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腹泻性贝类毒素的细胞F-肌动蛋白荧光检测法的建立
目的 通过检测大田软海绵酸(0A)对HL-7702肝细胞的F-肌动蛋白的解聚作用,建立腹泻性贝类毒素(DSP)的荧光检测法.方法 使用鬼比环肽标记F-肌动蛋白,多功能酶标仪检测荧光强度,通过荧光强度的变化分析样品中毒素的含量.比较荧光检测法和ELISA法对贝类样品的检测结果,分析所建荧光检测法的可靠性.结果 OA能明显破坏细胞F-肌动蛋白的聚合.随着作用浓度的增加,破坏程度也随之增加.在2.5 ~40 nmol/L范围内呈现明显的线性关系(R2 =0.9931),检测限值可达到2.01μg/100g贝肉;进行样本检测时,加标回收率为92.76%~96.49%,并与ELISA法检测具有较好的线性相关(R2 =0.830).结论 与现有的检测法相比,F-肌动蛋白荧光检测法具有较好的重复性和较低的检出限,可用于有毒贝类的筛查与检测.
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分支杆菌菌群鉴定快速荧光法方法的研究
目的:建立一种分支杆菌(Mycobacterium)菌群鉴定的非放射快速荧光检测法.
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山西农村地区妇女HPV-6、11、16、18的血清流行病学研究
LP抗体阳性率与子宫颈病变程度有关,且随病变程度的加重而增加.
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光敏剂荧光成像的应用和研究
目前光敏剂荧光检测联合光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)受到国内外学者地广泛关注,为肿瘤的诊断与治疗带来新的福音.本文就光敏剂荧光检测的历史背景及基本原理重点阐述该技术联合PDT在各种肿瘤诊治中的优势及光敏剂荧光检测技术的研究进展.
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不同清洁消毒方式对导管室物体表面除菌效果的研究
目的:采用ATP生物荧光检测法,比较不同清洁消毒方式对导管室物体表面的除菌效果,为寻找导管室适宜的清洁消毒方式提供参考。
方法:选择导管室两个操作间及控制室。每个操作间及控制室选取23个固定区域为采样点,包括操作台、抢救台、固定夹、门把手、鼠标、键盘、控制器、对讲器、电话手柄、平车等。对照组:前10天对两个操作间及控制室的23个固定区域采取常规方式进行清洁,由保洁员完成。观察组:后10天对23个固定区域采取由护士实施的加强消毒措施(一天三次,4小时一次,用70%的酒精擦拭)。于清洁消毒后2小时对23个固定区域测定1次RLU值。用生物荧光测试管中的专用棉拭子,在采样点往返涂擦2遍取样。将取样后的棉拭子放人试管中,快速挤入裂解液和荧光素酶,反应后用荧光光度计测定相对光单位值(RLU),RLU值越高说明区域染菌量越高。使用SPSS17.0统计,所有数据采用均值(x±s )描述;对于两组的比较,采用正态资料t检验,非正态资料非参数秩和检验,P<0.05表示差异有统计学意义。 -
高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中佐匹克隆浓度
目的:建立高效液相色谱荧光法测定人血浆中佐匹克隆浓度的方法.方法:碱化血浆后经无水乙醚提取,挥干乙醚后,残渣经溶有参照标准品氢氯噻嗪的流动相溶解后进行测定.荧光检测的激发波长为315nm,发射波长为380nm.结果:本法测定佐匹克隆的线性范围为1~50mg@L-1(r=0.999),低检测限0.2ng,低检测浓度为1mg@L-1.低浓度(1mg@L-1)的日内变异系数为9.6%,日间变异系数为12.4%,低浓度萃取回收率和方法回收率分别是54.7%和87.0%,中高浓度的萃取和方法回收率均>90%.结论:用外标法测定人血浆中佐匹克隆浓度,方法精密、准确、稳定,适用于佐匹克隆的临床检测和药代动力学研究.
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高效液相色谱荧光检测法测定小鼠脑组织中氨基酸类神经递质
建立并优化高效液相色谱荧光检测法,灵敏有效地检测5种氨基酸类神经递质在小鼠脑组织中的浓度.以高丝氨酸(Hse)为内标,经过邻苯二甲醛柱前衍生化后,检测天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、牛磺酸(Tau)和γ-氨基丁酸(GABA).通过等度洗脱,5种氨基酸在24分钟内被精确分离.该方法在定量范围内线性良好,相关系数不低于0.9998,且检测限不超过10 nmol/L.以相对标准偏差表示批内及批间重现性均小于或等于10.5%.该方法被成功应用于C57BL/6小鼠黑质和纹状体中氨基酸类神经递质浓度检测.
