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利用BioLumix微生物荧光光电检测系统快速检测蜡样芽胞杆菌
近段时期,由微生物污染导致的国内外食品安全事件频发,从德国的0104:H4出血性大肠杆菌污染事件,到香港食物安全报告显示某牛奶产品被检出蜡样芽胞杆菌超标,让我们感到由食品微生物污染引起的食源性疾病依然是食品安全的主要问题.针对目标微生物的有效检测需要快速、敏感和特异的方法.本文以蜡样芽胞杆菌的检测为例,通过具体的实验数据,探讨并验证了美国BioLumix实时快速微生物荧光光电检测系统是能够简便、快速、准确检测病源菌的自动化的科学仪器.蜡样芽孢杆菌中毒的临床症状与病源分布 蜡样芽孢杆菌为产大型芽孢的革兰氏阳性杆菌,与沙门氏菌、大肠杆菌等相比,更耐受高温和化学处理. 全球食源性疾病中大约有5％是由蜡样芽胞杆菌引起的,食用蜡样芽胞杆菌超标的食品可能导致呕吐、腹泻等食物中毒症状.呕吐型是由一种小分子量、耐热的肠毒素引起,腹泻型是由一种大分子量的肠毒素所致.快速、简便地检测出样本中潜在的蜡样芽孢杆菌对防治其所引起的食源性疾病非常重要.
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美凯纯简便快速的微生物检测
微生物实时荧光光电检测技术是近年来新兴的细菌、霉菌、酵母菌快速检测技术.它将改进后的传统培养分离技术、染色技术、传感和荧光检测技术以及计算机控制的模块化技术合为一体,大大简化了传统微生物的检测方法,将检测时间从数天缩短为数小时.其代表产品BioLumix全自动实时微生物荧光光电检测系统正是基于上述技术推出的一种全自动检测系统.
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中华眼镜蛇毒诱导人类小涎腺腺样囊性癌细胞凋亡报告
我们尝试应用近年发展起来的对恶性实体肿瘤有较高可评估率的新方法三磷酸腺苷-生物荧光肿瘤化疗药物敏感试验法(ATP-TCA法),测定眼镜蛇毒对人类小涎腺腺样囊性癌(NACC)细胞株的抑制作用,测定眼镜蛇毒与癌细胞存活的量效和时效关系,应用HE染色观察眼镜蛇毒作用NACC细胞后其细胞形态学的改变,以及流式细胞术检测眼镜蛇毒作用后的NACC细胞凋亡等方面的实验,为眼镜蛇毒的抗肿瘤临床应用提供实验依据.
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生物荧光肿瘤体外药敏检测技术的临床应用
化学治疗是治疗恶性肿瘤的常规有效手段之一[1].由于肿瘤本身存在个体差异性,即便是同一组织学类型、分化程度相同的肿瘤,对药物敏感谱也显著不同.如果在用药前缺乏该癌症患者对化疗药物敏感性和耐药性的直接实验依据,在化疗方案的制定上不可避免地存在一定的盲目性.选药物不准,不仅将有损患者身体,更重要的是可诱导肿瘤细胞产生对多种药物的多药耐药,贻误治疗时机.因此,临床亟需一种能在治疗前为患者筛选敏感药物的技术方法,以确定高效的针对肿瘤患者的个体化治疗方案.
