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胎儿和成人骨髓间充质千细胞体外造血支持能力的比较
胎儿出生以后,造血干细胞(HSC)才从胎儿的肝脏和脾脏转移到骨髓,这一过程可能由不同的造血微环境中的信号分子所介导.间充质干细胞(MSC)是骨髓微环境中间质细胞如成骨细胞、内皮细胞的前体祖细胞.研究者推测,胎儿出生前的骨髓可能并不特别适合HSC生长.然而,该假说尚缺乏直接的证据支持.本研究通过对胎儿和成人骨髓MSC的造血支持能力进行比较,拟为此提供证据.成人骨髓MSC来源于3位健康供者,胎儿骨髓MSC来源于孕19-20周流产的胎儿.MSC辐照后与CD34+一起进行长期培养启动细胞分析,计数克隆形成细胞的数童,流式分析培养后CD34+的表型变化.RT-PCR分析两种MSC中细胞因子的表达.结果显示,成人骨髓MSC比胎儿骨髓MSC具有更强的造血支持能力,两者都促进CD34+向髓系细胞分化,两者之间细胞因子的表达存在差异.结论:与胎儿骨髓MSC相比,成人骨髓MSC在某些治疗,尤其是促进造血恢复方面具有更广泛的应用前景.
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成人骨髓来源间充质干细胞对伴刀豆球蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤的影响
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一群来自中胚层的具有强大自我更新和分化潜能的成体干细胞,因其兼具可跨越个体及种属的免疫调节特性,而在组织再生及免疫损伤修复领域被视为重要的种子细胞[1].
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脐血在儿科临床中的应用
脐血有胎儿脐血和新生儿脐血,后者是指胎儿娩出断脐后,残留在脐带和胎盘绒毛血管内的血液.脐血具有以下特点:脐血来源广泛,采集方便,不会给供者造成任何损伤;脐血中的造血干细胞(HSCs)较成人骨髓中的干/祖细胞更原始,有更强的增殖分化能力:脐血中淋巴细胞的免疫功能不够成熟,移植物抗宿主病(GVHD)发生率较低;脐血中不会有肿瘤细胞;脐血中间充质干细胞(MSCs)易于分离.
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成人骨髓基质细胞的冷冻保存及分化为神经细胞的研究
一、材料与方法1.材料:按照临床骨穿方法,无菌获取成人骨髓,肝素抗凝.另无菌抽取前臂静脉血,室温静置约3h,至血凝及血清析出,留取血清,水浴灭活.
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人类ERMAP基因在不同胎龄胚胎组织中的表达
人类ERMAP(human erythroid membrane associated protein,hERMAP)基因是从人胎肝cDNA文库中筛选出来的新基因.通过Northern blot检测,提示其高度特异表达于胎肝、成人骨髓等造血组织以及K562细胞;通过荧光蛋白转染试验证实其定位于293T细胞膜和其他胞质小体上;通过对其所编码的蛋白分子的分析显示其为一跨膜蛋白分子,属免疫球蛋白超家族成员.
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脐血干/祖细胞的生物学特点
脐血是一重要的造血干/祖细胞(HSPC)来源,可用作临床干细胞移植,目前有关脐血的研究主要集中于HSPC的比例、细胞亚群的划分、对造血因子刺激的反应能力、增殖/扩增潜能的控制及HSPC体外扩增的条件等。研究表明,脐血和成人骨髓来源的HSPC功能有显著不同,我们力图在细胞和分子水平论述其生物学特点。1 脐血中HSPC的比例研究表明,1?ml脐血中大约有原始红系祖细胞(BFU-E)8?000个,髓系祖细胞(CFU-GM)13?000~24?000,多能祖细胞(CFU-GEMM)1? 000~10?000。由于培养条件的不同,各家报道有一定差异,特别是CFU-GM和CFU-GEMM两项指标差异更大。事实上,许多研究证实,在半固体培养中加入干细胞因子(SCF)会明显提高CFU-GM、CFU-GEMM检出率。脐血和骨髓中HSPC含量相似,但HSPC亚群比例尚有很大差异,主要表现在以下几个方面:①脐血中BFU-E水平高于骨髓;②脐血和骨髓中CFU-GM水平相似,但脐血中更幼稚的双能粒-单核祖细胞含量明显高于骨髓;③脐血中不成熟的巨核祖细胞集落(>200个细胞)较多;④脐血中CFU-GEMM数比骨髓高4倍。脐血中高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)比骨髓大约高8倍;体外检测中接近人干细胞的长期培养启始细胞(LTC-IC)的比例二者相似,骨髓和脐血LTC-IC培养5周和8周产生的鹅卵石区分别为1∶13?314和1∶33?949,1∶12?506和1∶34?546,从这些结果可推测脐血中干细胞数与骨髓相当。
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内皮祖细胞调控分子及机制研究进展
内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)是内皮细胞的前体细胞.Asahara等[1]于1997年首先从外周血中分离出CD34+/VEGFR2+的血管EPCs,它具有向内皮细胞分化的潜能.研究结果表明,EPCs是一群主要来源于胚胎发育阶段的中胚层和出生后的骨髓、主要存在于胎肝和脐带血以及成人骨髓和外周循环血中的、能够分化为内皮细胞的多潜能细胞[2].
