饱和氢气生理盐水对大鼠心肌缺血再灌注损伤模型的影响

目的 研究饱和氢气生理盐水对大鼠心肌缺血再灌注模型梗死质量百分比、血流动力学变化及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)表达的影响.方法 90只大鼠随机分为3组:G1组,假手术组(n=30);G2组,缺血再灌注(I/R)组(n=30);G3组,缺血再灌注用饱和氢气生理盐水处理组(n=30).结扎大鼠冠状动脉前降支(LAD) 30 min,松扎再灌注24 h,制备心肌缺血再灌注损伤模型,再灌注24 h后测量心肌梗死质量百分比、血流动力学及TNF-α的基因表达情况.结果 与G1组相比,再灌注24h后G2、G3组左心室收缩压(LVSP)、等容收缩期左心室压力上升的大速率[+(dp/dt) max]、等容舒张期左心室压力下降的大速率[-(dp/dt) max]显著下降(P＜0.01),左心室舒张末压(LVEDP)显著增加(P＜0.01),TNF-α表达明显上调(P＜0.01).与G2组相比,再灌注24 h后G3组心肌梗死质量百分比明显减小(P＜0.01),LVSP、+(dp/dt) max、-(dp/dt) max显著增加(P＜0.01),LVEDP显著下降(P＜0.01),TNF-α表达明显下调(P＜0.01).结论 饱和氢气生理盐水能有效减小梗死质量百分比,改善血流动力学参数,其机制可能与其降低炎性反应相关.

远志皂苷对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨远志皂苷(TS)对大鼠心肌缺血后再灌注导致的损伤的保护作用及作用机制.方法:结扎冠状动脉左前降支造成心肌缺血再灌注损伤模型;缺血同时静脉缓慢注射远志皂苷,测定其对损伤大鼠血清中CPK及心肌组织中SOD和NO生成的影响,并测定心肌梗死的重量.结果:TS可以抑制大鼠血清CPK的升高和心肌组织中NO的形成,提高SOD的活力,减少大鼠心肌梗死的范围.结论:TS可以减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,作用的机制可能和抗氧自由基及NO自由基的形成有关.

内质网应激联合线粒体在高血糖加重脑缺血再灌注损伤中作用的体外实验研究

目的:通过体外实验探讨内质网应激联合线粒体在高血糖加重脑缺血再灌注损伤中的作用.方法:采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法构建高血糖大鼠模型,进而通过体外海马脑片缺氧缺糖/复氧复糖培养建立脑缺血再灌注模型.实验分为正常对照组(NC)、正常血糖缺氧缺糖/复氧复糖组(N-OGD/R)和高血糖缺氧缺糖/复氧复糖组(H-OGD/R).采用免疫组化法检测脑片中胱天蛋白酶(Caspase)-3、细胞色素C(Cyt C)蛋白表达,ELISA法检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,以及荧光定量RT-PCR技术检测葡萄糖调节蛋白(GRP)78mRNA表达量.结果:与N-OGD/R组相比,H-OGD/R组Caspase-3和Cyt C的平均光密度(OD)明显升高(Caspase-3:0.348±0.004,F13.398,P﹤0.01;Cyt C:0.328±0.005,F15.444,P﹤0.01),LDH含量明显增加(6.323±0.499,F45.846,P﹤0.01),GRP78mRNA的表达量明显升高(2.350±0.522,F13.347,P﹤0.01).结论:高血糖可加重大鼠脑缺血再灌注损伤,内质网应激(ERS)联合线粒体途径可能协同参与了大鼠脑缺血再灌注损伤过程.

樟芝多糖预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 研究樟芝多糖对大鼠预处理后,对于心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法 健康SD大鼠50只,随机分为5组,分别为假手术组,模型组,樟芝多糖高、中、低剂量组,每组10只.通过可逆性左冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血再灌注模型:给予大鼠心肌缺血0.5h,复灌2h.樟芝多糖组分别在术前30 min灌胃给予樟芝多糖100、50、10 mg/kg,而模型组和假手术组灌胃等量生理盐水.ELISA法检测大鼠血清中丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)的表达,心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1 β(IL-1 β)、白介素-6(IL-6)的水平.Western-Blot法检测心肌组织中Bcl-2、Bax、caspase-3的表达.测算心肌梗死面积,心肌组织HE染色.结果 与模型组相比,樟芝多糖预处理的大鼠心肌梗死面积显著降低,血清中MDA、CK、CK-MB和心肌组织中TNF-α、IL-1β、IL-6表达显著降低,血清中SOD和CAT表达显著上升,心肌组织中Bax、caspase-3表达降低、Bcl-2表达升高.HE染色显示樟芝多糖预处理的大鼠心肌组织受损程度相比模型组显著降低.结论 樟芝多糖可以通过抵抗氧化应激和炎症损伤降低心肌细胞凋亡,对心肌缺血再灌注损伤的大鼠起到保护作用.