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不同清洁消毒方式对导管室物体表面除菌效果的研究
目的：采用ATP生物荧光检测法，比较不同清洁消毒方式对导管室物体表面的除菌效果，为寻找导管室适宜的清洁消毒方式提供参考。
方法：选择导管室两个操作间及控制室。每个操作间及控制室选取23个固定区域为采样点，包括操作台、抢救台、固定夹、门把手、鼠标、键盘、控制器、对讲器、电话手柄、平车等。对照组：前10天对两个操作间及控制室的23个固定区域采取常规方式进行清洁，由保洁员完成。观察组：后10天对23个固定区域采取由护士实施的加强消毒措施（一天三次，4小时一次，用70%的酒精擦拭）。于清洁消毒后2小时对23个固定区域测定1次RLU值。用生物荧光测试管中的专用棉拭子，在采样点往返涂擦2遍取样。将取样后的棉拭子放人试管中，快速挤入裂解液和荧光素酶，反应后用荧光光度计测定相对光单位值（RLU），RLU值越高说明区域染菌量越高。使用SPSS17.0统计，所有数据采用均值（x±s ）描述；对于两组的比较，采用正态资料t检验，非正态资料非参数秩和检验，P<0.05表示差异有统计学意义。 -
乳腺癌体外化疗敏感性检测与P-糖蛋白、GST-π及HER2表达的关系
化疗是乳腺癌综合治疗中的重要环节,而耐药是导致多数乳腺癌患者化疗失败的主要原因.ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测(ATP-tumor chemosensitivity assay,ATP-TCA)是一种较为先进的药物筛选方法,本实验通过ATP-TcA法检测39例患者,结合检测P-糖蛋白(permeability glycoprotein,P-gp)、谷胱甘肽S转移酶-π(glutathione S-transferase-π,GST-π)及HER2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)在乳腺癌组织中的表达,探讨乳腺癌敏感化疗药物的选择及其耐药的相关机制.
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ATP含量与细菌数及血液稀释度的相关性研究
目的 对ATP含量与细菌数及血液稀释度进行相关性研究,探讨ATP生物荧光法检测医疗器械清洗效果的可行性.方法 将大肠埃希菌ATCC 8099稀释到108、107、106、105、104、103、102进行ATP含量测定,找到ATP含量与菌落数的对应关系；将志愿者血液梯度稀释10-1、10-2、10-3、10-4、5×10-5、2.5×10-5、2.5×10-6、2.5×10-7、2.5×10-8；进行ATP含量测定,找到ATP含量与不同血液稀释度的对应关系.结果 细菌浓度在(102～108) CFU/ml时,菌数对数值与Biotech生物荧光快速检测系统测得的ATP含量对数值成线性关系(R2=0.9791,P＜0.0001);血液稀释10-4～10-8范围时,血液稀释度对数值与Biotech生物荧光快速检测系统测得的ATP含量对数值成线性关系(R2=0.9818,P=0.0001).结论 在一定范围内ATP含量与细菌数成线性相关；血液稀释度在一定范围时ATP含量与血液稀释度成线性相关,通过ATP生物荧光法测ATP含量,可用于检测医疗器械清洗效果.
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舱室微生物浓度监测仪性能的实验评价
目的 评价舱室微生物浓度监测报警仪用于微生物气溶胶浓度检测计数的可靠性.方法 以30 m3空气质量评价舱为载体,金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、大肠杆菌(ATCC25922)、枯草芽孢杆菌(ATCC9372)、白色念珠菌(ATCC10231)、黑曲霉菌(ATCC16402)为模拟生物气溶胶,比较舱室微生物浓度监测报警仪和MAS100NT微生物采样仪检测计数结果,计算2种方法实测值的相关性、符合率和重复性.结果 对ATCC25923、ATCC25922、ATCC9372、ATCC10231、ATCC16402气溶胶检测计量结果比较,2种方法测量结果相关性显著(R2分别为0.979、0.960、0.969、0.987和0.961,均P<0.01);2种方法测量结果符合率好,对5种菌测试的平均符合率分别为93.13％、90.07％、96.16％、91.65％、90.87％;2种方法测量结果稳定、重复性好,被测的每种菌符合率组内相对标准偏差<15％.结论 舱室微生物浓度监测报警仪对模拟生物气溶胶的检测结果符合评价要求.
