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利用BioLumix微生物荧光光电检测系统快速检测蜡样芽胞杆菌
近段时期,由微生物污染导致的国内外食品安全事件频发,从德国的0104:H4出血性大肠杆菌污染事件,到香港食物安全报告显示某牛奶产品被检出蜡样芽胞杆菌超标,让我们感到由食品微生物污染引起的食源性疾病依然是食品安全的主要问题.针对目标微生物的有效检测需要快速、敏感和特异的方法.本文以蜡样芽胞杆菌的检测为例,通过具体的实验数据,探讨并验证了美国BioLumix实时快速微生物荧光光电检测系统是能够简便、快速、准确检测病源菌的自动化的科学仪器.蜡样芽孢杆菌中毒的临床症状与病源分布 蜡样芽孢杆菌为产大型芽孢的革兰氏阳性杆菌,与沙门氏菌、大肠杆菌等相比,更耐受高温和化学处理. 全球食源性疾病中大约有5%是由蜡样芽胞杆菌引起的,食用蜡样芽胞杆菌超标的食品可能导致呕吐、腹泻等食物中毒症状.呕吐型是由一种小分子量、耐热的肠毒素引起,腹泻型是由一种大分子量的肠毒素所致.快速、简便地检测出样本中潜在的蜡样芽孢杆菌对防治其所引起的食源性疾病非常重要.
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ICP-AES及ICP-AES分析技术在食品质量和安全研究中的应用
随着生活水平的提高,丰富多样的食品极大地满足了人们的需要。然而,食品的质量和安全问题,也给人们的健康带来了隐忧。准确检测食品中存在的各种微量及痕量元素(特别是对身体有害的元素)对于评价食品质量、保护人类健康具有重要的意义,因而成为食品检测领域关注的焦点。
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气相色谱法对面粉添加剂的检测研究
以往用于生产制品检测的手段多以高效液相色谱法为主,其在具体应用过程中涉及极为繁琐的操作且使用的仪器在价格方面较为昂贵,难以在企业中进行推广。对此在长期实践研究中发现通过气相色谱法的引用,能够对BPO在面粉中的含量进行准确检测,是保证面粉质量的重要环节。因此,对面粉添加剂中气相色谱法的应用分析具有十分重要的意义。
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粮食及其制品中真菌毒素的检测方法
真菌毒素是真菌产生的有毒次级代谢物,它广泛存在于粮油食品和饲料中,对人类和动物有害。一种真菌可能产生多种毒素,多种真菌可能产生同一种毒素。通常粮食或饲料中的真菌毒素并非单独存在,可能以一种或数种毒素为主,当不同毒素同时存在时,真菌毒素的毒性有累加效应(如黄曲霉毒素和赭曲霉毒素、呕吐毒素和玉米赤霉烯酮等),但并非是相加或相乘的关系。真菌毒素的毒性变化很大,它取决于毒素的种类、数量、摄入量、持续摄入时间、环境因素(包括环境卫生、空气质量、温度、湿度)等。目前,全世界已经发现了400多种结构不同的真菌毒素,其中已经被分离鉴定的有20多种,危害较大的主要有黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、赭曲霉毒素A、伏马毒素和T2/HT2毒素等。其中,黄曲霉毒素是天然物中致癌性强的毒素,被世界卫生组织(W H O)的癌症研究机构划定为1类致癌物,也是世界各地农产品及食品中易受其污染的一种真菌毒素。据联合国粮农组织估计,全世界谷物供应的25%受真菌毒素污染,这些真菌毒素会通过被污染的谷物、饲料和由这些饲料喂养的动物所提供的动物性食品进入人们的食物链,从而对人畜表现出致癌性、遗传毒性和致畸性。目前,全世界已有100个国家规定了粮食中主要真菌毒素的限量,我国GB 2761-2011也明确规定了食品中真菌毒素的限量。因此,准确检测真菌毒素含量的技术手段变得极为重要。
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医疗用品中环氧乙烷残留量的气相色谱法测定
环氧乙烷在室温、常压下为元色气体,具有芳香的醚味,其气体可被某些固体(如橡胶、塑料等)所吸收.环氧乙烷液体和气体均有较强的杀微生物作用,具有穿透性强、不损坏消毒物品、杀菌光谱、消毒效果可靠的特点.少量环氧乙烷对皮肤黏膜有刺激作用,大量吸入可引起急性中毒,环氧乙烷是一种烷基化剂,有致癌及细胞原浆毒作用.国家标准规定:一次性使用医疗用消毒后的环氧乙烷残留量≤10μg/g.为了准确检测环氧乙烷残留量,我们采用分离度高的毛细管色谱柱对实验方法进行了探讨.
