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血浆TM、hs-CRP、sVCAM-1检测在妊娠高血压综合征的应用
妊高征病因学说众多,其病理变化机制多认为血管内皮损伤和滋养层浸润障碍是妊高征发生过程中的两个主要环节[1].近年来,临床上该类患者有逐年增加的趋势,但特异的实验室诊断指标报道很少,本文试检测59例妊高征患者血浆凝血酶调节蛋白(TM)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和血清可溶性血管内皮细胞黏附分子-1(sVCAM-1)的水平,以期探讨三者联合检测在妊高征病因机制和病情变化中的应用价值.
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子宫颈妊娠多例临床分析
子宫颈妊娠是指受精卵种植在宫颈管内,组织学内口水平以下,并在该处生长发育.子宫颈妊娠是异位妊娠中发病率很低但很危险的妊娠类型.宫颈妊娠占妊娠数的1:1000～95000,在异位妊娠中发生率＜1%.宫颈妊娠的形态学特征为滋养层浸润性、破坏性生长至宫颈壁内,形成胎盘植入,因宫颈壁仅含15%肌肉组织,余无收缩功能的纤维结缔组织,当宫颈妊娠发生自然流产、误诊刮宫时,因子宫颈收缩力弱,不能迅速排出妊娠产物,开放的血管不闭锁,发生大出血.
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体外受精-胚胎移植术后双胎之一部分性葡萄胎1例
葡萄胎是一种良性妊娠滋养细胞疾病,为胚外组织变性、滋养层发育异常所致,多发生于年轻的生育年龄妇女.双胎之一部分性葡萄胎(partial hydatidiform mole and coex istent fetus,PHMCF)的发生十分罕见,其相关文献报道较少.但随着辅助生殖技术及促排卵药物应用,其发生率有所增加.妊娠滋养细胞疾病主要发生在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)术和胞浆内单精子显微注射(ICSI)后,个别为使用促排卵药之后[1].本院生殖中心自1996年开展体外受精-胚胎移植以来,发生体外受精-胚胎移植术后PHMCF 1例.现报道如下.
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Toll样受体2在人胎盘和胎膜组织中的表达
目的 检测正常胎盘和胎膜组织中Toll样受体2(TLR2)的表达.方法 收集5例足月剖宫分娩胎盘和胎膜样本,运用RT-PCR法检测胎盘和胎膜组织中TLR2 mRNA的表达,运用免疫组织化学和Westen blot印迹方法检测TLR2蛋白质在胎盘和胎膜组织中的表达.结果 RT-PCR显示在mRNA水平,胎盘和胎膜组织中均有TLR2表达;Westen blot印迹显示TLR2抗体在胎盘和胎膜组织中相对分子质量为50000左右的位置有一条明显的条带;免疫组化研究显示TLR2在胎盘的合体滋养细胞、胎膜的羊膜上皮细胞及平滑绒毛膜滋养细胞中有表达.结论 TLR2在人胎盘和胎膜组织中的表达,提示其在妊娠期先天性免疫中可能发挥重要作用.
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子宫瘢痕妊娠介入治疗术后危险因素及护理对策
子宫瘢痕妊娠是指孕卵在子宫瘢痕上着床及发育.发病率各文献报道不同.近年来随着社会因素的影响使剖宫产率不断增加,所以瘢痕妊娠的发病率有所上升.瘢痕妊娠的形态学特征为滋养层浸润性破坏性生长至子宫壁,形成胎盘植入.因瘢痕为无收缩功能的纤维结缔组织,当发生自然流产及误诊而行宫内早孕人工流产时,瘢痕无收缩能力,开放的血管不能闭锁,故出现难以控制的大出血,多以子宫切除为终结局.若抢救不及时,可危及患者生命.瘢痕妊娠临床罕见,若治疗不当后果严重[1].