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门诊护理人员手卫生依从性调查
医院感染是当今突出的社会公共卫生问题,但引起医院感染有多方面的因素.洗手是医院感染控制中既简单又十分重要的环节, 已在全世界范围内引起广泛重视[1].而门诊是医院的窗口,承担着大量患者的诊治与抢救工作.每天要接触许多普通患者、疑似传染病患者和急危重患者等.门诊医护人员手卫生状况直接关系到医疗安全,加强门诊医护人员手卫生管理意义重大.针对上述情况,我们于2010年12月-2011年12月对浙江省立同德医院门诊120人次的护理人员手卫生依从性进行调查,并采取了生物荧光监测方法进行现场检测,现报告如下.
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ATP-生物荧光肿瘤药敏试验在筛选肺癌化疗药物中的应用
目的 探讨肿瘤体外药敏实验ATP生物荧光法(ATP-TCA)在肺癌化疗中的应用.方法 应用ATP-TCA对48例肺癌根治术标本、6例淋巴结活检标本、4例胸腔积液标本进行药敏检测.结果 ATP-TCA方法的可评估率为95%.健择(GEM)、诺维本(NVB)、阿霉素(ADM)分别与顺铂(DDP)组成两药联合方案(GP、NP、AP),它们的敏感率分别为78%、64%、27%.化疗药物对肺癌的杀伤作用具有较强的个体差异性.结论 ATP-TCA是一种灵敏、可靠的肿瘤药敏感检测技术,可用于肺癌化疗中化疗药物的筛选.
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ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术在乳腺癌化疗中的应用价值
目的探讨ATP生物荧光肿瘤药敏检测技术(ATP-TCA)在乳腺癌化疗中的临床意义及应用价值.方法选用10种常用乳腺癌化疗药物,应用ATP-TCA对40例乳腺癌改良根治术标本、淋巴结活检和胸腔积液标本进行药敏检测,评估肿瘤细胞对化疗药物的敏感性.结果 ATP-TCA对乳腺癌标本的可评价率为90.0%,化疗药物对乳腺癌的杀伤作用具有较强的个体差异性,10种化疗药物的敏感性分别为:氟尿嘧啶(5-Fu)33.3%、顺铂(DDP)37.5%、环磷酰胺(CTX)29.2%、足叶已甙(VP-16)16.7%、丝裂霉素(MMC)22.0%、表阿霉素(EPI)41.7%、诺维本(NVB)45.8%、阿霉素(ADM)41.7%、泰素(PTX)54.2 %、羟基喜树碱(HCPT)25.0%.初步研究表明ATP-TCA体外检测结果与实际临床疗效具有良好的相关性.结论 ATP-TCA是准确的、可靠的肿瘤药敏检测技术,其检测结果与临床实际疗效具有良好相关性,可用于指导乳腺癌术后化疗.
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三磷酸腺苷生物荧光肿瘤药敏试验在恶性实体瘤中的应用
目的 探讨肿瘤体外药敏试验三磷酸腺苷生物荧光法(ATP-TCA)在恶性实体瘤化疗中的应用.方法 采用ATP-TCA技术对23例小儿恶性实体瘤(其中肾母细胞瘤8例,恶性生殖细胞瘤6例,神经母细胞瘤5例,肝母细胞瘤4例)进行药敏检测,测定其对长春新碱(VCR)、放线霉素D(ACTD)、多柔比星(ADM)、依托泊苷(VP-16)、丝裂霉素(MMC)、卡铂(KB)、羟基喜树碱(HCPT)、顺铂(CDDP)等化疗药物的体外敏感性.结果 1例神经母细胞瘤标本因细胞数少,放弃培养,余22例标本顺利完成检测,可评估率为95.65％.化疗药物对小儿恶性实体瘤细胞的杀伤作用具有较强的个体差异性,如肾母细胞瘤对ACTD、VCR+ACTD较敏感,肝母细胞瘤及恶性生殖细胞瘤对ACTD较敏感,神经母细胞瘤的耐药率高,HCPT对肾母细胞瘤敏感性较差,但对其他3种实体瘤体外总有效率为57.14％.结论 ATP-TCA技术是一种灵敏、可靠的肿瘤细胞敏感试验方法,可用于指导临床小儿恶性实体瘤化疗药物的筛选.