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四种常用检测幽门螺杆菌方法的比较分析
幽门螺杆菌(helicobacter pylori,简称H.pylori或Hp),属螺杆菌属,为革兰阴性 ,无芽胞,呈螺旋状弯曲杆菌,已被确定为慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素,而且与胃癌密切相关.1996年WHO将Hp列为"一级致癌因子".全世界已有40%以上的人群感染了Hp,发展中国家甚至可达60%.因此,Hp 感染的快速、准确检测是当今医学界面临的重大课题.目前,检测幽门杆菌方法有很多种[1],我们选取了临床较为常用的4种方法:快速脲酶试验(HpRut)、血清学ELISA法、胃黏膜病理活检法、细菌培养,对漯河市第三人民医院门诊、病房多种胃肠消化病患者做了检查,现比较分析如下.
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HPLC分离测定四逆汤中3种双酯型生物碱及其6种水解产物
四逆汤为中医的经典名方,由附子(制)、干姜及炙甘草(蜜炙)组成,具有温中祛寒、回阳救逆的功效.现代药理研究表明该药具有强心,抗休克,增加冠脉血流量的作用[1].该方的君药为附子,其主要成分为乌头类生物碱(包括乌头碱、新乌头碱和次乌头碱),此类生物碱属于双酯类生物碱,毒性极大.酯类生物碱分子中的酯键是产生毒性的关键部位,在水中加热易水解,首先生成苯甲酰乌头原碱,进一步反应产生乌头原碱,两类水解产物毒性极小,但仍有药理活性[2].因此,能有行之有效的方法准确检测出该药中的各种活性成分是十分重要的,对确保临床用药的安全性有效性以及四逆汤这一经典药方的新剂型研发都有极为重大的意义.
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黄斑囊样水肿的证治及用药
黄斑囊样水肿(CME)在临床上十分常见,随着眼底荧光血管造影,以及光学相干断层扫描技术的广泛使用,可以通过对视网膜血管的渗漏的动态观察和对视网膜截面的精细结构断层成像将其准确检测出.笔者应用中医中药治疗黄斑囊样水肿,在证治及用药方面略有所得,现简述如下.
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标记免疫分析技术在TSH检测中的应用及其进展
促甲状腺激素(TSH)是垂体前叶分泌的一种糖蛋白激素, 含α、β两个亚基单位, 由211个氨基酸组成, 分子量为25000-28000, 参与垂体甲状腺轴反馈调节机制, 因此血清TSH的检测成为评价甲状腺功能的临床首选指标之一[1].随着酶免、化学发光免疫分析和时间分辨荧光免疫技术等迅猛发展, TSH的测定已越来越趋向超灵敏和自动化快速分析, 传统的RIA和IRMA由于受灵敏度、同位素污染和难以开展自动化分析等因素的制约, 已不能满足临床快速准确检测的要求[2].
