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不同参数条件下巴马小型猪腰椎神经根扩散张量成像的比较研究
目的 比较1.5T磁共振不同参数条件下的巴马小型猪腰椎神经根扩散张量成像(Diffusion Tensor Imaging,DTI)序列的图像质量,优选佳扫描参数.方法 采用不同的层厚、扫描野、矩阵组合对10头小型猪各进行3次腰椎DTI扫描,由3名高年资放射科医师完成图像信噪比的测量和扩散张量纤维示踪图(Diffusion Tensor Tractography,DTT)的重建,并对DTT显示效果进行评分,采用方差检验对评分结果 进行统计学分析.结果体素大小相近时,不同参数条件下(层厚不同或FOV不同)DTI图像信噪比间的差异无统计学意义(P>0.05),不同FOV的DTT图像质量评分之间的差异有统计学意义(P<0.05),相对小FOV的序列DTT图像质量评分较高.结论 体素大小取决于层厚、扫描野及矩阵,过大或过小的体素均导致图像质量下降.相对小扫描野(110 mm×110 mm)结合使用小矩阵(72 mm×72 mm)扫描,扩散张量纤维示踪成像可重建出更多的神经纤维、完整性更好,是用于巴马小型猪腰椎神经根DTI相关评价的理想选择.
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益气健脾方加减治疗巴马小型猪脾虚型冠心病的作用机制
目的:探讨"脾虚生痰"所致巴马小型猪冠心病的发病机制及从脾论治方药的作用效应与机制.方法:采用隔日游泳+高脂饲料+冠状动脉结扎法复制"脾虚生痰"型冠心病巴马小型猪模型,连续10周,随机分为模型组、益气健脾组、益气健脾祛痰组及益气健脾化瘀祛痰组,10只/组;10只正常组动物不结扎冠状动脉和不游泳.给药24周后,观察心肌缺血区组织学病变和超微结构变化,PCR法检测NF-κB、IL-6、TNF-α和水通道蛋白1(AQP1)mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法检测p38MAPK和AQP1的蛋白表达水平.结果:与正常组比较,模型组NF-κB、IL-6、TNF-α和AQP1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);p38MAPK和AQP1蛋白表达显著升高 (P<0.05).与模型组比较,各给药组上述指标表达水平均显著降低(P<0.05).结论:益气健脾方加减可减轻缺血区心肌组织炎性反应和水肿的发生,从而改善"脾虚生痰"所致巴马小型猪冠心病症状.
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脾虚痰浊动脉粥样硬化巴马小型猪血清脂蛋白亚类分布的特征
目的:探讨脾虚痰浊动脉粥样硬化巴马小型猪血清脂蛋白亚类分布的特征并利用PCR Array技术检测主动脉AS信号通路中脂类代谢相关基因表达的变化.方法:9只巴马小型猪随机分为正常组、模型组和治疗组,每组3只,正常组普通饲料喂养,模型组与治疗组给予高热量高脂适量胆盐饲料喂养并进行冠脉球囊挤压伴拉伤及跑步措施进行干预至24周,制备巴马小型猪病症结合脾虚痰浊动脉粥样硬化模型,治疗组除上述造模措施外给予健脾祛痰化瘀方喂饲24周.全自动生化分析仪检测血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆同醇(HDL-C);Lipoprint脂蛋白分类仪对HDL、LDL颗粒进行分类,分析不同大小HDL、LDL颗粒在脾虚痰浊动脉粥样硬化巴马小型猪中的分布特征;PCR Array技术检测脂类代谢相关基因表达.结果:与正常组比较,模型组小型猪血清TG、LDL-C水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01);HDL-C水平显著降低(P＜0.05);LDL平均颗粒较小(P＜0.01),sd-LDL浓度所占百分比显著升高(P＜0.05);大颗粒HDL-C含量显著降低、大颗粒HDL-C占HDL-C浓度百分比显著降低、小颗粒HDL-C含量显著升高,小颗粒HDL-C浓度占HDL-C浓度百分比显著升高(P＜0.05,P＜0.01).与模型组比较,治疗组小型猪LDL-C水平显著降低(P＜0.05);大颗粒HDL-C含量显著升高、大颗粒HDL-C百分比显著升高、小颗粒HDL-C含量显著降低,小颗粒HDL-C浓度占HDL-C浓度百分比显著降低(P＜0.05,P＜0.01).PCR Array技术分析发现模型组小型猪上调≥2倍的基因包括ABCA1、IL4、PTGS1、NR1H3、PPARD,下调＜0.5的基因有LDLR、FABP3、LPL、PPARG.结论:LDL和HDL亚类分布异常可能是导致动脉粥样硬化发生的重要原因之一.