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高效液相色谱-荧光检测法测定人血清中拉呋替丁药物浓度
目的 建立快速、灵敏的高效液相色谱-荧光检测法测定人血清中拉呋替丁药物浓度.方法 以SupelcosilTMLC-18-DB(4.6 mm×250 mm,5 μm)为色谱柱,[甲醇-(醋酸-醋酸钠缓冲液)](pH 4.5)=1:2为流动相,荧光检测波长:EX=285 nm,EM=313 nm.结果 测定血清中拉呋替丁方法的线性范围为2.5~300 μg·L-1,r=0.999 7(n=5),定量下限为2.5 μg·L-1.日内、日间精密度(RSD)均小于12%.结论 本方法操作简便、灵敏度高,可满足拉呋替丁药动学研究需要.
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HPLC荧光法测定血液中左氧氟沙星浓度
左氧氟沙星(levofloxacin,LVFX)属喹诺酮类抗菌素,为氧氟沙星的左旋体,其抗菌活性约为氧氟沙星的2倍,广泛用于治疗呼吸道、泌尿道、肠道及皮肤软组织等多种系统的感染,具有抗菌谱广、作用强并与多种抗菌药物间无交叉耐药性的特点[1].由于左氧氟沙星具有很强的荧光,笔者在参考了国内外有关文献[2~4]的基础上,采用高效液相色谱荧光检测法测定血液中左氧氟沙星浓度.本方法工作曲线稳定,灵敏度高,操作步骤简单,已应用于该药的药动学和药效学研究及临床治疗药物监测,获得了满意的结果.
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高效液相色谱-荧光检测法测定大鼠血小板内5-羟色胺的含量
目的:建立高效液相色谱一荧光检测测定大鼠血小板内5-羟色胺含量的方法.方法:色谱柱为Nucleosil-C18 (4 mm×250 mm,10 μm),流动相:磷酸二氢钾(10 mmol/L,内含EDTA-Na2 0.3 mmol,pH=3.5):甲醇:乙腈=85:10:5,流速:0.5 ml/min,荧光激发波长:254 nm,发射波长:360 nm,增益:32.血小板沉淀用300μl纯水悬浮,加入15μl内标溶液(30μg/ml,α-甲基-5-HT水溶液),100μl蛋白沉淀液,混匀,离心,取上清液20μl,进样.结果:5-羟色胺在0.25~4.00μg/ml浓度范围内,线性关系良好.5-羟色胺测定的批内和批间相对标准差(RSD)分别小于4.29%和4.44%,回收率为84.3%~88.7%.正常雄性SD大鼠血小板内5-羟色胺的平均含量分别为(1.65±0.14)μg/109plts.结论:本法简便、准确、快捷,可用于大鼠血小板内5-羟色胺的测定.
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高效液相色谱-荧光法测定盐酸莫西沙星血药浓度方法的建立
目的:建立高效液相色谱一荧光检测法测定盐酸莫西沙星血药浓度的方法.方法:采用乙睛一缓冲液(18:82)为流动相,缓冲液为磷酸二氢钠与四丁基硫酸氢胺混合水溶液;色谱柱:Kromasil C18(250 minx4.6 film,5μm);流速1.0 ml·min-1;进样量20μl;柱温:35℃.以环丙沙星为内标,采用荧光检测器检测,激发波长为290 nm.发射波长为488 am.结果:盐酸莫西沙星在0.25~5.0 μg·ml-1血药浓度范围内线性关系良好(r=0.9997).结论:该方法操作简便、专属性强、灵敏度高、结果可靠,可用于盐酸莫西沙星血药浓度的测定.
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高效液相色谱-荧光法测定丙泊酚的血药浓度
目的:建立高效液相色谱-荧光法检测丙泊酚血药浓度的方法.方法:采用饱和硫酸铵溶液作蛋白沉淀剂,以乙腈-水(70:30,含0.1%三氟乙酸)为流动相,流速1.0 ml·min-1,荧光检测器检测.结果:丙泊酚血药浓度范围为0.1~10.0 mg·L-1,(r=0.9995);低检测限为0.02 mg·L-1;平均提取回收率为87.03%,RSD为2.54%;平均方法回收率为105.08%,RSD为3.81%;日内差异RSD为4.31%;日间差异RSD为7.54%.结论:本检测方法操作简便、灵敏度高、专一性强、结果可靠,可用于丙泊酚血药浓度监测和药物代谢动力学研究.
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改良高效液相色谱荧光法测定脑脊液中异丙酚浓度的可行性
异丙酚具有高脂溶性,较易通过血脑屏障,在中枢发挥药效作用.本研究拟评价高效液相色谱(HPLC)荧光检测法测定脑脊液中异丙酚浓度的可行性,为探讨异丙酚在中枢的分布和代谢特点以及对中枢的药效作用奠定基础.
