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一起蜡样芽胞杆菌致食物中毒调查分析
目的 科学确定一起食物中毒的致病因子及其来源,为防治食物中毒提供依据.方法 通过流行病调查分析,结合临床表现、实验室检验结果判断中毒原因.结果 从病人呕吐物、剩余食物(卤猪心)及超市采集的卤猪心中检出蜡样芽胞杆菌,卤猪心检出蜡样芽胞杆菌活菌计数为2.5×106 cfu/g.结论 确定为一起由蜡样芽胞杆菌所致的食物中毒.
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中国蜡样芽胞杆菌脉冲场凝胶电泳标准化技术的建立与应用
目的 本研究旨在选择不同的内切酶和电泳条件对蜡样芽胞杆菌(蜡样杆菌)脉冲场凝胶电泳(PFGE)方法进行评价,建立中国蜡样杆菌标准PFGE方法.方法 蜡样ATCC国际标准菌株及分离自我国不同地区和来源的蜡样杆菌,制备胶块用溶菌酶和蛋白酶K分别裂解后,选用不同的内切酶对胶块内DNA进行酶切,比较PFGE电泳结果的分离度,评价获得佳操作方案,选取51株蜡样杆菌菌株进行PFGE实验,对此实验方法进行评价分析.结果 确立的蜡样杆菌PFGE分型方法的标准操作程序,可以较好地对蜡样杆菌进行分子分型研究,初步描述了51株蜡样杆菌菌株PFGE型别特征.结论 实验确定的蜡样杆菌PFGE方法,可以为蜡样杆菌引起的食源性疾病及医院感染的溯源控制提供技术手段.
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利用BioLumix微生物荧光光电检测系统快速检测蜡样芽胞杆菌
近段时期,由微生物污染导致的国内外食品安全事件频发,从德国的0104:H4出血性大肠杆菌污染事件,到香港食物安全报告显示某牛奶产品被检出蜡样芽胞杆菌超标,让我们感到由食品微生物污染引起的食源性疾病依然是食品安全的主要问题.针对目标微生物的有效检测需要快速、敏感和特异的方法.本文以蜡样芽胞杆菌的检测为例,通过具体的实验数据,探讨并验证了美国BioLumix实时快速微生物荧光光电检测系统是能够简便、快速、准确检测病源菌的自动化的科学仪器.蜡样芽孢杆菌中毒的临床症状与病源分布 蜡样芽孢杆菌为产大型芽孢的革兰氏阳性杆菌,与沙门氏菌、大肠杆菌等相比,更耐受高温和化学处理. 全球食源性疾病中大约有5％是由蜡样芽胞杆菌引起的,食用蜡样芽胞杆菌超标的食品可能导致呕吐、腹泻等食物中毒症状.呕吐型是由一种小分子量、耐热的肠毒素引起,腹泻型是由一种大分子量的肠毒素所致.快速、简便地检测出样本中潜在的蜡样芽孢杆菌对防治其所引起的食源性疾病非常重要.
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中国八省婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌污染状况研究
目的 了解中国八省婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌的污染状况.方法 2012年在中国8个省市进行了调查,共采集1716份婴幼儿食品,采用平板计数法进行蜡样芽胞杆菌的定量分析.结果 9.85％的婴幼儿食品检出蜡样芽胞杆菌,婴幼儿配方粉和婴幼儿即食谷基辅助食品中蜡样芽胞杆菌阳性率分别为14.08％和6.01％,定量结果＞100 CFU/g的样品分别占总样品量的2.20％和1.11％.结论 我国零售婴幼儿食品存在不同程度的蜡样芽胞杆菌污染,应继续加强对婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌的监管.
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绍兴市一起学生中餐食物中毒的调查分析
2001年10月14日绍兴市某中学部分学生因食用当天该校食堂供应的中餐而发生食物中毒,经查有26人发病,主要症状为腹痛、腹泻,无发热.潜伏期短为9.5h,长的30h,中位数18.5h.根据流行病学调查、临床症状、实验室检查结果的分析,认为是一起由蜡样芽孢杆菌污染引起的食物中毒.可疑食物为第二批的豆芽菜.患者经对症治疗后全部痊愈.