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实验性巴马小型猪脑死亡判定标准的初步探索
脑死亡作为移植物延迟性功能恢复和慢性失功的潜在影响因素,对移植器官的损伤有待于深入研究.这就要求建立稳定的脑死亡实验模型,并制定客观性强、简便易行的脑死亡判定标准.本实验拟利用巴马小型猪的脑死亡模型,初步探讨动物实验脑死亡的判定标准.
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次全结扎冠状动脉法构建巴马小型猪心肌缺血模型
目的 采用次全结扎巴马猪冠状动脉法建立心肌缺血模型.方法 对10只巴马小型猪术前行冠状动脉CTA(CCTA)及心脏MR(CMR)检查.开胸后次全结扎冠状动脉左前降支建立模型,并于术后2、12、24、48、72 h及1、2、3、4周复查CTCA及CMR,测心功能指标,包括左心室舒张末期容积(LVEDV)、收缩末期容积(LVESV)及射血分数(LVEF).术后4周处死实验动物行病理检查.结果 7只巴马小型猪顺利完成手术,建模成功率70.00％.建模后CTCA示结扎处狭窄程度约80％～100％;与术前比较,术后24 h后不同时间点LVEF下降(P＜0.05)、LVESV增加(P＜0.05),术后2周后不同时间点LVEDV增加(P＜0.05).CMR检测梗死节段与病理结果的一致性较好(Kappa=0.888).结论 次全结扎冠状动脉左前降支可建立良好的心肌缺血动物模型.
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脑死亡状态对巴马小型猪胰腺及小肠组织中蛋白激酶-C的影响
目的:探讨脑死亡状态下胰腺及小肠组织中蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)水平的变化.方法:巴马小型猪10只,随机平均分为脑死亡组及对照组.用颅内加压法建立脑死亡模型,脑死亡后6,12和24 h点活检部分胰腺和小肠组织行电镜观察,并用RT-PCR和免疫组化法检测PKC-αmRNA和蛋白的表达情况.结果:脑死亡组胰腺和小肠组织中PKC-αmRNA均表达,并随着脑死亡时间的增加表达亮度增高,而在对照组胰腺和小肠组织中PKC-α mRNA无表达.脑死亡组PKC-α蛋白在胰腺和小肠组织中的表达显著高于对照组,并且6、12、24 h间也有显著差异(0.6209±0.031 vs 0.381±0.038 vs 0.151±0.0108;P＜0.05).对照组PKC-α蛋白在胰腺及小肠细胞胞质内表达,仅见少量阳性细胞.电镜下,脑死亡组胰腺及小肠组织形态学变化明显重于对照组.结论:脑死亡状态下胰腺及小肠组织中PKC-αmRNA和蛋白表达水平明显升高,这可能与脑死亡状态下胰腺及小肠的组织损伤有关.