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经阴道超声引导穿刺治疗未破裂型输卵管妊娠1例
患者,女性,19岁.停经45天,尿HCG阳性,血β-HCG 840 miu/ml(<20 miu/ml正常),人流术未见绒毛.经阴道彩色多普勒超声检查:子宫未见增大,子宫内膜厚1.2 cm,宫腔内未见妊娠囊.双侧卵巢显示清楚,左侧输卵管见类圆形含液性包块3.8 cm×3.2 cm,内见厚壁妊娠囊样结构2.7 cm×2.3 cm,未见胚芽.彩色多普勒显示包块周边及内部未见明显滋养层低阻血流,盆腔无明显积液,提示左侧输卵管妊娠.收住院保守治疗45天,β-HCG 510,尿HCG仍阳性.复查超声:包块增大,并可见0.5 cm×0.5 cm胚芽及卵黄囊,彩色多普勒显示包块周边及内部可探测到较丰富的点状、细带状或分枝状滋养层低阻血流信号.频谱显示Vs:16.6 cm/s, Vd:8.56 cm/s, Vm:11.1 cm/s, PI 0.72, RI 0.48.盆腔少量积液,提示保守治疗效果不佳,胚胎仍存活,且逐渐增大.患者年轻、未婚,要求尽量保守治疗,改经阴道超声引导介入穿剌治疗.
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胎盘巨大血管瘤致胎儿水肿超声表现一例及文献复习
胎盘血管瘤又称胎盘绒毛膜血管瘤,是一种原发性良性非滋养层细胞肿瘤,较少见.肿瘤大小不一,小血管瘤产前易漏诊,多无并发症;而较大血管瘤(肿瘤直径＞5 cm)可引发母儿并发症,血管瘤越大,越接近脐带胎盘入口处,引发并发症的危险性越大.常见并发症为羊水过多、妊娠高血压综合征、低体重儿、早产;其他少见的并发症有胎儿非免疫性水肿、胎儿宫内窘迫、死胎[1].本文结合文献对我院产前超声诊断的1例胎盘巨大血管瘤的超声表现及妊娠结局进行总结分析报道如下.
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滋养血管在动脉粥样硬化斑块进展中的作用
动脉粥样硬化斑块破裂继发血栓形成被认为是冠心病重要的发病机制,其中,慢性血管炎性反应在动脉粥样硬化斑块形成过程中起着重要作用.在早期研究中,外膜滋养血管在动脉粥样硬化中的作用未得到充分重视.近年来研究发现,即使没有动脉粥样硬化的临床表现,也可以观察到滋养血管形成.滋养血管参与动脉粥样硬化形成的诸多过程,例如炎性白细胞内膜积聚、内膜增厚、坏死核心形成、斑块内出血、斑块破裂和动脉血栓形成等.由于斑块内微环境的不稳定,滋养血管在发育过程中常伴有严重的缺陷和异常,导致其不成熟,易于破裂和渗漏,斑块内新生血管形成是斑块内出血的主要原因.影像学研究显示,新生血管的存在可作为预测斑块不稳定和破裂的良好指标.此外,滋养血管密度是急性心血管事件如猝死、心肌梗死和脑卒中等有力的预测指标.
