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铁过载骨髓造血细胞体外模型的建立及其对造血的影响
本研究通过铁与骨髓单个核细胞共培养,建立铁过载骨髓造血细胞模型并观察其对造血功能的影响.在体外培养骨髓单个核细胞的过程中,在培养液中添加枸橼酸铁铵(FAC),使细胞铁过载,建立铁过载骨髓造血细胞模型,然后检验这一过程中造血细胞的凋亡水平、造血集落形成(CFU-E、CFU-GM、BFU-E和CFU-mix)和CD34+细胞的计数变化.再用去铁胺(DFO)祛铁,观察上述指标的变化.结果发现:在不同时间加入培养液中不同浓度FAC,骨髓造血细胞内可变铁池(LIP)水平升高,且具有时间和浓度依赖性,在含400 μmol/L FAC的培养液中培养24小时时LIP水平达到高.骨髓细胞造血功能检测表明,FAC组细胞凋亡比例(24.8 ±2.99%)较对照组(8.9±0.96%)显著升高(P<0.01);造血集落形成单位计数明显低于对照组(P<0.05);CD34+细胞比例(0.39±0.07%)与对照组(0.91±0.12%)相比也显著降低(P<0.01).这些损伤影响可以通过DFO的处理部分消除.结论:在体外培养过程中添加铁能诱导骨髓单个核细胞铁过载,建立铁过载骨髓造血细胞模型,并能引起骨髓造血功能损伤,而这种损伤作用可以通过祛铁法减轻.本模型为深入研究铁过载对骨髓细胞造血功能的作用机制提供实验方法,并为骨髓造血功能低下的铁过载病人治疗提供新的靶点.