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温血连续灌注供心全程不停跳保存和移植的实验研究
目的：研究长时间温血连续灌注供心全程不停跳保存和移植的心肌保护效果。
方法：采用广西巴马小型猪作为实验对象。①首先建立温血连续灌注供心全程不停跳保存模型。右颈内动脉至右头臂动脉插入10号主动脉灌注管，连接Y型三叉接头。结扎上腔静脉，剪断下腔静脉和右肺静脉，心脏跳动10~15次后于左侧头臂动脉远端阻断主动脉，开始主动脉灌注。回收胸腔内血液，去白细胞后保存，以备移植时体外循环膜肺预充。在连续温血灌注心脏不停跳下迅速切取供心，放置于专用存储装置内进行温血不停跳离体保存8小时。保存期间的灌注流量为每分钟100~120 ml；灌注压调节在45-55 mmHg之间；灌注温度37℃。按照双房标准原位心脏移植的方法在受体猪建立体外循环，修剪供心，保留部分右心房和部分左心房。心脏移植吻合顺序为左心房全部，1/2右心房，2/3肺动脉干，主动脉全部，剩余的右心房和肺动脉干。移植过程中需将主动脉灌注管的位置由右侧头臂静脉调到供心主动脉的根部。②对比研究：32只巴马小型猪随机分为两组：A组（心不停跳），8对，分别为供体和受体，供心采用常温血连续灌注不停跳保存8小时，然后供心在不停跳状态下进行心脏移植；B组（冷保存组），8对，分别为供体和受体，应用HTK保存液灌停供心后放入4℃HTK液中保存8小时，然后供心在低温停搏下行移植。记录心律失常的发生例数、移植吻合和体外循环的时间，以及移植后血管活性药物的应用剂量；检测供心保存期0.5小时，4小时和8小时的心肌氧摄取率、血清CK-MB和cTn-I变化；移植3小时后供心左心室血流动力学、心肌含水量、心肌组织光镜下改变、心肌丙二醛和ATP含量、心肌细胞原位凋亡和流式细胞学变化。 -
正加速度暴露下冠状动脉狭窄小型猪白介素-6和心肌线粒体的变化
目的：研究正加速度（+G z）应激对不同程度冠状动脉（冠脉）狭窄小型猪模型血浆白细胞介素-6（I L-6）和心肌组织线粒体的影响。方法以巴马小型猪为研究对象，采用左前降支丝线环扎法建立不同程度冠脉狭窄模型，并使之暴露于高+Gz环境下，观察各组大可耐受正加速度值以及离心前后IL-6水平的变化，同时取其左心室前壁心肌组织在电镜下观察不同组别心肌线粒体形态的变化。结果在大可耐受+Gz暴露后各组模型猪IL-6水平呈线性升高；冠脉中度和重度狭窄模型猪IL-6的浓度较伪手术组均显著升高，轻度狭窄组则升高不明显。伪手术组线粒体形态正常；轻度狭窄组线粒体排列稍紊乱，其内嵴稍模糊；中度狭窄组嵴模糊、空泡化；重度狭窄组线粒体嵴明显模糊，空泡化较多，甚至破裂。结论大耐受的+Gz对轻度冠脉狭窄的猪IL-6和心肌线粒体影响不大，中度和重度狭窄的猪IL-6升高显著，且心肌线粒体损伤明显；冠脉狭窄越重，IL-6升高越明显，线粒体损伤变化越重。
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艾溴利平降低巴马小型猪脂负荷后血清三酰甘油和游离脂肪酸
目的:观察脂蛋白酯酶活化剂艾溴利平(ibrolipim,别名NO-1886)对高脂高蔗糖高胆固醇喂养的巴马小型猪餐后三酰甘油代谢的影响.方法:将10头巴马小型猪随机分为正常对照组和高脂高糖高胆固醇喂养组,分别用正常饲料、高脂高糖高胆固醇饲料喂养5个月,每个月末监测其空腹血糖、血清总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油和游离脂肪酸水平.第5个月末从2组动物中分别随机选取3头进行脂肪耐量试验,分别经胃管给予以下4种处理:生理氯化钠溶液(10 mL·kg-1),20%脂肪乳剂(10 mL·kg-1),20%脂肪乳剂+艾溴利平(0.3g·kg-1),20%脂肪乳剂+艾溴利平(1.0 g·kg-1).测定0～8 h内每小时血清三酰甘油和游离脂肪酸水平.结果:高脂高蔗糖高胆固醇喂养的小型猪血糖和血脂各项指标均显著升高.艾溴利平可以降低正常对照组脂负荷后血清三酰甘油和游离脂肪酸,呈一定剂量依赖,对高脂高糖高胆固醇喂养组的三酰甘油和游离脂肪酸亦有降低作用,但是降低幅度低于正常对照组.结论:艾溴利平可以降低正常对照组和高脂高蔗糖高胆固醇组脂负荷后血清三酰甘油和游离脂肪酸水平.
