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温度对快速碱性磷酸酶染色灵敏度的影响
中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色对鉴别诊断血液病具有重要价值.萘酚AS-BI磷酸底物法NAP染色孵育仅15min[1,2],为孵育时间短的快速NAP染色方法,其染色温度为室温[1,2],与其他NAP染色方法[3-5]的37℃不同.本文对比分析37℃、30℃、20℃孵育时该染色的积分差异,以确定其适宜温度.
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动脉粥样硬化模型小鼠心脏中 Movat染色技术的应用
目的：：ApoE基因敲除小鼠为目前研究动脉粥样硬化的常用模型之一，其在高脂饲养下可加速形成主动脉粥样硬化斑块。动脉粥样硬化的病灶成分有平滑肌细胞、泡沫细胞、胆固醇结晶、胶原纤维、弹力纤维和蛋白聚糖。 Movat染色技术可以在一张切片上直观显示出这几种成分的病理变化，规范和细化的实验操作步骤可以保证染色结果的一致性，为动脉粥样硬化的深入研究提供清晰可靠的实验依据，从而更客观的评估实验结果。方法：ApoE基因敲除小鼠，雄性70只随机分为8组：ApoE空白组，阳性对照药组，治疗药物A高、中、低剂量组，治疗药物B高、中、低剂量组，以及6只C57小鼠对照组。高脂饲养26周后，采血后处死。取心脏，石蜡包埋后进行定位切片。分批进行染色，染色过程中摸索和细化了染液配置、染色温度、染色时间等条件，规范实验操作。成片后进行组织病理学观察，并对胶原纤维、弹力纤维、蛋白聚糖、泡沫细胞等进行定性和定量分析。结果：通过试验建立了细化、规范化的Movat染色操作流程。光镜下观察染色结果可见各结构成分着色分明：胶原纤维和弹力纤维分别为黄色和黑色，蛋白聚糖呈绿色，泡沫细胞呈淡紫色，心肌平滑肌呈红色。主动脉粥样硬化斑块病灶部位结构清晰，病理表现为血管平滑肌增生，胶原纤维、平滑肌细胞和蛋白聚糖形成纤维帽，纤维帽下泡沫细胞形成并向下延伸，脂质大量沉积，弹力纤维断裂。与空白组和阳性对照组相比，治疗药物A和B均对病症的严重程度和病程进展有一定的治疗效果。结论：在本实验中对Movat染色的染液配置、染色时间、染色温度等进行细化和调整，为实验操作流程的规范化提供依据。在保证了实验统一性的基础上，可客观评估药物对动脉粥样硬化的治疗效果，同时因粥样斑块各结构成分颜色分明，利于镜下成像鉴别，可对各成分进行定量统计分析，为实验结果提供了可靠的实验数据。