银杏叶对兔视网膜缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的探讨银杏叶对视网膜缺血再灌注损伤保护作用.方法制作兔视网膜缺血再灌注损伤模型,随机分为4组:假手术组;缺血再灌注组;缺血再灌注+ERG 1组[60mg/(kg*d)],缺血再灌注+EGb 2组[120mg/(kg*d)].记录缺血再灌注前,后30min、1h、2h、4h、1天 EGb.缺血再灌注组:缺血再灌注前、后12h 1天、3天、1周、2周ERG;缺血再灌注+EGb 1组、2组:3天、2周病理检查.结果缺血再灌注组ERG-a波60min恢复到正常,ERG-b波幅度下降,恢复时间减慢.EGb 1组,EGb 2组b波幅度下降不明显,恢复时间缩短,1天后ERG基本正常.缺血再灌注组,再灌注解除后12h,视网膜水肿,厚度明显增加,24h恢复至正常,3天、7天、2周后视网膜厚度,细胞密度逐渐降低,2周后缺血再灌注组整个视网膜的厚度比正常组明显减少,2周与1周比较差异无显著性(t=0.628,P＞0.05).结论银杏叶使视网膜缺血再灌注后ERG的b波得以恢复,病理改变减轻,对视网膜缺血再灌注损伤有明显的保护作用.

肠道缺血再灌注对急性出血坏死性胰腺炎早期炎症反应的影响

目的:探讨肠道缺血再灌注(ⅡR)对急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)早期炎症反应的影响.方法:选取AHNP患者62例,随机分为观察组和对照组,对照组给予除外快速液体复苏的综合措施治疗,观察组给予包括快速液体复苏的综合措施治疗,所有患者在治疗前、治疗1h、6h、12h、24 h、48h时测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的水平.结果:两组治疗前血清TNF-α、IL-6比较,差异均无统计学意义；治疗1h后,观察组TNF-α、IL-6水平逐渐升高,至12h时达峰值,此后又逐渐降低,与相应前一时点比较,差异均具有统计学意义；对照组治疗6h后,血清TNF-α、IL-6达峰值,除治疗6h后TNF-α、IL-6和治疗12h后IL-6与相应前一时点比较差异具有统计学意义外,其余各相邻时点比较,差异均无统计学意义；但治疗后各时点,观察组与对照组比较,差异均具有统计学意义.结论:肠道缺血再灌注进一步加剧了AHNP患者的早期炎症反应,患者血清TNF-α、IL-6水平逐渐升高,至12h时达峰值,此后又逐渐降低.对于AHNP患者,早期可不必急于给予缺血再灌注,以避免加剧炎症反应.

异丙酚对大鼠小肠缺血再灌注后血流动力学的影响

目的:研究大鼠小肠缺血再灌注后血流动力学变化及不同剂量异丙酚对其影响.方法:雄性SD大鼠40只,随机分为假手术对照组(C组)、小肠缺血再灌注组(IIR组)及分别给予异丙酚4、8、10mg@kg1@h1(P4、P8、P10)5组;制作小肠缺血再灌注模型.阻断前、阻断后5'、30'、60'、及开阻断后5'、30'、60'、120'记录平均动脉压(MAP)、平均肺动脉压(MPAP)及心率(HR).结果:开阻后各试验组与C组、用药组与IIR组对应时间点及试验组开阻断前后相比MAP(P<0.05)、MPAP(P<0.01)均有明显差异.开阻后P8、P10两组MPAP与P4组相比差异非常明显(P<0.01).结论:小肠缺血再灌注对大鼠血流动力学影响显著,临床剂量异丙酚可明显改善大鼠小肠缺血再灌注后全身低灌注状态;部分抑制平均肺动脉明显升高,并且与剂量有关.