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全身麻醉对巴马小型猪空腹血糖测定的影响
目的 探讨全身麻醉对高糖高脂饲料诱导的2型糖尿病巴马小型猪空腹血糖的影响.方法 巴马小型猪16头随机分为2组每组8头,对照组为正常饲料组,实验组为高糖高脂饲料诱导组.对16头巴马小型猪分别在全身麻醉前后测定空腹血糖,麻醉前后的血糖值进行组内、组间统计分析.结果 两组小型猪在麻醉前后空腹血糖值差异显著,高糖高脂饲料组麻醉后空腹血糖值升高与对照组差异极显著.结论 全身麻醉后巴马小型猪空腹血糖值明显升高,高糖高脂诱导的巴马小型猪2型糖尿病动物模型空腹血糖升高更为显著.
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北京地区两个封闭群巴马小型猪的群体遗传质量分析
目的 对北京地区两个封闭群巴马小型猪群体进行遗传质量评价与分析.方法 利用DB11/T828.3-2011中的25对微卫星引物,对A、B两个巴马小型猪群体进行微卫星分型及遗传参数计算.结果 A、B两巴马小型猪群体分别得到126和160个等位基因,平均杂合度分别为0.6541、0.6973,平均多态信息含量(PIC)分别为0.6037、0.6605,两者的遗传距离为0.2650.结论 B群巴马小型猪群体具有较好的遗传多样性和稳定性,符合封闭群动物的群体遗传特征.
关键词： 巴马小型猪 遗传结构分析 DB11/T828.3-2011 -
2型糖尿病易感小型猪遗传选育研究进展(一)
由于小型猪代谢机制与人类十分相似,使其成为糖尿病研究的理想动物模型.然而在作为家畜的长期选育过程中,小型猪获得了抵抗致糖尿病因素的特性.本实验室经过对245头成年巴马小型猪的空腹血糖筛选,获得了一头孕期高血糖的个体,这头猪生产了11头后代(存活10头),我们以这10头小型猪为基础,以高糖高脂饲料诱导过程的表现性状作为选育条件,经过2世代的选育,小型猪的糖尿病易感性从诱导7个月发病,进展为6个月发病.因此,推测有希望获得一个糖尿病易感的小型猪新品系.
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三个品系小型猪Ⅱ型糖尿病模型的比较研究
目的 比较三个品系小型猪对高糖高脂饲料诱发Ⅱ型糖尿病模型的敏感性,为我国小型猪在Ⅱ型糖尿病研究中的应用提供基础资料.方法 4～5月龄巴马小型猪、五指山小型猪和中国农大小型猪各6头,以4头中国农大小型猪为对照,同步开展高糖高脂饲料喂养试验,试验周期8个月.每月称1次体重,测定血糖、血清胰岛素含量,每2个月进行1次静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT),测定脂质代谢相关指标.结果 巴马小型猪和五指山小型猪对高糖、高脂饲料比较敏感,在饲喂5～6个月后,开始出现糖代谢异常,表现为显著肥胖、血清胰岛素升高和胰岛素敏感性下降.至实验后8个月,巴马小型猪和五指山小型猪各有1头发展为糖尿病,分别有3头和2头出现糖尿病前期症状.中国农大小型猪对高糖高脂饲料诱发糖尿病相对不敏感,实验期间空腹血糖水平、血清胰岛素含量、胰岛素敏感指数和IVGTT一直无显著变化,仅在实验后7个月开始表现肥胖,8个月出现胰岛素敏感性减低.三个品系小型猪在高糖高脂饲喂后,血脂相关指标(TG,CHO,HDL-C,LDL-C)普遍升高,以巴马小型猪升高幅度大.结论 巴马小型猪和五指山小型猪对高糖、高脂饲料诱发Ⅱ型糖尿病比较敏感,品系内个体差异较大.中国农大小型猪相对不敏感.这一结果为进一步的Ⅱ型糖尿病相关基因分析和高敏感家系培育研究提供了基础资料.
