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如何避免“胎停育”
近在门诊中经常碰到前来看胚胎停育的患者,比起怀不上的患者来说,这类人群还经历着初期怀孕的惊喜到后来失去宝宝的格外的打击.那么什么是胚胎停育呢?胚胎停育,是指妊娠早期胚胎因某种原因所致发育停止.受精卵就像一颗种子,在初的发育阶段,如果受到影响,那么它很可能就会停止健康生长,这种发生在孕早期的胚胎发育异常现象称为“胚胎停育”.胚胎停育不同于孕中期和孕晚期的流产,它是在胚胎尚未形成的时候就停止了发育.为什么会出现胎停育?
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整合素在着床中的作用
近年来,细胞外基质成分(extracellular matrix,ECM)与细胞表面受体相互作用的机制,随着研究的深入已经越来越清楚.这种受体命名为整合素(integrin),是一种完整的跨膜糖蛋白,由两种不同亚单位组成的异二聚体,包括纤粘连蛋白(fibronectin,FN)、层粘连蛋白(lamimin,LN)、胶原(collagen,COL)及玻璃粘连蛋白(vitronectin,VN)等受体.整合素和ECM相互作用促进细胞的粘附、生长、迁徙、增殖及分化[1].子宫、输卵管及早期胚胎中广泛存在整合素和ECM.在精卵识别过程中,整合素起调节作用,促使胚泡粘附于子宫内膜上皮,使滋养层细胞侵入子宫内膜,并调节随后的胚胎生长[2].本综述主要讨论整合素在着床中的作用.
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胚胎干细胞培养体系对早期胚胎发育的影响
目的利用胚胎干细胞(ES)培养体系(饲养细胞+添加条件培养基的胚胎干细胞培养液)培养早期胚胎,建立并优化移植前早期胚胎培养系统,为提高胚胎的着床率与临床妊娠率及植入前遗传学诊断奠定基础.方法将获取的521枚胚胎根据培养液及饲养细胞的不同分为10组,分别比较各组胚胎的体外发育率.结果ES培养体系显著优于传统的胚胎培养体系(P<0.05).ES培养体系中用SIM小鼠成纤维细胞耐硫代鸟嘌呤和耐乌苷亚系(STO)作饲养细胞培养效果优于小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)饲养细胞,两种饲养细胞效果均显著优于用输卵管上皮细胞(OEC)作为饲养细胞(P<0.05).结论ES培养体系可以显著提高早期胚胎的发育率,培养体系中STO饲养细胞较MEF饲养细胞有更好的效果.
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B超观察早期胚胎结构异常的临床价值
早期妊娠B超诊断效果已被公认,而早期胚胎是否存在发育障碍,临床诊断困难,如能早期确诊,对选择适当治疗措施有重要临床意义.本文对100例阴道出血早孕患者,进行B超检查,并对个别病例定期追踪观察,现就检查结果报告分析如下.
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米非司酮对早期胚胎生长发育的影响
米非司酮(mifepristone)是一种人工合成的甾类化合物,临床上多用于终止早孕和避孕,近年来小剂量米非司酮(25 mg或10 mg)作为一种简便、安全和有效的紧急避孕药被广泛采用[1],但其作用机制至今尚不完全清楚.目前研究主要集中在米非司酮对子宫内膜影响胚胎着床的机制,有关米非司酮干预早期胚胎,进而达到避孕目的的研究还不多见,本文综述有关米非司酮对早期胚胎生长发育的影响.
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胚胎停止发育病因探讨
胚胎停止发育(简称胎停育)是指妊娠早期胚胎因某种原因停止发育,是自然流产的一种形式.B超检查表现为妊娠囊内胎芽或胎儿形态不整,无胎心搏动,或表现为空囊.随着优生优育意识的提高及计划生育的开展,越来越多的胎停育无症状孕妇被临床检测出来,并有增加趋势,已经成为公共卫生问题.胎停育是影响生育妇女身心健康的疾病之一,现就其发病原因做一综述.
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人胚胎干细胞研究的现状与前景
胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)是从早期胚胎的内细胞团(inner cell mass,ICM)或原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCS)分离出来的多潜能细胞系.它具有与早期囊胚ICM或PGCs相似的生物学特性,在体外能够保持正常二倍体核型和未分化状态,并且有多方向分化潜能.在适当条件下,ES细胞可被诱导分化为多种细胞、组织,也可以与受体胚胎嵌合,形成嵌合体.1998年,美国威斯康星大学Thomson等[1]率先成功分离、克隆了人胚胎干细胞,并建立了细胞系,这一研究成果立刻在国际上引起轰动,成为世界关注的焦点.由于人ES细胞具有其它哺乳动物ES细胞的一般特性,能够在适宜条件下分化成构成人体的任何一种组织.因此,人ES细胞能够为组织工程研究提供可靠的细胞来源,同时能够在人早期胚胎发生、细胞组织分化以及基因调控等研究领域发挥重要作用.基于此,笔者针对人胚胎干细胞的研究进展及其应用前景做一简要回顾[1-10].