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滋养细胞的内质网应激在妊娠期肝内胆汁淤积症中的作用
目的 探讨滋养细胞内质网应激在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)孕妇胎盘组织的作用.方法 收集2015年1月至12月在浙江大学医学院附属妇产科医院单活胎、初产分娩的孕妇61例,其中ICP孕妇31例(ICP组),健康孕妇30例(对照组).免疫组化法检测两组孕妇胎盘组织滋养细胞中葡萄糖调节蛋白78(GRP-78)的表达部位和表达水平;透射电镜观察两组孕妇胎盘组织滋养细胞、未处理及100 μmol/L甘胆酸处理24 h后的滋养细胞系Swan71细胞中内质网超微结构的变化;逆转录(RT)-PCR技术和蛋白印迹法检测不同浓度(分别为0、25、50、100 μmol/L)的甘胆酸处理24 h后的Swan71细胞中GRP-78 mRNA和蛋白的表达水平.结果 (1)免疫组化法:两组孕妇胎盘组织的滋养细胞中均可检测到GRP-78蛋白的表达,GRP-78蛋白主要表达于滋养细胞的胞质.与对照组孕妇(7.8±1.3)比较,ICP组孕妇绒毛细胞中GRP-78蛋白的表达水平(13.2±2.4)升高,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)透射电镜:①两组孕妇的绒毛细胞:对照组孕妇的胎盘组织中滋养细胞内可见发育良好的微绒毛与内质网,内质网体积无明显增大,无扩张、肿胀变化;ICP组孕妇的胎盘组织中滋养细胞的微绒毛消失,内质网腔明显扩张,内质网水肿、体积增大、液泡化,且内质网脱颗粒现象明显.②Swan71细胞:未处理的Swan71细胞内可见发育良好的微绒毛与大量的内质网,内质网无扩张、肿胀变化;100 μmol/L甘胆酸处理24 h后的Swan71细胞内质网病变弥漫,显著扩张,细胞质呈筛状外观.(3)RT-PCR技术与蛋白印迹法:①RT-PCR技术:用0(生理盐水)、25、50、100 μmol/L的甘胆酸处理24 h后的4组Swan71细胞中GRP-78 mRNA的表达水平分别为1.01±0.17、2.17±0.16、5.47±0.36、5.65±0.82,50、100tmol/L甘胆酸处理细胞分别与生理盐水处理细胞比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).②蛋白印迹法:4组细胞中GRP-78蛋白的表达水平分别为1.01±0.04、1.17±0.15、1.33±0.13、1.73±0.13,50、100 μmol/L甘胆酸处理细胞分别与生理盐水处理细胞比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 ICP孕妇胎盘组织滋养细胞中内质网较正常孕妇有明显的扩张及肿胀性改变;ICP孕妇的绒毛细胞中GRP-78蛋白的表达水平较对照组孕妇明显升高.甘胆酸可引起滋养细胞内质网肿胀,致GRP-78 mRNA和蛋白的表达水平升高.滋养细胞的内质网应激是ICP胎盘的重要病理生理表现.
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葡萄糖调节蛋白78在胎盘滋养细胞中的表达及其与妊娠期糖尿病发病的关系
目的 探讨葡萄糖调节蛋白78(GRP78)在妊娠期糖尿病(GDM)孕妇胎盘滋养细胞中的表达及其与GDM发病的关系.方法 选择2013年5月-2014年5月在青岛市市立医院住院分娩的GDM孕妇50例(GDM组),同期入院分娩的健康孕妇50例(健康孕妇组),两组孕妇均因臀位、骨盆狭窄、瘢痕子宫或社会因素行剖宫产术分娩.采用实时荧光定量PCR技术检测胎盘滋养细胞中GRP78 mRNA的表达;采用免疫组化非生物素二步法检测胎盘滋养细胞中GRP78蛋白的定性表达,依据细胞染色强度进行分级.结果 (1) GDM组及健康孕妇组胎盘滋养细胞中均有GRP78 mRNA的表达,GDM组胎盘滋养细胞中GRP 78 mRNA的相对表达水平为15.6±0.4,健康孕妇组胎盘滋养细胞中GRP78 mRNA相对表达水平为6.0±0.7,GDM组GRP78 mRNA的相对表达水平是健康孕妇组的2.6倍,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2) GDM组孕妇胎盘滋养细胞的胞质中有大量的GRP78蛋白阳性表达颗粒,呈深、浅棕色或黄色染色,GDM组GRP78蛋白的强阳性表达率为96％(48/50);健康孕妇组胎盘滋养细胞的胞质中有少量的GRP78蛋白阳性表达颗粒,主要为黄色染色的弱阳性表达(38例),呈浅棕色染色的强阳性表达仅11例,健康孕妇组GRP78蛋白的强阳性表达率为22％(11/50).两组孕妇GRP78蛋白的强阳性表达率比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 GRP78在GDM孕妇的胎盘滋养细胞中高表达,可能与GDM的发病有关.