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一蜡样芽胞杆菌食物中毒分离株的表型与基因型
目的 对2003年发生在云南的一起蜡样芽胞杆菌呕吐型食物中毒案例中的分离株YN0303进行表型和基因型分析研究.方法 采用16S rDNA序列分析和16S/23S rDNA ITS特征图谱分析结合形态、生理生化和基因型进行菌种鉴定;PCR检测呕吐毒素和肠毒素合成相关基因,高效液相和质谱联用(HPLC-MS)化学定量分析呕吐毒素合成情况,测试部分生理生化特性和生长温度范围,进行了panC分型和多位点序列分型(multilocus sequence typing,MI() .结果 确认了该菌株确为蜡样芽胞杆菌Bacillus cereus,虽然该食物中毒是典型的呕吐型案例,但是发现该分离株呕吐毒素相关合成基因ces呈阴性,呕吐毒素化学定量分析结果为阴性;其生理生化特性(水杨苷发酵、淀粉水解和溶血特性)与典型呕吐型菌株也不相同.panC分型并非呕吐型蜡样芽胞杆菌所属的Ⅲ型,而是属于细胞毒性强的Ⅳ型,而且其肠毒素基因hbl、nhe和cytK2也均呈阳性;多位点序列分析显示该菌是一个新型别ST753,是区域性相对独立进化菌株.结论 在该呕吐型食物中毒案例中可能有多个蜡样芽胞杆菌参与,该分离株YN0303并非主要致病株—呕吐型菌株,但可能作为细胞毒性强的菌株参与了共感染.
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石家庄市131株食源性蜡样芽胞杆菌毒力基因的分布
目的 研究石家庄市食源性蜡样芽胞杆菌毒力基因的分布及毒力活性,了解蜡样芽胞杆菌的潜在威胁.方法 采用PCR方法,对食品风险监测中分离到的131株蜡样芽胞杆菌进行肠毒素、呕吐毒素9种毒力基因扩增检测,用血平板检测的方法分析蜡样芽胞杆菌的毒力.结果 毒力基因携带率较高,至少携带一个毒力基因的菌株达到检出菌总数的99.2％(130/131),溶血素BL基因(hblACD)和肠毒素FM基因(entFM)是石家庄市食源性蜡样芽胞杆菌的主要毒力基因;检出的蜡样芽胞杆菌均产生溶血素BL,检出率为100％.结论 腹泻型肠毒素在食品中的分布比较广泛,检出的蜡样芽胞杆菌均具有溶血素,对进食者存在潜在的危险性,今后应加强监控蜡样芽胞杆菌的污染,预防和控制蜡样芽胞杆菌食源性疾病的发生.
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红河州食源性蜡样芽胞杆菌毒力基因研究
目的 了解红河州食源性蜡样芽胞杆菌毒力基因的携带情况,为食源性食物中毒的防治提供参考依据.方法 采用PCR方法对2011年1月至2014年9月红河州收集到的31株食源性蜡样芽胞杆菌10种毒力基因进行检测.结果 分离菌株普遍携带肠毒素毒力基因并且所有菌株均至少携带一种肠毒素基因,而呕吐型毒力基因只有一株菌携带.结论 红河州食源性蜡样芽胞杆菌基因携带以腹泻型为主,且携带率较高,对食品安全和公共健康存在潜在威胁.
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2012-2014年江西省市售婴幼儿配方食品中蜡样芽胞杆菌调查及呕吐毒素基因分析
目的 了解2012-2014年江西省市售婴幼儿配方食品中蜡样芽胞杆菌的污染情况并对呕吐毒素基因进行分析.方法 在全省市县中选取13个采样点,包括超市、百货商场、便利店、农贸市场、网店、批发市场,随机抽取婴幼儿配方食品397份,对蜡样芽胞杆菌进行检测和鉴定,同时应用叠氮溴化丙锭内参多重PCR方法检测分离株的呕吐毒素基因.结果397份食品中蜡样芽胞杆菌阳性率为13.10％ (52/397),其中2013年阳性率高.不同采样点的阳性率差异有统计学意义(P＜0.05),不同产地、不同流通环节和不同年龄段的阳性率差异无统计学意义(P＞0.05),52份阳性食品中检出呕吐型蜡样芽胞杆菌2份,呕吐毒素阳性率为3.85％.结论 江西省市售婴幼儿配方食品中存在蜡样芽胞杆菌及呕吐型蜡样芽胞杆菌的污染,存在一定的安全隐患,相关监管部门应继续加强监管,预防食源性疾病的发生.