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朱砂灌胃给药对大鼠生育力与早期胚胎发育毒性的研究
目的:观察中药朱砂ig给药对大鼠生育力与早期胚胎发育的毒性影响.方法:SD雄性大鼠连续ig给药6周后与连续给药2周的雌性交配.每天ig给予朱砂1 000,300,100 mg·kg-13个剂量.雄性给药至交配全部结束.雌性给药至妊娠第6 d.雄性大鼠交配后处死,雌性大鼠妊娠第15 d处死,计算黄体数、着床数、活胎数等,进行血液、生化、尿液及组织病理学检查,并与阴性对照组比较.结果:①雌性大鼠朱砂高剂量组着床前胚胎流失率升高,平均活胎数下降,具有统计意义.雄性大鼠给药组睾丸,附睾,前列腺,精囊腺质量减轻,病理学检查睾丸、附睾和精囊腺萎缩,个别睾丸附睾中无成熟精子.②血液学检查表明,雄性大鼠给药组的红细胞数、血红蛋白和红细胞压积低于阴性对照组,呈明显的量效关系,具统计意义.③血液生化学检查表明,雄性大鼠组的给药组ALT,AST,TP,ALB,GLO低于阴性对照组,呈明显的量效关系,具统计意义.④雄性大鼠给药组随着朱砂剂量的增加,肝脏质量和脏器系数也随之增加.结论:朱砂可能对雄性大鼠生育力和雌鼠着床与胎仔发育具有一定的毒性反应.朱砂长期给药可抑制雄性大鼠造血功能和可能损伤肝功能.
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左归丸含药血清对高糖负荷ICR小鼠早期胚胎发育的影响
目的:研究左归丸含药血清对高糖负荷下ICR小鼠早期胚胎发育的影响.方法:使用含0、20、40、60mmol/L葡萄糖的人类输卵管液培养液(HTF)对ICR小鼠胚胎细胞进行体外培养,观察2-细胞率、囊胚细胞率、囊胚细胞数的变化.选择显著抑制ICR小鼠早期胚胎发育的适宜葡萄糖浓度同时添加5%或10%左归丸含药血清体外作用于胚胎1-细胞,观察2-细胞率、囊胚细胞率、囊胚细胞数的变化.结果:胚胎细胞在添加0、20mmol/L葡萄糖的HTF培养基中可正常孵化、发育,在含40、60mmol/L葡萄糖的HTF培养基中发育受到明显损伤(P<0.05),左归丸含药血清能够降低含40及60mmol/L葡萄糖的HIF培养基对胚胎发育的损伤(P<0.05).结论:左归丸含药血清对高糖诱导的胚胎细胞发育损伤具有明显保护作用,在分子水平揭示了中医滋阴补肾方降糖作用的科学内涵.
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健脾生血颗粒对大鼠生育力与早期胚胎发育毒性的影响
目的 评价健脾生血颗粒对大鼠生殖能力及早期胚胎发育的影响.方法 将176只SD大鼠按性别分层,采用随机数字表法分为对照组及健脾生血颗粒低、中、高剂量组,分别以健脾生血颗粒0、1.16、3.48、5.80 g/(kg·d)给予雌鼠2周及雄鼠4周连续灌胃给药后,雌雄大鼠以1∶1合笼,雌鼠持续给药至妊娠第7天,雄鼠持续给药至剖检前,雄鼠整个给药周期为59 ~63天.剖检所有亲代动物,观察亲代动物体征形态,检查组织病理情况进行一般毒性检测;称重睾丸、附睾,计数附睾尾精子数并行精子活力检查检测生殖力毒性;计数黄体、活胎、死胎、吸收胎并计算着床数以观察早期胚胎发育毒性.结果 (1)一般毒性:健脾生血颗粒高剂量组雄鼠体重增长减缓.中低剂量组则无异常;(2)生育力毒性:健脾生血颗粒各剂量对雄鼠睾丸、附睾及附睾尾精子数量均无明显影响;(3)早期胚胎发育毒性:健脾生血颗粒各剂量组对早期胚胎形成未见明显影响.结论 健脾生血颗粒一般毒性方面可能存在一定的胃肠毒性作用,未见毒性反应剂量为3.48 g/(kg·d).健脾生血颗粒各剂量组均未见明显生育力及早期胚胎发育毒性反应.