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过氧化物酶体增殖物激活受体γ及其配体对早孕期绒毛组织及细胞滋养细胞浸润能力的影响
目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及其配体对早孕期绒毛组织及细胞滋养细胞浸润能力的影响.方法 采用免疫组化方法、免疫荧光细胞化学染色法、蛋白印迹法和RT-PCR技术检测20例孕6～8周(早孕早期组)及20例孕11～12周(早孕晚期组)绒毛组织及细胞滋养细胞中的PPARγ蛋白及其mRNA的表达;并检测不同浓度PPARγ激动配体--15-脱氧-前列腺素J2(15-d-PGJ2)和曲格列酮,以及不同浓度拮抗配体--双酚丙烷二环氧甘油醚(BADGE)对原代无血清培养的细胞滋养细胞浸润能力的影响.结果 (1)PPARγ蛋白在早孕早期组和早孕晚期组绒毛组织中均有表达,主要定位在细胞滋养细胞核中,合体滋养细胞及绒毛间质细胞中无表达.(2)早孕早期组绒毛组织和培养的细胞滋养细胞中,PPARγ蛋白表达水平分别为1.35±0.08、1.13±0.11,PPARγ mRNA表达水平分别为36.0±5.1、13.4±3.1;早孕晚期组绒毛组织和培养的细胞滋养细胞中,PPARγ蛋白表达水平分别为1.17±0.03、0.86±0.05,PPARγmRNA表达水平分别为23.3±5.5、6.1±1.3,早孕晚期组PPARγ蛋白及其mRNA表达水平明显低于早孕早期组,两组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)PPARγ激动配体15-d-PGJ2和曲格列酮均有抑制细胞滋养细胞的浸润的作用.15-d-PGJ2浓度为1、10 μmol/L,曲格列酮浓度为10μmol/L时,早孕早期组细胞滋养细胞浸润指数分别为0.57±0.03、0.43±0.02、0.50±0.06,早孕晚期组分别为0.69±0.02、0.59±0.03、0.66±0.05,两组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).(4)PPARγ拮抗配体BADGE浓度为20、50 μmol/L时,早孕早期组细胞滋养细胞浸润指数分别为1.23±0.07和1. 58±0.04;早孕晚期组分别为1.05±0.02和1.38±0.08,两组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 PPARγ在调节滋养细胞浸润过程中起重要作用;在早孕期胎盘绒毛组织,PPARγ激动配体可抑制滋养细胞浸润;PPARγ拮抗配体可促进滋养细胞浸润,且能部分逆转激动配体的作用.
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促炎因子S100钙结合蛋白A12的表达与子痫前期发病的关系
目的：探讨促炎因子S100钙结合蛋白A12（S100A12）的表达与子痫前期发病的关系。方法选择2013年3—12月在郑州大学第一附属医院产科分娩的子痫前期孕妇60例，按病情轻重分为轻度子痫前期组（30例）；重度子痫前期组（30例）；另选择同期健康孕妇30例为正常对照组。采用ELISA法测定各组孕妇外周血中S100A12蛋白水平；采用免疫组化SP法检测各组孕妇胎盘组织中S100A12蛋白的表达；在体外培养的细胞滋养细胞中加入各组孕妇血清进行培养，另设空白对照组，穿膜（transwell）小室法检测各组细胞滋养细胞的侵袭能力，蛋白印迹法检测各组细胞滋养细胞中S100A12受体——晚期糖基化终末产物（RAGE）蛋白的表达。结果（1）轻度子痫前期组孕妇外周血中S100A12水平为（30.8±2.7)μg/L，重度子痫前期组为（49.3±4.1)μg/L，均高于正常对照组的（15.8±1.4)μg/L，分别比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；重度子痫前期组高于轻度子痫前期组，两组比较，差异也有统计学意义（P<0.05）。（2）各组孕妇胎盘细胞滋养细胞、蜕膜细胞中均可检测到S100A12蛋白的表达，蛋白表达定位在细胞质中。