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HPLC-荧光法测定人血浆中厄贝沙坦浓度
目的:建立人血浆中厄贝沙坦浓度的HPLC-荧光测定方法。方法以替米沙坦为内标,乙醚-二氯甲烷(7∶3)提取的方法处理血浆。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为水-乙腈(57∶43),磷酸调pH值=3揪.00,荧光激发波长为254 nm,发射波长为371 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为室温。进样量50μl。结果厄贝沙坦和替米沙坦的保留时间分别为6.1 min和4.3 min,在0.05~5μg/ml范围内厄贝沙坦检测浓度线性关系良好( r =0.9996),低检测浓度为0.023μg/ml。高、中、低3种浓度(4、0.8、0.08μg/mL)的平均相对回收率分别为(101.18±6.31)%、(102.22±5.32)%、(98.45±3.52)%,提取回收率为(78.05±6.66)%,日间、日内RSD均小于10%。样品3次冻融及在-20℃冰箱长期放置稳定性良好。结论本实验建立的方法准确、灵敏度和特异性高,可用于厄贝沙坦的药代动学和药物相互作用研究。
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高效液相色谱法-荧光检测法测定人血浆中阿昔洛韦的浓度
目的 建立测定人血浆中阿昔洛韦浓度的高效液相色谱-荧光检测法.方法 色谱柱:伊利特C18(200mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-0.02mol·L-1高氯酸水溶液=8:92;流速:1.0mL·min-1;柱温:35℃;荧光检测:激发波长,280nm;发射波长,405nm;进样量:20μL.结果血浆中内源性物质对阿昔洛韦的测定无干扰,阿昔洛韦的线性范围为0.1-10μ·mL-1(R =0.999),准确度为98.21-100.36%,日内、日间精密度均小于3.54%,绝对回收率为96.23%-98.76%.结论 该法特异性强,准确度高,可用于血浆中阿昔洛韦浓度的测定.
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高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中草酸依地普仑的浓度及应用
草酸依地普仑(escitalopram,Ecp)是一种5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI),是新一代的抗抑郁药,其对SSRI的相对选择性在同类药物中高,能有效抑制5-羟色胺的再摄取,具有很强的抗抑郁作用[1].
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高效液相色谱-荧光检测法测定丹酚酸B的含量研究
建立了丹酚酸B的高效液相色谱-荧光检测含量测定方法.色谱条件为:BACKMAN ODS柱(4.6mmi.d.×250mm,5μm),以甲醇-0.5%冰醋酸水溶液为流动相,流速为1.0mL/min;荧光检测波长λEX=338nm,λEM=443nm;进样量5μL.丹酚酸B进样量为0.12~1.2μg时,其质量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998);加样回收率为98.6%~108%;低检测限为0.013μg/mL.该法具有更高的灵敏度,为丹酚酸B的药代动力学研究提供基础.
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解脲支原体和沙眼衣原体感染与女性不孕关系分析
1 资料与方法1.1 检查对象 2008年1月~2009年12月来我所不孕不育室就诊不孕症患者.实验组160(其中原发不孕102例,继发不孕58例),均排除器质性疾病及男方因素所致不孕,年龄23岁~28岁,对照组为已生育女性130例,年龄26岁~35岁.1.2 标准采集无菌棉试子插入宫颈管内,旋转采取宫颈分泌物,将棉试子放入无菌试管中送检.1.3 方法 PCR荧光检测法.
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盐酸二氧丙嗪血药浓度的测定及其在健康志愿者体内的药动学
目的 检测人血浆中盐酸二氧丙嗪的浓度,并研究在健康志愿者中口服单剂量9 mg后的药动学特征.方法 血浆样品经液-液萃取法提取处理,用高效液相色谱荧光检测法建立血浆中盐酸二氧丙嗪浓度的分析方法.结果 盐酸二氧丙嗪在为0.5~75.0 μg·L-1时线性关系良好(r=0.999 9),其血浆中的提取回收率>80%.日内、日间RSD分别<5%和<7%.盐酸二氧丙嗪浓度的血药浓度-时间曲线符合二室模型,主要药动学参数为:tmax为(2.17±1.70)h;ρmax为(31.07±5.83)μg·L-1;t1/2为(12.97±5.52)h.结论 本方法灵敏度高,选择性好和重视性佳,可准确测定人血浆中盐酸二氧丙嗪的浓度.
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维拉帕米及去甲基维拉帕米临床血药浓度的HPLC-FLU检测
目的:建立一种简便的维拉帕米(Ver)及去甲基维拉帕米(Norv)血药浓度HPLC-FLU的测定方法.方法:色谱柱为Alltima C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为甲醇-水-三乙胺(52:47.6:0.4),用冰醋酸调节pH至5.41,流速1 ml/min.荧光检测激发波长Ex=284 nm,发射波长Em=313 nm.Ver和去Norv的保留时间分别为7.14min和5.17 min,血样预处理采用乙腈直接沉淀法.结果:Ver及Norv血药浓度在25~400ng/ml范围内线性关系良好(r≥0.9997),低检测限分别为200pg和100pg(rS/N≥3),低检测浓度均为20 ng/ml.批内、批间精密度小于5%.结论:本方法简便可靠,可较好地满足临床治疗药物监测工作的需要.