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应用ATP生物荧光检测法评价医疗器械清洗质量
目的：探讨 ATP 生物荧光检测法在检测医疗器械清洗效果中的应用。方法随机抽取某院2011—2013年消毒供应中心手工清洗和机械清洗后的医疗器械，采用 ATP 生物荧光检测技术进行检测，测定相对光单位值（RLU），评价器械清洗质量。结果2011—2013年共检测清洗后器械460件，404件合格，合格率为87．83％。清洗合格率：手工清洗、机械清洗分别为70．73％、94．07％，普通手术器械、管腔器械分别为90．71％、81．76％；不同清洗方式、不同器械类别的清洗合格率比较，差异均有统计学意义（均 P ＜0．01）。2011—2013年器械清洗合格率手工清洗分别为32．35％、79．63％、94．29％，机械清洗分别为79．45％、98．15％、98．08％；不同年份手工清洗、机械清洗器械清洗合格率比较，差异均有统计学意义（均 P ＜0．01）。结论 ATP 生物荧光法可用于评价医疗器械的清洗质量。
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医用小型平板电脑现场清洁消毒方法研究
目的：对临床使用的医用平板电脑污染程度进行调查，比较3种清洁消毒方法的有效性。方法采用手持式 ATP 荧光检测仪对平板电脑前后表面进行涂擦采样，研究分为基线阶段和清洁消毒阶段，基线阶段对使用中平板电脑进行采样，清洁消毒阶段采用生理盐水纱布、乙醇纱布、卫生湿巾3种方法对平板电脑进行擦拭后分别进行采样。结果基线阶段：基线组共采集20台平板电脑，合格率为0，ATP 检测相对光单位值（RLU）中位数为218．00。清洁消毒阶段：生理盐水纱布组、乙醇纱布组和卫生湿巾组各采集10台平板电脑，合格率分别为50．00％、0和60．00％，ATP 检测 RLU 中位数分别为28．50、79．00和29．00。4组 ATP 检测 RLU 间两两比较，除生理盐水纱布组与卫生湿巾组比较差异无统计学意义（P ＝0．97），其余组别两两比较差异均有统计学意义（均 P ＜0．001）。结论日常医疗工作中医用平板电脑污染严重，卫生湿巾是较为理想的清洁消毒方法，但清洁消毒间隔时限还有待于进一步研究论证。
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ATP生物荧光检测技术相关性基础研究
目的 测试三磷酸腺苷(ATP)生物荧光检测技术与菌落数和血液含量的关系.方法 将大肠埃希菌ATCC 8099菌液和健康人的血液分别稀释为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7,加入裂解液、酶、ATP标准品,用荧光光度计测定2次相对发光值(RLU),按照公式(ATP含量=A1/A2-A1×106)换算成ATP含量(amol)；用血细胞分析仪测定血红蛋白值,以反映蛋白残留量.将各稀释度菌液、血红蛋白含量与ATP含量之间的关系进行曲线标定,判定其相关性.结果 菌数对数值与ATP含量对数值(y=1.07x-0.55,R2=0.99)；菌数对数值和ATPRLU对数值(y=1.14x+0.33,R2 =0.99),都呈线性关系.不同RLU值推算的菌数理论值与实际值相比,差异无统计学意义.稀释后血红蛋白对数值与ATP RLU对数值(y=1.03x-8.42,R2=0.99)亦呈线性关系.结论 ATP生物荧光检测技术可通过ATP值和RLU来判断细菌和蛋白含量,从而判断医疗器械和物体表面的污染程度以及清洁、清洗效果,是一种较好、较敏感的快速检测新方法.