轻度子痫前期组胎盘组织中S100A12蛋白阳性表达率为77%（23/30），重度子痫前期组阳性表达率为93%（28/30），正常对照组阳性表达率为23%（7/30）。分别比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；轻度及重度子痫前期组均高于正常对照组，两者比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；重度子痫前期组高于轻度子痫前期组，两组比较，差异也有统计学意义（P<0.05）。（3）轻度子痫前期组细胞滋养细胞穿膜细胞数及RAGE蛋白表达水平分别为（29.1±3.2）个及0.479±0.038，重度子痫前期组分别为（16.8±2.5）个及0.652±0.059，正常对照组分别为（38.6±24.3）个及0.327±0.024，空白对照组分别为（42.6±5.6）个及0.194±0.011。轻、重度子痫前期组穿膜细胞数均明显低于正常对照组及空白对照组，而RAGE蛋白表达水平均明显高于正常对照组及空白对照组，分别比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论促炎因子S100A12在子痫前期孕妇外周血及胎盘组织中呈高表达，S100A12受体RAGE蛋白也相应呈高表达，提示S100A12在子痫前期发病中起一定作用。
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邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对原代培养的人早孕绒毛细胞滋养细胞凋亡的影响
目的 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对原代培养的人早孕绒毛细胞滋养细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2和bax表达的影响.方法 用浓度为0、25、50、100 μmol/L的DEHP作用于原代培养的人早孕绒毛细胞滋养细胞24 h,逆转录(RT)PCR法检测滋养细胞凋亡相关基因Bcl-2和bax的mRNA表达水平;蛋白印迹法检测Bcl-2和bax的蛋白表达水平;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法和双染流式细胞术检测细胞滋养细胞凋亡情况.结果 (1)Bcl-2表达水平:当DEHP浓度为0、25、50、100 μmol/L时,Bcl-2 mRNA表达水平分别为1.00±0.05、1.03±0.04、1.04±0.03、1.04±±0.04,分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05);Bcl-2蛋白表达水平分别为0.11±0.02、0.11±0.04、0.12±0.02、0.12±0.03,分别比较,差异也无统计学意义(P>0.05).(2)bax表达水平:当DEHP浓度为50、100 μmol/L时,bax mRNA表达水平分别为0.96±0.04、1.02±0.04,与DEHP浓度为0 μmol/L时(0.81±0.05)比较,差异有统计学意义(P<0.05),bax蛋白表达水平分别为0.63±0.04、0.81±0.04,与DEHP浓度为0 μmol/L时(0.23±0.05)比较,差异也有统计学意义(P<0.05).(3)细胞凋亡率:浓度为50、100 μmol/L的DEHP作用24 h后,双染流式细胞术检测细胞滋养细胞凋亡率分别为(18.8±2.6)%和(20.3±2.0)%,与DEHP浓度为0 μmol/L时[(10.6±1.4)%]比较,差异有统计学意义(P<0.05);TUNEL法检测细胞滋养细胞凋亡率为(18.1±4.6)%和(19.5±1.2)%,与DEHP浓度为0 μmol/L时[(11.2±3.1)%]比较,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 DEHP可通过增加细胞凋亡相关基因bax的表达,促进细胞滋养细胞凋亡,但对Bcl-2的表达无明显影响.
