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不同移植手术治疗角膜缘干细胞缺损的实验研究
目的 探讨以人羊膜为载体培养的角膜缘干细胞,自体及异体移植治疗全角膜缘干细胞缺损.方法 制作兔眼角膜缘干细胞完全缺损3个月的模型.实验动物随机分为自体移植组和异体移植组,前者取对侧眼角膜缘组织,后者取异体兔眼角膜缘组织,均以去除上皮细胞的羊膜基底膜为载体,培养12d后行角膜缘干细胞羊膜移植术.术后观察3个月,以角膜上皮染色、角膜浑浊和新生血管3项指标进行临床疗效评定,通过病理检查评估术后角膜上皮修复情况,印迹细胞学检查移植前后角膜上皮的细胞表型.结果 体外培养的兔角膜缘干细胞可在羊膜上粘附生长并增生,体外培养12d可形成复层.自体移植组和部分异体移植组术后角膜上皮逐渐愈合,透明度提高,基质细胞浸润减轻,新生血管减退或消失.印迹细胞学检查显示:移植前角膜上皮细胞PAS阳性,而移植后转为阴性;组织病理学显示:移植前角膜上皮大部分缺损,移植后呈现角膜上皮结构.部分异体移植组术后出现了免疫排斥反应.结论 兔自体角膜缘干细胞羊膜移植术可重建眼表;免疫排斥反应仍是异体角膜缘干细胞羊膜移植术失败的主要原因.
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羊膜培养兔角膜缘上皮细胞及自体移植--角膜缘干细胞缺损的治疗
目的探讨以人羊膜为载体培养兔角膜缘上皮细胞及其自体移植治疗全角膜缘干细胞缺损.方法在8只兔右眼用正庚醇脱上皮和角膜缘环切的方法构建全角膜缘干细胞缺损模型2月.其中6只兔为实验组,活体取左眼角膜缘浅层小块,置羊膜上常规和气-液培养42天后进行自体移植治疗右眼角膜缘干细胞缺损;2只兔为对照组,直接用解冻无细胞人羊膜移植治疗右眼角膜缘干细胞缺损.进行细胞和术眼活体观察、组织学观察和电镜观察.结果角膜缘上皮细胞在羊膜上生长良好,形成复层,细胞间的联结结构存在,细胞与羊膜组织粘附牢固.实验组移植手术后角膜迅速上皮化,恢复角膜表面光滑和透明,组织学观察和电镜观察呈现生理角膜上皮层的结构特点.但眼睑闭合不全可导致手术失败.对照组术后出现角膜缘干细胞缺损导致的角膜病变.结论以羊膜为载体培养角膜缘上皮细胞后自体移植可有效地治疗角膜缘干细胞缺损导致的角膜病变.
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组织工程角膜上皮治疗兔角膜缘干细胞缺损的实验研究
制作兔眼(右眼为实验眼)角膜缘干细胞完全缺损模型,随机分为实验组和对照组.实验组取对侧眼角膜缘组织,以去除上皮细胞的羊膜基底膜为载体制成组织工程角膜上皮,培养后12 d行角膜缘干细胞羊膜移植术;对照组行单纯羊膜移植术(仅刮除上皮的羊膜).实验组角膜缘干细胞移植术后,兔角膜上皮逐渐愈合,透明度提高,基质细胞浸润减轻,新生血管减退或消失;印迹细胞学检查显示,移植前角膜上皮细胞PAS(+),而移植后PAS(-).认为以羊膜为载体培养角膜缘上皮细胞,可于体外重建组织工程角膜上皮组织,移植后可修复角膜缘干细胞缺损.
