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完整的人工心脏
人类第一例心脏移植手术在1967年进行,在这之前虽有类心脏物在牛狗体内短期成功的例子,但整体来说,心脏的替代品移植仍是十分遥远的事.然而,临床上的心脏移植给了那些人造心脏(TAH)的研究者们带来了新的动力.对接受异体移植后的生理学研究表明,移植的心脏虽然是一个无神经支配的组织,但却证明能够很好地工作.这个可靠的结论使得研究者们相信:用一个机械的装置也能够起到相应的作用.三十年后的今天,我们实现了这个梦想.
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半月板异体移植的临床应用进展
半月板病变在关节外科十分常见,半月板为膝关节重要的组成部分,切除后将对膝关节稳定性产生明显影响,并加速关节软骨退变,尽量保护半月板结构与功能的完整性已成为关节外科治疗的基本原则.
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异体肢体移植的一体化护理报告
目的:针对异体肢体移植的特殊性,探讨异体肢体移植一体化功能康复的护理问题及其对策.方法:通过对3例(5个肢体)同种异体肢体移植手术前后患者的心理,体能和移植肢体功能康复护理计划的实施,探讨肢体移植早期功能康复的可行性和措施.结果:3例异体肢体移植患者在术前选择和术后康复过程中均存在不同的表现.良好的心理状态、体能和移植肢体有康复护理计划对移植肢体功能的恢复具有重要意义.
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异体移植中免疫耐受的研究进展
目前普遍认为,解决异体移植排斥反应的关键在于诱导受体对供体的细胞、组织或器官产生免疫耐受,即受体免疫系统对移植物抗原产生特异性免疫无反应性.90年代以来,随着器官移植术的广泛开展,人们对移植排斥反应的认识不断加深,对移植免疫耐受提出了新的研究思路和方法.现就以下方面作一介绍.
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基于诱导多能干细胞技术的疾病模型的构建及其在妇产科领域应用的研究进展
近年来，对干细胞的研究备受关注。1998年，美国威斯康星大学成功分离出世界上首株人胚胎干细胞（embryonic stem cell）[1]，干细胞可分化为构成机体的所有细胞类型，理论上能形成任何组织和器官，甚至发育成完整个体，自此拉开了多能干细胞研究的序幕。2006年，日本科学家通过对4个多能基因--Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc基因（即OSKM基因）过度表达，逆转小鼠体细胞去分化也得到多能干细胞，并命名为诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cell, iPSC）[2]。这种形态类似胚胎干细胞的新型细胞，也同时具备自我更新和向3个胚层分化的多能干细胞的基本特征。由于无须从哺乳动物早期胚胎的内细胞团分离，iPSC技术的出现回避了胚胎干细胞带来的伦理学争议；同时，与其他类型干细胞相比，iPSC本身来源于自体体细胞，所以能够避免异体移植产生的免疫排斥反应。因此，iPSC技术的研究和应用前景越来越受到研究者和临床工作者的瞩目。
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CD4+CD25+调节性T细胞与妊娠关系的研究进展
妊娠是一种自然同种半异体移植现象,其成功有赖于母体妊娠免疫耐受,而母胎耐受的建立和维持涉及到多种机制的参与.比较经典的有母胎界面的机械作用:首先,绒毛中的血管壁、绒毛间隙、基底膜和绒毛上皮细胞共同构成母胎机械性屏障.另外,胎盘滋养细胞表面的唾液黏蛋白能遮盖滋养层细胞表面的组织相容性抗原,且这层黏多糖和免疫活性的淋巴细胞都带负电荷,互相排斥.还有就是多因素作用的免疫屏障,比如妊娠早期胎儿滋养层细胞Ⅰ类主要组织相容性复合体分子与母体子宫的自然杀伤细胞的相互作用,胎源性凋亡因子Fas通过与滋养层细胞表达的相关配体结合导致母体特异性T细胞大量表达Fas,从而启动凋亡途径,补体调节蛋白的表达等.而作为一个具有独立免疫调节功能的T细胞亚群,调节性T细胞(regulatory Tcells,Treg细胞)由Sakaguchi等[1]在对啮齿类动物的研究中首次发现,其免疫学特性主要表现在抑制自身反应性T细胞的活化,参与机体免疫耐受,在正常妊娠过程中扮演了一个相当重要的角色.
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米非司酮对人脑膜瘤治疗作用的实验研究
目的探讨米非司酮对人脑膜瘤的治疗作用.方法应用裸鼠肾包膜下法建立人脑膜瘤动物模型.应用三种不同剂量的米非司酮皮下注射,4周后各组间肿瘤生长率作统计学分析.免疫组化SP法检测原始标本孕激素受体(PR);增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组化法检测细胞增殖情况;电镜观察肿瘤细胞超微结构改变.结果中、高剂量组与对照组之间有显著性差异(P＜0.01),低剂量组与对照组之间无显著性差异(P＞0.05).免疫组化、PCNA免疫组化及电镜结果支持米非司酮可能通过阻断PR/糖皮质激素受体(GR)抑制脑膜瘤的增殖.结论米非司酮对人脑膜瘤有明显的生长抑制作用.
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不同移植手术治疗角膜缘干细胞缺损的实验研究
目的 探讨以人羊膜为载体培养的角膜缘干细胞,自体及异体移植治疗全角膜缘干细胞缺损.方法 制作兔眼角膜缘干细胞完全缺损3个月的模型.实验动物随机分为自体移植组和异体移植组,前者取对侧眼角膜缘组织,后者取异体兔眼角膜缘组织,均以去除上皮细胞的羊膜基底膜为载体,培养12d后行角膜缘干细胞羊膜移植术.术后观察3个月,以角膜上皮染色、角膜浑浊和新生血管3项指标进行临床疗效评定,通过病理检查评估术后角膜上皮修复情况,印迹细胞学检查移植前后角膜上皮的细胞表型.结果 体外培养的兔角膜缘干细胞可在羊膜上粘附生长并增生,体外培养12d可形成复层.自体移植组和部分异体移植组术后角膜上皮逐渐愈合,透明度提高,基质细胞浸润减轻,新生血管减退或消失.印迹细胞学检查显示:移植前角膜上皮细胞PAS阳性,而移植后转为阴性;组织病理学显示:移植前角膜上皮大部分缺损,移植后呈现角膜上皮结构.部分异体移植组术后出现了免疫排斥反应.结论 兔自体角膜缘干细胞羊膜移植术可重建眼表;免疫排斥反应仍是异体角膜缘干细胞羊膜移植术失败的主要原因.
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烧伤后角膜新生血管性浑浊的手术治疗--异体角膜缘联合保存人羊膜移植
目的观察异体角膜缘联合保存人羊膜移植治疗烧伤后角膜新生血管性浑浊的效果.方法对12例15眼烧伤后半年以上,眼部行亲属角膜缘组织联合保存人羊膜移植,其中3例4眼行单纯病灶切除术,9例11眼联合板层角膜移植术.结果全部病例术后2～4周,新生上皮覆盖眼表面,1年后眼表面上皮稳定,角膜透明或半透明,睑球粘连解除.术后矫正视力≥0.05.结论双眼严重表面损伤,采用亲属的角膜缘组织联合保存人羊膜移植可有效提高眼表重建术的成功率,是一种有推广价值的术式.