细胞死亡在肝移植缺血再灌注损伤中的研究及治疗进展

细胞死亡对于机体的器官发育、生长等具有重要作用.随着关于调节细胞死亡的机制研究不断发展和深入,在癌症的治疗中取得了初步成效并投入临床试验中.在器官移植领域,细胞死亡是缺血再灌注损伤的重要病理机制之一.而缺血再灌注损伤又与肝移植的高死亡率密切相关.该文通过回顾细胞死亡在缺血再灌注损伤中的研究的现状、进展,探讨了抗细胞死亡治疗方法在缺血再灌注损伤可行性及目前存在的一些主要问题.

缺血预处理对缺血骨骼肌收缩功能的影响

目的:探讨缺血预处理对骨骼肌缺血再灌注期间收缩功能的影响.方法:采用大鼠后肢缺血再灌注模型,将14只大鼠随机分为对照组和实验组.对照组:持续缺血4小时,再灌注1小时;实验组:缺血5 min,再灌注5 min,重复3次后,持续缺血4小时再灌注1小时.测定缺血再灌注期间腓肠肌收缩功能变化及再灌注1h后,血清磷酸激酶(CK),丙二醛(MDA)和腓肠肌99m锝亚甲基二磷酸钠(99mTcMDP)吸收量变化.结果:实验组腓肠肌收缩功能较对照组明显增强(P＜0.05),实验组血清CK、MDA及99mTcMDP吸收量与对照组相比显著降低(P＜0.05).结论:缺血预处理能有效改善缺血再灌注期间骨骼肌的收缩功能,减轻骨骼肌坏死程度.因此,缺血预处理对骨骼肌缺血再灌注损伤具有保护作用.

参附注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤防治作用的实验研究

目的:探讨参附注射液(SF)对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及可能的作用机制.方法:选择健康成年雄性SD大鼠36只,随机分入IR+NS组、IR+SF组和C组.采用钳闭大鼠肠系膜上动脉缺血再灌注模型.用免疫组织化学技术检测肠组织核转录因子-kB(NF-kB)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达和分布;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肠组织和血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量.结果:SF能明显减轻缺血再灌注导致的小肠组织的病理损害(P＜0.01).在IR+NS组,肠组织NF-kB活化和iNOS表达及TNF-α含量均较C组显著升高(P＜0.01);在IR+SF组,肠组织NF-kB的活化和iNOS表达及TNF-α含量均低于IR组(P＜0.01).结论:SF可降低肠缺血再灌注时肠组织和血浆中TNF-α的含量及iNOS的表达,减轻肠粘膜损伤,其机制可能为抑制肠粘膜NF-kB的活化.

参附注射液对大鼠缺血再灌注小肠细胞Bax、Bcl-2及c-myc蛋白表达的影响

目的:探讨参附注射液对大鼠缺血再灌注小肠细胞Bax、Bcl-2及c-myc蛋白表达的影响及它们与肠细胞凋亡的内在联系.方法:健康SD大鼠36只随机分为三组,空白对照组(S组)、缺血再灌注+生理盐水组(IR组)、缺血再灌注+参附注射液组(SF组),每组12只.采用钳闭肠系膜前动脉制备小肠缺血再灌注模型.免疫组化检测Bax、Bcl-2及c-myc蛋白的表达,每组选24个视野分别测量光密度值(OD值).TUNEL法检测凋亡的小肠细胞并计算凋亡指数.结果:①IR组Bax OD值明显高于S组(P<0.01), SF组Bax OD值明显低于IR组(P<0.01),且低于S组(P<0.05);②IR组Bcl-2 OD值高于S组(P<0.05).SF组Bcl-2 OD值高于S组(P<0.01),且IR组与SF组比较有显著差异(P<0.01);③IR组c-myc OD值明显高于S组(P<0.01),且明显高于SF组(P<0.01).IR组细胞凋亡指数明显高于S组和SF组(P<0.01),而SF组高于S组(P<0.05).结论:参附注射液增加小肠组织Bcl-2蛋白的表达,降低Bax及c-myc蛋白的表达,抑制小肠细胞凋亡,保护缺血再灌注小肠.