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Wnt/β-catenin信号传导通路与早期胚胎心脏发育的关系
Wnt/β-catenin信号传导通路是调控细胞增殖、运动、分化的关键途径,在胚胎发育方面起重要作用.研究者发现Wnt信号通路是早期刺激心脏发生的重要调节因素,与早期胚胎的心脏形态发生有密切联系.本文就目前Wnt信号通路与早期胚胎心脏发育的研究进展进行综述.
关键词: Wnt/β-catenin信号传导 早期胚胎 心脏发育 -
羊膜上皮细胞与肝病
人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial stem cells,hAECs)来自人的羊膜,呈上皮样结构单层排列生长在面向羊水的一面,hAECs来源于早期胚胎外胚层,大部分为单层立方和柱状上皮细胞,其主要功能是参与羊水的形成和传递,还能合成、分泌和形成基底膜和细胞外间质成分.近年来研究证实hAECs具有部分胚胎干细胞特性,可分化为3个胚层不同类型的细胞;而且hAECs免疫原性低、有抗炎作用并可分泌多种促生长、抗凋亡等活性因子;移植后无致瘤性和排斥反应[1-2];来源广泛、不受伦理限制,因此hAECs在再生医学上有广阔的应用前景.本文对hAECs的干细胞特性及其在肝病方面的实验研究进展做简要回顾,以期为hAECs在再生性治疗中的应用提供理论依据.
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胎儿皮肤无瘢痕愈合的主要影响因素
30年前人们发现,在人类和高等脊椎动物较早期的胚胎或胎儿,即使涉及皮肤全层的创伤也能够无瘢痕愈合.这一现象提示,如果能模拟早期胚胎愈合条件,儿童和成年创伤愈合有可能达到皮肤再生而非纤维化.目前对无瘢痕愈合过程中所涉及的众多影响因素已经有所认识,简述如下.
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人植入前胚胎基因表达的调控
以往对人植入前胚胎的筛选主要基于形态学指标,随着分子生物学技术在植入前遗传学诊断(PGD)中的应用,可以在染色体水平、基因水平上对某些遗传病进行胚胎植入前筛查,但应用仅限于遗传病高危人群,而体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的绝大部分胚胎未得到发育潜能的评估.具有发育潜能的胚胎,首先应该是基因表达调控正常的胚胎.研究人植入前胚胎基因表达的调控,不仅对于筛选表达活性正常的胚胎,进一步提高IVF-ET妊娠率具有重要意义,同时有助于揭示不孕与不育、早期流产、出生缺陷以及某些疾病早期变化的机理,探讨胚胎期遗传病的基因治疗方法.据分析,要维持植入前和早期胚胎正常发育,大约需要1万个基因表达.目前,在人植入前胚胎中仅50余种基因表达被检测出来(表1),现综述如下.
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基于诱导多能干细胞技术的疾病模型的构建及其在妇产科领域应用的研究进展
近年来,对干细胞的研究备受关注。1998年,美国威斯康星大学成功分离出世界上首株人胚胎干细胞(embryonic stem cell)[1],干细胞可分化为构成机体的所有细胞类型,理论上能形成任何组织和器官,甚至发育成完整个体,自此拉开了多能干细胞研究的序幕。2006年,日本科学家通过对4个多能基因--Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc基因(即OSKM基因)过度表达,逆转小鼠体细胞去分化也得到多能干细胞,并命名为诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell, iPSC)[2]。这种形态类似胚胎干细胞的新型细胞,也同时具备自我更新和向3个胚层分化的多能干细胞的基本特征。由于无须从哺乳动物早期胚胎的内细胞团分离,iPSC技术的出现回避了胚胎干细胞带来的伦理学争议;同时,与其他类型干细胞相比,iPSC本身来源于自体体细胞,所以能够避免异体移植产生的免疫排斥反应。因此,iPSC技术的研究和应用前景越来越受到研究者和临床工作者的瞩目。
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白血病抑制因子在子宫内膜、早孕蜕膜及绒毛组织中的表达
白血病抑制因子(LIF)在哺乳动物子宫内膜中是胚泡成功植入的关键因素之一[1]。本研究应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,对LIF mRNA在人子宫内膜、早孕蜕膜及绒毛组织中的表达进行定量分析,探讨其在受精卵着床及早期胚胎维持中的作用。 一、资料与方法 1.资料来源:(1)正常子宫内膜:选取1998年7月至1999年9月在我中心因子宫肌瘤行子宫切除的病人,年龄34~45岁,月经规律、术前3个月未用激素,其中增殖期,分泌早、中、晚期子宫内膜(病理检查证实)各10例。(2)早孕蜕膜:选同期在我中心门诊行人工流产术的健康妇女,10例,年龄22~35岁,停经42~59 d,术前2周未用激素。取正常子宫内膜、蜕膜及绒毛组织后,立即置入-70℃液氮中保存。
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卵胞浆内单精子注射对胚胎冷冻保存的影响
人类早期胚胎的冷冻保存(冻存)可以提高累积妊娠率,降低患者的费用.在卵巢过度刺激综合征的治疗周期中,冻存新鲜胚胎可避免妊娠加重卵巢过度刺激的危险[1].目前进行冻存的胚胎均通过常规体外受精和卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)两种方法获得.ICSI操作过程是否会对胚胎的冻存造成影响仍有争议[2,3].我们通过分析冻存胚胎植入的妊娠结局,旨在探讨ICSI对胚胎冻存的影响,现将结果报道如下.