关键词： 妊娠初期 滋养层 细胞凋亡 二乙基己基邻苯二甲酸 -
低分子肝素及肝素结合型表皮生长因子对孕早期滋养细胞生物学功能的影响
目的 观察低分子肝素及肝素结合型表皮生长因子(HB-EGF)对孕早期滋养细胞功能的影响.方法 2011年2月至11月在中山大学附属第二医院进行体外培养孕早期绒毛组织中的滋养细胞.按照不同浓度的低分子肝素分为0.025 U/ml组、0.25 U/ml组、2.5 U/ml组、25 U/ml组、250 U/ml组；按照低分子肝素、HB-EGF单独及联合用药,分为低分子肝素组(浓度0.25 U/ml),HB-EGF组(浓度10 μg/L),联合用药组(浓度0.25 U/ml的低分子肝素+10 μg/L的HB-EGF)；将加入DMEM设为对照组.采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测孕早期滋养细胞增殖能力,以平均吸光度(A)值表示；采用穿膜小室实验检测孕早期滋养细胞的侵袭能力,以穿透至膜下细胞数表示；并检测培养上清液中孕早期滋养细胞分泌的hCG水平以评价滋养细胞的分化能力.结果 与对照组比较,低分子肝素浓度为0.025 U/ml对孕早期滋养细胞增殖、侵袭能力影响不明显(P＞0.05)；低分子肝素浓度为0.25 U/ml、2.5 U/ml时,低分子肝素增加孕早期滋养细胞增殖、侵袭能力(P＜0.05)；低分子肝素浓度为25 U/ml、250 U/ml时,则低分子肝素显著抑制孕早期滋养细胞增殖、侵袭能力(P＜0.05).与对照组A值(0.44±0.04)比较,低分子肝素组(A值为0.51 ±0.05)、HB-EGF组(A值为0.56±0.04)、联合用药组(A值为0.69±0.06)均显著增高(P＜0.05).在侵袭试验中,低分子肝素组侵袭细胞数为(511±78)个,HB-EGF组为(669±67)个,联合用药组为(872±64)个,分别与对照组(405±67)个比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).低分子肝素组上清液中hCG水平为(7143±649)U/L,HB-EGF组为(11 762±1059)U/L,联合用药组为(11 015±1084)U/L,分别与对照组(8182±666)U/L比较,差异也均有统计学意义(P＜0.05).结论 低分子肝素可以调节孕早期滋养细胞的增殖、侵袭和分化能力.HB-EGF是低分子肝素对孕早期滋养细胞产生作用的一个重要因素.
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子痫前期孕产妇胎盘组织中过氧化氢对人类白细胞相关抗原G表达的影响
目的 探讨子痫前期孕产妇胎盘组织中氧化应激产物过氧化氢(H2O2)对胎盘滋养细胞中的人类白细胞相关抗原G(HLA-G)表达的影响.方法 选择2008年10月-2009年10月南京医科大学第一附属医院住院的产妇40例,其中子痫前期组20例,健康妊娠组20例.采用比色法检测两组产妇胎盘组织中H2O2水平;采用蛋白印迹法检测两组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白的表达水平;并对胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平进行相关性分析.人绒毛膜癌细胞株JEG-3细胞培养24 h后贴壁完全,分为两组,干预组加入浓度为175 μmol/L的H2O2,对照组不加H2O2,两组细胞培养24及48 h后,采用蛋白印迹法和细胞免疫荧光法检测JEG-3细胞中HLA-G蛋白表达水平和强度的变化.结果 (1)子痫前期组产妇胎盘组织中H2O2水平为(105±13)nmol·mg-1·prot-1,健康妊娠组产妇胎盘组织中H2O2水平为(62±18)nmol·mg-1·prot-1,子痫前期组较健康妊娠组明显升高,且差异有统计学意义(P<0.05).(2)子痫前期组产妇胎盘组织中HLA-G蛋白表达水平为0.20±0.08,健康妊娠组为1.67±0.65,子痫前期组比健康妊娠组下降了88%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05).(3)两组产妇胎盘组织中H2O2水平与HLA-G蛋白表达水平呈显著负相关(r=-0.895,P=0.000).(4)H2O2干预JEG-3细胞24 h后,JEG-3细胞中HLA-G蛋白表达水平为1.95±0.25,干预48 h后为0.65±0.08;与未干预细胞中的3.21±0.33比较,分别下降了39%和80%,干预24、48 h分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);干预48 h与干预24 h比较,HLA-G蛋白表达水平下降了67%,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05).H2O2干预JEG-3细胞48 h后荧光显微镜下显示,干预组细胞中HLA-G表达强度明显弱于对照组.结论 子痫前期产妇胎盘滋养细胞中的高水平H2O2能下调胎盘滋养细胞中HLA-G蛋白的表达,从而参与子痫前期的发病.
