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肿瘤坏死因子在小鼠药理性孕酮撤退月经样模型中的定位和表达
目的 在药理性撤退小鼠月经样模型中,观察孕酮撤退后,肿瘤坏死因子(TNF-α)的定位和表达情况.方法 卵巢切除的小鼠在诱导蜕膜化之后给予米非司酮即通过拮抗孕酮受体的方法(药理性撤退),导致孕酮撤退,并用免疫组化的方法观察米非司酮处理的不同时相,TNF-α在小鼠子宫内膜的定位；用实时PCR的方法观察TNF-α表达情况.结果 免疫组化结果显示米非司酮处理后0～8 h,TNF-α主要存在于腔周围的血管内皮细胞；12～16 h,主要存在于内流的白细胞；24～48 h,主要存在于崩解组织边缘的间质细胞区域和修复好腺上皮细胞周围的间质细胞.实时PCR结果显示TNF-α mRNA在孕酮撤退后24 h内都有表达,并且TNF-a表达量逐渐增高,在12h、16h达到峰值. 结论 在此小鼠月经样模型中,米非司酮处理即孕酮撤退后TNF-α在此模型子宫中定位呈区域性分布,并诱导TNF-α表达升高,可能参与了子宫内膜的崩解.
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益母草碱对小鼠生理性月经样模型崩解期的作用
目的:研究益母草碱对小鼠生理性月经样模型的作用.方法:建立小鼠生理性月经样模型,将人工蜕膜化的假孕小鼠双侧卵巢切除,引发孕酮(P4)撤退,随后蜕膜化子宫内膜发生崩解坏死,模型小鼠出现月经样出血.在P4撤退前至撤退后24h,给予模型小鼠益母草碱,观察P4撤退后小鼠阴道出血状态,子宫大体形态以及组织形态学变化.结果:模型小鼠均在P4撤退后12～ 24h观察到阴道出血.与空白对照组相比,P4撤退后24h益母草碱药物处理组小鼠子宫颜色较深,子宫充血较显著.小鼠子宫腔上皮下的血管显著扩张,特别是腔上皮下血管扩张与红细胞渗出严重,且范围较对照组更广.通过统计学分析证实,益母草碱组充血面积高于对照组(P=0.011).结论:提示益母草碱可导致小鼠子宫内血管扩张与红细胞渗出,其中的药理作用和分子机制有待进一步研究.
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孕酮回植时间对小鼠月经样模型中子宫内膜基质细胞凋亡的影响
目的:探讨在小鼠月经样模型中孕酮回植对子宫内膜基质细胞凋亡的影响.方法:在月经模型小鼠月经发生关键时期的前后,即孕酮撤退后的12h和16h回植孕酮,24h收集小鼠子宫角,TUNEL法原位检测小鼠子宫内膜基质细胞的凋亡；Western Blotting法检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达.结果:孕酮撤退后12h回植孕酮,小鼠子宫内膜中发生凋亡的基质细胞数远低于16h回植组和对照组；而16h回植孕酮则子宫内膜基质细胞的凋亡仅仅稍低于对照组.凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,12h回植组明显高于16h回植组和对照组(P＜0.01),而后两组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).凋亡促进蛋白Bax和Caspase-3的表达,12h回植组均低于16h回植组和对照组(P均＜0.01),而后两组之间比较差异无统计学意义(P均＞0.05).结论:在月经发生关键时期之前,即孕酮撤退后12h回植孕酮可能通过上调Bcl-2/Bax比例而阻断Caspase-3的蛋白表达,从而有效抑制小鼠子宫内膜基质细胞的凋亡,阻断月经发生的进程,而16h回植则不能阻断小鼠月经的发生.