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胎儿前脑无叶无裂畸形的产前超声诊断
胎儿前脑无叶无裂(holoprecephaly,HPE)畸形是在早期胚胎发育过程中由于前脑无分裂或分裂不全引起的脑先天发育异常.虽然该病发生率低,但预后极差,因此,早期发现、诊断HPE畸形十分重要.既往诊断该病大多是在新生儿或儿童期由CT或病理发现.自1980年Kurtz等[1]第一次描述了HPE畸形的产前超声以来,产前超声对胎儿的诊断在国外已陆续见有报道,但国内的报道很少,现将我院近年来14例胎儿HPE的超声表现报道如下.
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模拟微重力条件下昆明小鼠早期胚胎体外发育及其G6PD基因表达
目的 研究模拟微重力条件下培养的小鼠早期胚胎体外发育与1 g重力条件下体外发育的差异.方法 检测葡萄糖代谢关键酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PD)在昆明小鼠早期胚胎体外不同重力条件下培养各个时期基因的转录与表达.结果 模拟微重力培养条件下,胚胎体外发育受到明显的抑制,模拟微重力不利于小鼠胚胎的体外发育.用CZB+10%FCS进行培养,2-细胞期培养的囊胚率为零,显著低于常规培养的23.92%;4-细胞期培养的囊胚率为18.44%,显著低于常规培养的80.12%.利用G6PD的内、外两对引物,检测昆明小鼠早期胚胎体外发育各个阶段的G6PD基因的转录与表达.从2-细胞期开始体外常规培养的胚胎,发育至4-、8-细胞胚胎、桑椹胚、囊胚及退化囊胚都有G6PD基因的转录与表达.在模拟微重力条件下,从2-细胞期开始培养的胚胎,发育至4-细胞期、桑椹期、囊胚期胚胎和退化桑椹胚皆有G6PD基因的转录和表达,而退化的2-细胞胚胎没有检测到G6PD基因的转录与表达.结论 两种培养方式之间,G6PD基因的转录与表达不存在差异,说明早期胚胎都存在磷酸戊糖途径.
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牛蒡子苷元对大鼠生育力与早期胚胎发育毒性的研究
目的 以SD大鼠为实验系统评价牛蒡子苷元的生育力与早期胚胎发育毒性.方法 SD大鼠按照体重随机分为溶媒对照组和牛蒡子苷元4、16、64 mg·kg-1三个剂量组,每组50只,雌雄各半.全部动物皮下注射给予对应药物,每日1次,给药体积2 mL· kg-1.雌雄大鼠分别给药10 wk和2 wk后将动物按照1:1比例合笼交配.动物交配期间持续给药,交配成功雌鼠继续给药至妊娠第6天(GD6),交配成功雄鼠持续给药直至处死.试验期间,每日观察动物一般体征,定期检测动物体重和摄食量;雄鼠于交配成功后1 wk处死,检查精子质量和称量生殖器官重量;雌鼠于GD 15处死,检查黄体数、着床数、活胎数、吸收胎数和死胎数,称量子宫和卵巢重量.结果 给药期间,各组均可见给药导致的给药部位刺激反应,牛蒡子苷元16、64 mg· kg-1剂量组各有1只动物因药物毒性死亡;与溶媒对照组相比较,牛蒡子苷元各剂量组体重和摄食量均未见异常变化,动物交配天数、交配率和雌鼠受孕率、雄鼠精子质量和雌鼠妊娠结局均未见异常改变.结论 在本实验条件下,牛蒡子苷元未见大鼠生育力与早期胚胎发育毒性,其未观察毒性剂量(NOAEL)为64 mg·kg-1.