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胎盘基底板中玻连蛋白的表达及其与重度子痫前期发病的关系
目的 探讨胎盘基底板中玻连蛋白(VN)的表达及其与重度子痫前期发病的关系.方法 选择2010年3月-2011年12月吉林大学白求恩第二医院产科住院分娩的17例早发型重度子痫前期孕妇为早发型重度子痫前期组,16例晚发型重度子痫前期孕妇为晚发型重度子痫前期组；另选同期孕34周以前的15例健康孕妇为早期对照组(因胎儿心脏发育畸形等原因引产者),孕34周以后的15例健康孕妇为晚期对照组.采用免疫组化方法及逆转录(RT)-PCR技术分别检测胎盘基底板梗塞灶中心及其周围组织中VN蛋白及mRNA表达,并对各组孕妇的凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIb)水平进行检测并计算国际标准化比率(INR).对早发型重度子痫前期组和早期对照组孕妇检测结果异常的凝血指标与VN表达水平进行相关性分析.结果 (1)4组胎盘基底板中均可检测到VN蛋白的表达,尤其在胎盘梗塞灶中心坏死组织中呈高表达,而在远离梗塞区组织中呈弱表达.(2)早发型重度子痫前期组胎盘基底板中VN蛋白表达水平为0.152 ±0.019、晚发型重度子痫前期组为0.113±0.023、晚期对照组为0.095±0.014、早期对照组为0.055 ±0.010,各组分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).VN蛋白在胎盘梗塞灶中心、梗塞灶边缘、近梗塞区组织及远离梗塞区组织中的表达水平依次逐渐降低,分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).各组胎盘梗塞灶中心、梗塞灶边缘、近梗塞区组织及远离梗塞区组织分别纵向比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(3)各组胎盘梗塞灶中心、梗塞灶边缘、近梗塞区组织、远离梗塞区组织胎盘基底板中均可检测到VN mRNA表达,早发型重度子痫前期组及早期对照组的梗塞灶中心VN mRNA表达水平较远离梗塞区组织升高,差异有统计学意义(P＜0.05).(4)早发型重度子痫前期组PT为(9.45±0.63)s,明显短于早期对照组的(9.88±0.17)s,两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；而各组APTT、FIb及INR水平分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).(5)早发型重度子痫前期组胎盘VN表达水平与PT呈显著负相关(r=-0.612,P＜0.05)；而早期对照组胎盘VN表达水平与PT无相关性(r=0.489,P＞0.05).结论 VN在早发型重度子痫前期孕妇胎盘基底板中呈高表达,并引起凝血与纤溶系统平衡失调,终导致重度子痫前期的发生.
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子痫前期患者胎盘组织中血小板源性生长因子A的表达及意义
目的 探讨子痫前期患者胎盘组织中血小板源性生长因子A(PDGF-A)的表达变化及其临床意义.方法 应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法,检测38例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度子痫前期18例、重度子痫前期20例)及22例正常妊娠晚期妇女(正常妊娠组)胎盘组织中PDGF-A的表达.结果 (1)PDGF-A的表达部位:PDGF-A主要在胎盘滋养细胞和毛细血管内皮细胞的胞膜及胞质中表达.(2)胎盘滋养细胞PDGF-A的表达:子痫前期组胎盘滋养细胞PDGF-A的阳性表达率为63%(24/38),正常妊娠组为32%(7/22),两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(3)毛细血管内皮细胞PDGF-A的表达:子痫前期组毛细血管内皮细胞PDGF-A的阳性表达率为68%(26/38),正常妊娠组为27%(6/22),两组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(4)不同程度子痫前期患者PDGF-A的表达:轻度子痫前期患者胎盘滋养细胞PDGF-A的阳性表达率为39%(7/18),重度子痫前期患者胎盘滋养细胞PDGF-A的阳性率为85%(17/20),两者比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 子痫前期患者胎盘滋养细胞和毛细血管内皮细胞PDGF-A的高表达,可能与子痫前期发生、发展有关.