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温州地区蜡样芽胞杆菌分型特征研究
目的 了解温州地区不同来源蜡样芽胞杆菌毒力基因分布、生化分型和多位点序列分型(MLST)特征.方法 参照GB 4789.14-2014对127株蜡样芽胞杆菌进行鉴定和生化分型,同时采用PCR方法检测10种毒力基因,并进行MLST基因分型.结果 127株蜡样芽胞杆菌同时携带NheA、NheB、NheC基因的菌株占94.5％(120/127),而同时携带hblA、hblC、hblD基因的占9.4％(12/127),携带ces基因的占7.9％(10/127);127株菌株除10株不能进行生化分型外,其余117株分为2型(0.8％,1/127)、5型(3.9％,5/127)、8型(1.6％,2/127)、9型(63.8％,81/127)和10型(22.0％,28/127);通过MLST分析,72株菌株共分为28个ST序列型,ST26(18.1％,13/72)、ST144(15.3％,11/72)、ST92(6.9％,5/72)和ST164(6.9％,5/72)为常见ST型别.28个ST型聚类分析显示温州地区蜡样芽胞杆菌分为4个序列群和13个单态群.结论 温州地区蜡样芽胞杆菌毒力基因携带率较高,遗传关系具有多样性.
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6种食源性致病菌质控考核结果分析
目的 对承担食品安全风险监测任务的全国各级疾病预防控制中心开展微生物质量控制考核,以评价其对6种食源性致病菌的检验能力.方法 6种质控考核菌株包括单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽胞杆菌、阪崎肠杆菌、大肠埃希菌、沙门菌以及金黄色葡萄球菌.按照2011和2012年设计的组合,将新鲜培养的致病菌增菌液混合后滴加于灭菌奶粉载体中制成样品.2011年考核制备了6种样品(Ⅰ ～ Ⅵ),2012年为10种样品(A～J).运用点分数法对两年结果分别进行满意率评价,率的比较用Pearson x2检验或对数似然比x2检验.结果 2011和2012年考核总体满意率分别为86.5％(268/310)和84.3％(375/445),2011年样品满意率低的是空白样品Ⅵ(68.0％,17/25),2012年满意率低的是G样品(0.0％,0/8).2011和2012年考核结果主要漏检的是大肠埃希菌,其中2012年大肠埃希菌漏检率占漏检总数的85.7％(60/70).2011年非考核菌中漏检多的是金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌.2012年考核结果主要多检的是金黄色葡萄球菌,占多检总数的36.8％(7/19).两年的结果均显示大肠埃希菌和阪崎肠杆菌组合样品中,大肠埃希菌的漏检率明显增高.沙门菌和大肠埃希菌的血清分型正确率较低,分别为41.5％(95/229)和45.1％(105/233).单核细胞增生李斯特菌易错误鉴别成英诺克李斯特菌,蜡样芽胞杆菌易错误鉴别成草状芽胞杆菌,阪崎肠杆菌易错误鉴别成河生肠杆菌.结论 80％以上的疾病预防控制中心对6种致病菌的定性检验能力较好,可以满足食品安全风险监测的需求.其中对沙门菌的检验能力高;金黄色葡萄球菌漏检率较低但易出现多检;大肠埃希菌的检验能力有待提高;阪崎肠杆菌的检验水平较2010年结果有明显提升.
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1986-2007年中国299起蜡样芽胞杆菌食物中毒案例分析
目的 了解我国蜡样芽胞杆菌(B.cereus)食物中毒的发生情况.方法 对我国文献报道的1986-2007年299起蜡样芽胞杆菌食物中毒案例进行统计、归类和分析.结果 我国蜡样芽胞杆菌食物中毒以呕吐型为主(占75.9%),腹泻型仅占11.4%.蜡样芽胞杆菌食物中毒在我国各省均有报道,其中南方地区发病起数较多.中毒场所中,学生食堂、饮食服务单位和职工食堂特别突出.食物中毒的高发期为夏秋季,9月份尤为突出.在引发呕吐型食物中毒的食品中粮食加工品占非常高的比例(69.6%),而在腹泻型B.cereus食物中毒中粮食加工品、肉制品和混合型食物各占30%左右的比例.呕吐型B.cereus食物中毒的潜伏期很短,一般在0.5～6 h,而腹泻型B.cereus食物中毒的潜伏期则一般在4 h以上.引发食物中毒的食品中的B.cereus含菌量绝大多数在105 CFU/g(ml)以上,但也有部分案例中B.cereus含菌量较少.结论 由我国的饮食结构、气候、食品加工和保藏方式等因素导致的蜡样芽胞杆菌食物中毒,特别是呕吐型B.cereus食物中毒,在我国比较常见.