过氧化物酶体增殖物激活受体在实验性大鼠缺血再灌注心肌中的表达

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)在实验性实验性大鼠缺血再灌注心肌中的表达.方法:Wistar大鼠66只随机分为三组:正常对照组(n=18),假手术组(n=24),缺血再灌注组(n=24).采用鼠心冠状动脉左前降支结扎法制作在体缺血再灌注模型.运用半定量RT-PCR方法对心肌PPAR mRNA的表达情况进行分析,运用Western-blotting方法对检测PPAR蛋白表达情况.并测定各组血清游离脂肪酸的含量.结果:缺血再灌注组心肌PPAR mRNA 0.455±0.139较正常对照组及假手术组(分别为 0.711±0.120、0.812±0.148)显著减少(P<0.01);缺血再灌注组心肌PPAR 蛋白表达为67.37±23.46较正常对照组及假手术组(110.49±19.77、102.18±12.56)显著减少(P<0.01).缺血再灌注组游离脂肪酸于再灌注后4 h、6 h显著上升.结论:在实验性实验性大鼠缺血再灌注心肌中PPAR 表达减少同时伴有大鼠血液中游离脂肪酸增多.

依达拉奉预处理对大鼠脑缺血再灌注海马细胞凋亡及hsp-70表达的影响

目的:观察依达拉奉预处理对脑缺血再灌注后海马组织神经细胞凋亡及hsp-70表达的影响.方法:将45只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水对照组、依达拉奉预处理组,各15只.采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型.脑缺血再灌注前12 h,预处理组给予依达拉奉3 mg/kg,对照组给予等量生理盐水分别腹腔注射.脑缺血再灌注24 h后断头取脑,应用免疫组织化学法及原位细胞凋亡检测脑缺血再灌注海马组织hsp-70表达及凋亡细胞.结果:与假手术组比较比较,依达拉奉预处理组术后24 h原位末端标记(TUNEL)、hsp-70阳性细胞明显增加,差异有显著性(P<0.01).与对照组比较,依达拉奉预处理组术后24 h TUNEL阳性细胞明显减少(P<0.01).依达拉奉预处理组术后24 h hsp-70阳性细胞数较对照组明显增加(P<0.01).结论:凋亡机制参与了脑缺血再灌注后继发性损伤的过程,依达拉奉可能通过上调hsp-70蛋白表达,减轻脑缺血再灌注后的细胞凋亡,增加脑缺血再灌注损伤应激耐受性保护和神经损伤起保护作用.

缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的研究

目的：探讨缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的相关机制。方法取体外新生大鼠心肌细胞作为试验样本，将其随即平均分配为四组，A组为对照组，B组为模拟缺血组，C组为缺血2 h后再灌注1h组，D组为缺血持续3 h组。采用TUNEL法对各组样本心肌细胞凋亡情况进行检测，并采用免疫组织化学法对Bcl-2/Bax基因的表达情况进行检测。结果在心肌细胞I/R后，检测到明显的阳性凋亡细胞，同时D组和C组细胞凋亡指数明显高于B组，差异具有显著性（P<0.05）；免疫组织化学检测结果表明，Bax蛋白表达明显上调，Bcl-2基因表达明显下调。结论缺血和缺血再灌注均会造成心肌细胞凋亡，同时心肌细胞的凋亡同Bcl-2/Bax基因的表达之间存在一定的相互作用关系。

构建表达Livin的逆转录病毒载体及其在大鼠心肌细胞中的表达

目的 构建表达Livin的逆转录病毒载体,并观察其转染大鼠心肌细胞后,心肌细胞Livin表达水平的变化情况.方法 ①建立表达Livin的逆转录病毒载体,并用PCR酶切及DNA测序鉴定;②健康SD大鼠30只,分为正常组、Livin组和空载体对照组;Livin组开胸心肌内注射表达Livin的逆转录病毒载体;空载体组开胸注射空载体,两组均于手术24 h后再开胸取出心脏;正常组直接开胸游离心脏;③荧光定量PCR检测大鼠心肌Livin mRNA表达量.结果①成功构建了表达Livin的逆转录病毒载体;②荧光定量PCR检测到正常大鼠心肌细胞有Livin表达;③注射表达Livin的逆转病毒载体后Livin表达显著增多.结论 表达Livin的逆转录病毒载体可以在大鼠心肌内成功表达,转染表达Livin的逆转录病毒载体,有可能成为增加大鼠心肌抗凋亡基因、抑制心肌细胞凋亡、防治再灌注损伤的有效治疗措施.