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广西巴马小型猪活化素βA/βB基因cDNA克隆与序列分析
目的 通过克隆广西巴马小型猪活化素(activin)βA/βB基因cDNA,分析其序列,为研究活化素的生物学功能打下基础.方法 提取广西巴马小型猪发情母猪的卵巢总RNA,并以其为模板,以下游特异性引物为反转录引物,在AMV酶作用下合成cDNA;用LA-Taq进行PCR扩增出包括成熟肽在内的activin βA及βB基因的部分序列,把两个序列分别连接到PMD-18载体进行克隆和序列分析.结果 包括成熟肽在内的activin βA及βB基因的部分序列长度分别为964 bp和791 bp,两个亚基的序列比较保守,与CenBank上发表的猪activin两个亚基同源性达到99.79%和99.62%.activinβA基因有两个碱基发生突变,其中一个在成熟肽序列上,一个在非编码序列上;βB基因信号肽序列上有三个碱基发生突变,其中一个是同义突变.
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广西巴马小型猪雄性初情期和精液性状的分析
目的 探讨广西巴马小型猪雄性初情期和精液品质性状.方法 将15、20、25、26、27、28、29、30、45、55、62、75日龄巴马小型猪睾丸制作成切片,检查其曲细精管中是否已经产生精子;采集巴马小型猪精液,检测其物理性状和化学成分.结果 初步判断雄性巴马小型猪的初情期为45日龄左右.巴马小型猪精液的主要物理性状:射精量107.5 mL±39.0 mL、酸碱度7.6±0.3、精子密度0.732亿/mL、精子活率0.754±0.079、精子活力0.376±0.168、精子畸形率0.256±0.159.主要化学成分:Na+ 1.56 mg±0.13 mg/mL、K+ 0.78 mg±0.06 mg/mL、Cl- 1.62 mg±0.18 mg/mL、磷脂8.7 mg±0.2 mg/100 mL、果糖117.4 mg±81.0 mg/100 mL、柠檬酸45.6 mg±77.6 mg/100 mL.
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氯胺酮和速眠新Ⅱ复合麻药剂量对巴马小型猪的麻醉效果及影响
目的 研究氯胺酮和速眠新Ⅱ复合麻醉方法用于巴马小型猪实验的麻醉效果,初步观察复合麻药对动物机能指标的影响.方法 使用氯胺酮和速眠新Ⅱ按2:1.5 (mL)的体积制成混合麻醉剂,在0.3-0.5 mL/kg的剂量范围内,给予动物一定剂量的麻药进行麻醉,记录麻药剂量、麻醉效果和生理指标.结果 随着麻醉剂量的增加,麻药起效时间、肌松时间和眼睑反射消失时间均降低;动物心率和呼吸频率增加,对血压影响不大.结论 0.3-0.4mL/kg可以作为安全剂量用于小型猪的麻醉,不但起到良好的麻醉效果,对生理指标影响也不大.