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成人骨髓与其他组织中多能Oct-4(p)干细胞的胚胎起源假说
成人组织中包含大量的干细胞可以用来表达早期发育标志物(如阶段特异性胚胎抗原和转录因子,例如Oct-4和Nanog).这些标记典型存在于胚胎干细胞,外胚层干细胞和原始生殖细胞.此类干细胞在成人组织的存在,支持了这样的观点,即成人组织含有一定数量的多能干细胞,于胚胎发育早期的原肠胚形成过程中沉积.在这篇综述中,我们将讨论这些材料,并提出一个假说:这些细胞可能是胚芽血统的直系后裔.胚芽血统为了将基因传递给下一代以形成体细胞成分,于是成为一个所有存在于成人体内的体细胞世系的"母系者".众所周知,干细胞具有自我更新和按照特定路径分化成其他细胞的能力.按照一种分等级的方式间隔排列:多数原始的全能干细胞能够形成胚胎和胎盘,多能干细胞(PSC),只能形成胚胎,但已失去了形成滋养层的能力,因而无法继续发育成胎盘,已分化的组织限定的单能干细胞群体.PSC是一种发育过程中存在于胚胎并能演变为各种细胞的干细胞,因此PSC促成了在体外培养和注射(囊胚互补法)进入发育中胚泡的来自三个胚层的所有细胞之后的体内操作(并不包括滋养层).
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小径人工血管内皮化种子细胞的实验研究
目的:为小径人工血管内皮化种子细胞的实验研究提供理想的种子细胞来源.方法:收集健康成人骨髓,通过Ficoll离心法获得骨髓单个核细胞,置于纤维连接蛋白预衬的DMEM培养基中,用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)加以诱导,并通过荧光显微镜和免疫组化分析等方法对诱导后的细胞进行形态学观察和鉴定.结果:在VEGF、bFGF等诱导因子存在的条件下,骨髓单个核细胞分化成为内皮细胞,倒置荧光微镜下呈典形的"纺锤样"梭形细胞,单层细胞贴壁生长融合时呈铺路石样排列,免疫组化示VWF抗体染色阳性,CD34抗体染色阴性.结论:成人骨髓单个核细胞在特定培养条件下可诱导分化成为内皮细胞,可作为小径人工血管内皮化理想的种子细胞.
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骨髓间质干细胞在治疗心肌梗死中的应用
一系列的研究表明在成人骨髓中有多种分化潜能的干细胞,它们展示了巨大的功能可塑性,可在新的微环境中生成新的组织所必需的细胞株.这种现象对心肌的生理有巨大的影响,科学家在研究中发现具有多向分化潜能的造血干细胞和间质干细胞可以在啮齿类动物缺血心肌中分化成活并且分化为心肌细胞和血管[1].MSCs易于分离和体外培养扩增,易于外源基因的导入和表达,移植后不需免疫治疗,骨髓再生能力强,易于反复获取,使得其成为细胞替代治疗和基因治疗的理想选择,具有重要的应用前景.
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外周血干细胞及其动员研究进展
成人骨髓是血细胞再生的场所,也是形成血管的内皮祖细胞,能分化为脂肪细胞、软骨细胞及成骨细胞的间充质干细胞等[1],是干细胞或祖细胞的储存场所.早期的研究显示,化疗康复的患者外周血中造血祖细胞增加,因此认识到造血干细胞和造血祖细胞可从骨髓诱导出来,称之为"干细胞动员",这些被动员的细胞可以聚集,也可以再返回骨髓行使其造血功能.
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成人骨髓来源的间质干细胞基本生物学特性的研究
近年研究发现,机体内除胚胎干细胞外还存在具有自我更新和分化能力的组织干细胞[1],其来源于骨髓可分化为多种造血细胞.骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)初由Friedenstein发现,体外培养扩增,遗传背景稳定,而且具有多向分化潜能[2],是组织工程重要的种子细胞之一.本实验对MSC的培养条件、特性等进行了探讨.现将实验结果报告如下.