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石家庄市市售婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌的监测及溶血素基因的分析
目的 了解目前市售婴幼儿配方奶粉、谷基辅助食品样品中蜡样芽胞杆菌的污染及其毒素基因的携带情况.方法 采集石家庄市23个区县市售婴幼儿配方粉、谷基辅助食品共399份,依照国家标准GB/T 4789.14-2003《食品卫生微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验》和《食源性致病菌监测工作手册》进行蜡样芽胞杆菌检测并计数,应用荧光PCR方法检测蜡样分离株的溶血素基因和非溶血素基因.结果 399份样品中蜡样芽胞杆菌检出85份,其中婴幼儿配方奶粉检出36份,检出率22.8％ (36/158);谷基辅助食品检出49份,检出率20.3％(49/241).85份阳性样品中有48份呈溶血素基因阳性,检出率56.5％,非溶血素基因均为阴性.结论 婴幼儿食品中蜡样芽胞杆菌的污染较严重,存在潜在的食品风险.分析结果可为婴幼儿食品卫生学检验标准及监督管理等方面提供参考.
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婴幼儿奶粉和米粉中蜡样芽胞杆菌及其毒素、毒力基因的调查研究
目的 了解婴幼儿奶粉及米粉中蜡样芽胞杆菌污染状况及其毒素、毒力基因的携带特点.方法 采用稀释培养计数(MPN计数)法分离蜡样芽胞杆菌,采用PCR技术检测10种蜡样芽胞杆菌的腹泻毒素及呕吐毒素基因,在流动相A为0.1％甲酸-乙腈溶液,流动相B为0.1％甲酸-0.2 mmol/L乙酸铵溶液条件下,用Acquity BEH300C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)对样品进行分离,采用超高效液相色谱-串联质谱法检测样品中的呕吐毒素(cereulide).结果 本研究共监测39份样品,28份检出蜡样芽胞杆菌,检出率为71.79％ (28/39);2份检出呕吐毒素,检出率为5.13％ (2/39).检出的蜡样芽胞杆菌菌株大多属于携带复合型毒素的菌株,均携带3种以上的腹泻毒素基因,非溶血性的肠毒素nhe基因(nheA、nheB和nheC)和肠毒素FM基因(entFM)为主要的毒力基因,其中nheABC基因携带率为100％,entFM基因携带率为35.71％ (10/28),cytK基因是检测到的少的一种毒力基因.结论 应加强婴幼儿奶粉及米粉中的蜡样芽胞杆菌污染监测及其毒力基因致病性研究,以科学评估蜡样芽胞杆菌对婴幼儿食品可能构成的食品安全风险.
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我国市售婴儿配方乳粉中蜡样芽胞杆菌污染及其毒力基因调查
目的 了解国内市售婴儿配方乳粉中蜡样芽胞杆菌污染及毒力基因分布情况.方法 采用MPN法定量检测婴儿配方乳粉中的蜡样芽胞杆菌,在对分离菌株正确鉴定的基础上,开展腹泻型和呕吐型毒素产生相关毒力基因的分布研究.结果 135份婴儿配方乳粉中有57份检出蜡样芽胞杆菌,检出率为42.22％.平均污染水平为7.14 MPN/g.国产产品蜡样芽胞杆菌污染较进口产品重,网售产品较超市销售产品重,差异有统计学意义(P＜0.05).共发现24种蜡样芽胞杆菌毒力基因携带模式,其中nhe基因携带率高,达92.98％ (53/57),其次为entFM基因(71.93％),70.18％ (40/57)的菌株同时携带nhe和entFM基因.亚型分型结果显示nheA、nheB和nheC 基因的携带率分别为88.72％、88.72％和49.12％.溶血素BL基因携带率分别为hblA 24.56％、hblC 22.81％和hblD 17.54％,cytK基因携带率为22.81％.有8株菌既携带nhe的3个基因又携带hbl的3个基因.结论 我国市售婴儿配方乳粉蜡样芽胞杆菌污染较重,分离到的蜡样芽胞杆菌菌株普遍携带毒力基因,建议加强对婴儿配方乳粉中蜡样芽胞杆菌污染的监管,并开展膳食暴露该菌对婴儿健康影响的风险评估,为制定婴儿配方乳粉中蜡样芽胞杆菌的限量标准提供依据.