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巴马小型猪1型糖尿病模型的建立
目的 建立链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导巴马小型猪糖尿病模型.方法 10头小型猪随机分3组,设为对照组(2头)、实验1组(2头)和实验2组(6头),分别静脉注射生理盐水、120 mg/kg的STZ和150 mg/kg的STZ.在应用STZ后24h内,每小时检测一次血糖,此后每天一次,1个月后处死动物,取胰腺做病理学检查.结果 120 mg/kg的STZ可引起一过性糖尿病,血糖在17 d后逐渐恢复.150 mg/kg的STZ,引发3/6头小型猪严重的糖尿病,血糖维持在16.1～35.0 mmol/L之间,不能自发恢复;2/3头小型猪呈一过性高血糖,类似应用120 mg/kg的STZ组动物的变化;此外,还有1/6头动物未发生明显的高血糖.结论 巴马小型猪一次性静注120 mg/kg的STZ可引起一过性糖尿病,150 mg/kg的STZ可引起严重的糖尿病,动物对STZ的反应个体差异很大.
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陆眠宁复合麻醉巴马小型猪超声心动图检查分析
目的：观察陆眠宁复合麻醉对小型猪的全身麻醉效果，强调全身麻醉的安全保障意识。采用超声心动图研究正常小型猪心脏的主要功能和结构，为后续比较医学研究做准备。方法43头巴马小型猪，耳后颈部肌肉注射5 mL 混合液：陆眠宁，硫酸阿托品，氟哌利多各1支，全麻后进行超声心动图检查。观察麻醉显效时间、麻醉维持时间、总检查时间、苏醒时间及其他麻醉相关情况。简介气管插管术。结果麻醉诱导期为（18±3） min，麻醉期（40±5） min，苏醒期（60±10） min。左房直径LAD（2?54±0?20） cm，左室舒张末直径LVDd（3?41±0?25） cm，左室收缩末直径LVDs（2?28±0?23） cm，室间隔厚度IVSTd（0?60±0?07） cm，左室后壁厚度LVPWTd （0?59±0?07） cm，主动脉宽度AoD（1?77±0?18） cm，左室舒张末容积EDV（48?59±8?31） mL，左室收缩末容积ESV（18?28±4?46） mL，每搏输出量SV（39?30±5?16） mL，左室射血分数EF（62?76±5?01）％。结论陆眠宁与氟哌利多、硫酸阿托品复合麻醉，用于小型猪的心动图检查，是一种简便快速、安全有效的麻醉方法。本研究获得了正常小型猪心脏主要功能和结构的资料，为科研和兽医临床提供参考。
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巴马小型猪大肠埃希菌的分离鉴定及耐药性试验
目的 分离鉴定引起巴马小型猪腹泻的细菌并筛选出对其敏感的特效药物.方法 通过常规细菌学检测、分子生物学鉴定、生化试验等方法对疑似细菌感染的巴马小型猪进行分析,同时选用呋喃妥因、美满霉素、庆大霉素等25种药物对分离的细菌进行药敏实验.结果 通过以上实验判定巴马小型猪为大肠埃希菌感染引起的腹泻,血清型为0138;药敏试验分析结果表明,该菌株仅对青霉素、链霉素、头孢曲松和呋喃妥因4种药物敏感,对磷霉素、磺胺脒、左氟沙星等高度耐药.结论 大肠埃希菌广泛存在耐药性,该研究结果为防治相关实验动物大肠埃希菌感染提供理论依据.
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蕨麻猪与巴马小型猪脏器指数及低氧相关基因的比较
目的 研究蕨麻猪与巴马小型猪脏器指数及低氧相关基因表达量的差异.方法 采用TaqMan探针实时定量PCR(real-time quantitative PCR)技术,检测蕨麻猪与巴马小型猪心、肝、脾、肺、肾低氧反应基因表达量的变化.结果 蕨麻猪的肾脏、脾脏指数低于巴马小型猪,蕨麻猪的心脏、肺脏指数高于巴马小型猪.蕨麻猪血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF) 与低氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor 1,HIF-1α)在肺、肾中的表达量明显比普通猪高(P<0.05或P<0.01);促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)只在肺中比巴马小型猪高(P <0.05).结论 不同物种脏器指数可能是物种对物质环境、能量环境、外界病原体、能量代谢需求等综合因素进化适应的结果.蕨麻猪低氧相关基因明显比巴马小型猪高,揭示在基因方面蕨麻猪具有较强的高原适应性.