麝香配伍冰片对缺血再灌注损伤后血脑屏障的影响

目的 研究大鼠脑缺血再灌注后血脑屏障的损伤及麝香配伍冰片对血脑屏障的影响.方法 采用大脑中动脉线栓法建立脑缺血2 h再灌注24 h、48 h模型,比较各组神经功能评分,用实时荧光定量PCR方法 检测各组脑组织情况.结果:再灌注24 h时麝香配伍冰片组、麝香组、尼莫同组积分下降明显,再灌注48h时麝香配伍冰片组、安宫牛黄丸组积分较相应模型组积分下降明显(均P ＜0.01);麝香配伍冰片组、安宫牛黄丸组可显著降低脑组织中ICAM-1 mRNA、LFA-1 mRNA的表达(P ＜0.01),冰片组ICAM-1 mRNA和再灌注48h时LFA-1mRNA也有明显降低(P ＜0.05);麝香配伍冰片组、安宫牛黄丸组、冰片组脑组织MMP-9 mRNA表达均受到明显抑制;三组TIMP-1 mRNA表达明显升高,再灌注24h时麝香组也有相同变化趋势;麝香配伍冰片组、安宫牛黄丸组、冰片组脑组织AQP-4 mRNA的表达受到明显抑制.结论麝香配伍冰片可以通过抑制ICAM-1 mRNA、LFA-1 mRNA、MMP-9 mRNA和AQP-4 mRNA 的表达,提高TIMP-1 mRNA的表达来减轻血脑屏障损伤,这可能是芳香开窍药醒脑开窍的机理.

黄角汤对大鼠脑缺血再灌注损伤模型自由基影响的实验研究

目的探讨黄角汤对大鼠脑缺血再灌注损伤时自由基损伤的影响,以探讨治疗其可能机制.方法采用大脑双侧颈总动脉闭塞的不完全性脑缺血再灌注模型,选用黄角汤及尼莫地平对模型进行治疗,并设正常组及模型组.观察各组大鼠血浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量的变化.结果模型组大鼠血浆MDA值显著高于正常组,SOD值显著低于正常组.黄角汤组SOD、MDA值有不同程度的恢复(P＜0.05,P＜0.01).结论黄角汤对大鼠脑缺血再灌注损伤的机制与纠正血浆SOD/MDA平衡失调、抗自由基损伤等有关.

不同间隔火针预处理对脑缺血再灌注大鼠血液流变学的影响

目的 观察不同间隔火针预处理对脑缺血再灌注大鼠保护作用的差异.方法 采用不同间隔火针点刺"百会"、"大椎"、"命门"、"足三里"、"悬钟",相应时间均治疗5次后制作可逆性脑缺血再灌注损伤大鼠模型,再灌注24小时后腹腔静脉取血检测血流变.结果 隔两日针刺组全血粘度明显低于MCAO再灌注模型组和隔日组(P<0.05),隔日针刺组全血粘度明显高于假手术对照组(P<0.05).结论 不同间隔火针预处理对脑缺血再灌注后降低全血粘度具有差异性,且隔两日效果较优.

柴胡桂枝汤介导NO对消化道缺血再灌注诱发肝损害的预防作用

阿魏酸对体外低糖低氧损伤兔窦房结细胞凋亡及β-微管蛋白的影响

目的：观察阿魏酸对体外低糖低氧损伤兔窦房结细胞凋亡及β-微管蛋白(β-tubulin)的影响，探讨其作用机制。方法取新生乳兔窦房结细胞，分为空白对照组，模型组，阿魏酸高、中、低剂量组。除空白对照组外，其他组以缺氧缺糖模拟缺血，以恢复氧和糖的供应模拟再灌注造成窦房结细胞损伤模型。在造模更换培养基时，阿魏酸高、中、低剂量组分别加入阿魏酸溶液100、20、10μmol/ml，模型组加入等体积培养基，空白对照组予正常培养基培养。运用流式细胞仪检测各组窦房结细胞凋亡率，激光共聚焦显微镜观察β-tubulin 的形态变化。结果与空白对照组比较，模型组细胞凋亡率[(56.95±11.99)%比(31.45±6.32)%]明显增加（P＜0.01），β-tubulin表达[(5.141±0.218)比(8.035±0.762)]降低；阿魏酸高、中剂量组细胞凋亡率[(24.85±6.34)%、(26.70±9.84)%比(56.95±11.99)%]明显低于模型组（P＜0.01），β-tubulin表达[(7.927±0.357)、(5.961±0.351)比(5.141±0.218)]较模型组升高（P＜0.01）。结论阿魏酸可抑制低糖低氧引起的窦房结细胞凋亡，保护窦房结β-tubulin蛋白形态。