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2012年广西市售婴幼儿食品食源性致病菌监测与分析
目的 了解2012年广西市售婴幼儿食品食源性致病菌污染状况,为食品安全预警和食源性疾病预防提供科学依据.方法 从广西14个地区的百货商场、超级市场、批发市场和便利店采集婴幼儿食品,按照国标方法进行金黄色葡萄菌、阪崎肠杆菌、蜡样芽胞杆菌检验.结果 ①共监测1 939份样品,总检出率为13.56％(263/1 939),其中,阪崎肠杆菌检出率为3.15％,谷类辅助食品检出率为4.19％明显高于配方食品的检出率0.83％(x2 =15.361,P＜0.05),蜡样芽胞杆菌检出率为10.37％,配方食品检出率为14.12％明显高于谷类辅助食品的检出率8.68％(x2=13.238,P＜0.05),金黄色葡萄球菌检出率0.05％;②定量结果:61份阪崎肠杆菌阳性样品中,43份＜5 MPN/100 g,3份＞110 MPN/100 g,大值为240 MPN/100 g;201份蜡样芽胞杆菌阳性样品中,MPN法测得159份＜ 100 MPN/g,10份＞100 MPN/g,大值为1 100 MPN/g,平板法测得19份＜100 cfu/g,13份＞100 cfu/g,大值为4×107 cfu/g;③不同年龄段谷类辅助制品蜡样芽胞杆菌和阪崎肠杆菌检出率范围分别为5.69％～21.05％和3.45％～ 5.26％,配方食品蜡样芽胞杆菌和阪崎肠杆菌检出率范围分别为11.11％～16.25％和0％ ～ 1.37％;④不同产地婴幼儿食品致病菌检出率范围为8.84％～ 23.47％.结论 广西市售婴幼儿食品存在蜡样芽胞杆菌和阪崎肠杆菌污染,应加强企业生产监管,保障婴幼儿食品的安全.
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蜡样芽胞杆菌食物中毒死亡案例分析
一般由蜡样芽胞杆菌(Bc)引起的食物中毒通常症状较温和而且可自愈.但随着国内外相关研究的深入,发现少数Bc食物中毒可能导致非常严重的后果,甚至致死.本研究主要分析国内外已报道的Bc食物中毒死亡案例12起,探讨其中的规律和共性.
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10种限量值对婴幼儿配方粉中蜡样芽胞杆菌污染风险比较
目的 比较不同限量值对我国婴幼儿配方粉中蜡样芽胞杆菌污染带来的风险大小.方法 利用我国零售阶段婴幼儿配方粉中蜡样芽胞杆菌定量监测数据,基于婴幼儿配方粉中蜡样芽胞杆菌的微生物风险暴露评估模型,在澳大利亚新西兰和加拿大设定标准的基础上,假定其他8种限量值,共10种限量值,计算我国婴幼儿配方粉中蜡样芽胞杆菌污染带来的风险大小.结果 婴幼儿配方粉从冲调到喂养的时间分别为2、3和4h时,婴幼儿配方粉中蜡样芽胞杆菌的限量值所起的作用不同.澳大利亚新西兰采用的限量值[n=5,c=0,m=100 CFU/g]如果应用于我国,在喂养总时间2、3h时,风险为0;喂养总时间4h时,相对于其他9种限量值的残留风险,该限量值的残留风险低,降低了约36％,不合格率为11.28％(1 128/10 000).在牺牲11.28％市场奶粉的基础上,较好的控制了风险.结论 本研究通过风险大小的比较,可筛选出可能应用于我国婴幼儿配方粉中蜡样芽胞杆菌管理的限量值.
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基于3种模型的市售腐乳中蜡样芽胞杆菌风险的比较性评估研究
目的 应用修正指数模型、对数概率模型和Gamma威布模型对某市市售腐乳中蜡样芽胞杆菌进行定量风险比较评估研究.方法 利用某市抽检数据,获得市售腐乳中蜡样芽胞杆菌的初始污染水平,分别按照修正的指数模型、对数概率模型和Gamma威布模型计算市售腐乳蜡样芽胞杆菌的风险.结果 使用市售腐乳蜡样芽胞杆菌的初始污染水平均值作为消费量,Gamma威布模型计算所得风险略低于另外两个模型,使用初始污染水平高值作为消费量,Gamma威布模型计算所得风险略高于另外两个模型.结论 本研究以蜡样芽胞杆菌风险评估为样本,为其他微生物开展风险评估提供了研究方法和思路.
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食用营养配餐时蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒
2010年8月28日,我区新太、远达两所小学部分学生食用某营养配餐中心提供的食物后引起食物中毒.经流行病学调查、临床表现和细菌学检验,证实为一起由蜡样芽胞杆菌污染所致的食物中毒.学生中毒症状以消化道表现为主,从吃剩的盒饭和配餐中心保留的样品中均分离出菌相为G+有芽胞大杆菌.经检验鉴定为蜡样芽胞杆菌.