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同型半胱氨酸对滋养细胞基质金属蛋白酶2、9表达的影响
目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)对早孕期滋养细胞基质金属蛋白酶(MMP)2、9表达的影响及其在子痫前期发病过程中的作用.方法 分离培养早孕期滋养细胞,用Hcy刺激早孕期滋养细胞48 h,对照组Hcy刺激浓度为0 mmol/L,实验组的刺激浓度为1 mmol/L;以实时荧光定量RT-PCR检测早孕期滋养细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达变化;明胶酶谱分析法测定早孕期滋养细胞MMP-2、MMP-9酶活性变化,以积分吸光度值表示.结果 实验组与对照组比较,早孕期滋养细胞MMP-2 mRNA表达降低21%,MMP-9 mRNA表达降低11%;实验组与对照组比较,MMP-2蛋白表达降低14%,MMP-9蛋白表达降低52%.结论 Hcy能够抑制早孕期滋养细胞MMP-2、MMP-9的表达,从而影响滋养细胞侵袭性.
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趋化因子及其受体在人早孕绒毛组织中的表达特征及意义
目的探讨人早孕绒毛组织中趋化因子CXCL16、CXCL12及其受体CXCR6、CXCR4的基因转录和蛋白表达特征.方法收集早孕绒毛组织并分离滋养细胞,采用半定量RT-PCR方法,检测人早孕绒毛滋养细胞(含绒毛滋养细胞和绒毛外滋养细胞)和人绒毛膜细胞癌细胞系JAR中CXCL16、CXCR6、CXCL12、CXCR4的基因转录水平;采用免疫组化和免疫细胞化学分析方法,检测人早孕绒毛滋养细胞及JAR细胞中CXCL16、CXCR6、CXCL12、CXCR4的蛋白表达.结果人早孕绒毛滋养细胞CXCL16、CXCR6、CXCL12、CXCR4的基因转录水平分别为0.89±0.11、1.12±0.25、0.78±0.10、1.08 ±0.11;JAR细胞CXCL16、CXCR6、CXCL12、CXCR4的基因转录水平分别为0.90±0.21、1.00±0.30、0.66±0.13、0.90±0.18,两者比较,差异无统计学意义(P＞0.05).CXCL16、CXCR6、CXCL12、CXCR4蛋白在人早孕绒毛滋养细胞和绒毛外滋养细胞中的表达均呈阳性.结论人早孕绒毛滋养细胞同时表达CXCL16、CXCL12、CXCR6、CXCR4,提示母-胎界面存在复杂的趋化因子调控网络,并参与调控滋养细胞自身的生物学行为.
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胎盘合体滋养细胞中PPAR对FABP4基因表达的影响
目的 探讨胎盘合体滋养细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)对脂肪酸结合蛋白4(FABP4)的调控作用.方法 培养正常的胎盘合体滋养细胞,并给予PPARα、β、γ各亚型相应的受体激动剂(分别为GW7647、GW0742、罗格列酮)和拮抗剂(分别为GW6471、GSK0660、GW9662),实时定量PCR技术、蛋白印迹法分别检测FABP4 mRNA和蛋白的表达.结果 胎盘合体滋养细胞中加入PPARα、β的激动剂GW7647、GW0742和拮抗剂GW6471、GSK0660后,FABP4 mRNA和蛋白的表达量均无明显变化(P＞0.05).加入PPARγ激动剂——罗格列酮(1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6 mol/L)后,呈剂量依赖性促进胎盘合体滋养细胞中FABP4 mRNA和蛋白的表达(mRNA表达量:1.27 ±0.12、1.45 ±0.14、1.57±0.14、1.72 ±0.12,蛋白表达量:1.10 ±0.08、1.37 ±0.09、1.60±0.13、1.79 ±0.14;P ＜0.05),且这种促进作用可被特异性拮抗剂GW9662(1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6 mol/L)剂量依赖性阻断(mRNA表达量:0.92 ±0.06、0.77±0.06、0.64±0.05、0.55±0.05,蛋白表达量:0.91±0.03、0.78±0.06、0.70±0.07、0.55±0.06；P＜0.05).结论 在胎盘合体滋养细胞中FABP4是PPARγ的靶基因,FABP4选择性结合PPARγ并受PPARγ调控,但并不受其他两个PPAR亚型的影响.
关键词： 滋养层 过氧化物酶体增殖物激活受体 脂肪酸结合蛋白质类 基因表达