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美科学家开发出原位检测艾滋病病毒的分子显微镜
《科技日报》报道,艾滋病病毒原位分析技术再次取得突破。美国科学家在上周召开的国际艾滋病会议上,展示了他们开发的全新检测技术及检测结果,这个被称为分子显微镜的探针能够准确检测到艾滋病病毒在细胞内外的隐藏之地。美国过敏性和传染性疾病研究所疫苗研究中心副主任瑞查得·普表示,这一分子显微镜新技术堪称神奇,它的超能力完全可以洞察到艾滋病病毒在任何细胞内的蛛丝马迹,终能帮助弄清艾滋病病毒长时间存留的谜底,从而将其从体内彻底清除。目前所用的检测组织中艾滋病病毒的原位分析技术都面临共同的大难题。这些探测技术,无论是利用荧光物质作标记物,还是放射性物质作标记,在精确定位组织样本中艾滋病病毒的位置时,经常难以将周围的细胞物质与目标检测物,如艾滋病病毒的RNA和DNA区别开来。这些标记物会将细胞组织当作病毒进行错误识别,对结果分析造成背景干扰。
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美国临床肿瘤学会乳腺癌肿瘤标志物使用建议简介
乳腺癌是一组异质性明显的肿瘤,有相似病理诊断和分期的患者其临床过程却可能完全不同.乳腺癌异质性的基础是一系列肿瘤相关基因的异常,而这些基因的表达可以提示肿瘤的预后以及对治疗的反应 [1].临床医师和病理医师的共同责任是合理运用、准确检测这些肿瘤标记物.美国临床肿瘤学会(ASCO)于1996年第一次发布了乳腺癌肿瘤标记物使用的临床实践指南,并由其专家委员会对指南进行不定期的更新和修订.继2000年的更新以后,该委员会于2007年10月再次发布了关于乳腺癌肿瘤标记物使用建议的更新和修订 [2].此次内容包含对13种乳腺肿瘤标记物的总结和评价,其中6种标记物是第一次纳入指南.下面将对2007年更新后的ASCO使用建议做一简要介绍.
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头孢西丁琼脂筛选法检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌
耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)是导致医院感染和社区感染的重要病原菌之一.近年来,随着广谱抗菌药物的广泛应用, 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的分离率逐渐增高、耐药性逐渐增强.Diekema等[1]对分离自全球多个地区的凝固酶阴性葡萄球菌研究表明,该菌对苯唑西林的耐药率达70%以上.MRCNS对万古霉素耐药菌株的出现更使临床上对其感染的治疗成为十分棘手的问题[2].因此,快速、简便、准确检测MRCNS以指导临床合理用药对控制其感染显得尤为重要.2004年,美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)首次将头孢西丁纸片扩散法用于MRCNS的检测[3].本研究用不同培养周期和不同浓度的头孢西丁琼脂筛选平板检测了104株凝固酶阴性葡萄球菌并对该方法作了评价.
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固相载体法提取胰腺癌患者血清循环DNA的研究
近年研究发现,肿瘤患者血清或血浆中存在较高水平的肿瘤源性DNA(亦称循环DNA),正常人血清或血浆中的含量甚微(<10ng),因而对其遗传学改变进行检测,对肿瘤的诊断、鉴别和治疗预后等具有重要意义[1].然而,血清中含有的大量蛋白质、糖类、脂质等均可影响微量循环DNA的提取,而分离纯化则是准确检测的关键步骤.本研究采用全血基因组DNA提取的异硫氰酸胍-硅胶法[2]与高灵敏度的SYBR GreenⅠ染色技术,建立了一种可提取血清或血浆DNA的固相载体法,并用于胰腺癌患者血清循环DNA检测.
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我国HIV感染者CD4+T淋巴细胞检测能力的研究
目前,人类关于HIV感染的检测项目很多,其中CD+4T淋巴细胞的检测已成为评估HIV感染者疾病状况切实可行和相对经济的检测项目[1-2],CD+4T淋巴细胞水平用来监测不同临床阶段HIV感染者免疫状况的变化,判定HIV感染者病程,预测机会性感染的出现以及评价抗HIV药物疗效[3-4].从2006年起准确检测CD+4T淋巴细胞计数已经成为判断是否开始治疗AIDS和HIV感染者以及治疗效果观察对比的关键.
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胶乳凝集试验快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是重要的医院感染致病菌,快速准确检测MRSA是控制感染的关键.
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大动脉功能检测现状
动脉血管的功能是将血液不断从心脏输送到各个器官的组织、细胞.为了完成这一支持生命的重要任务,动脉血管不只是一个单纯的通道,而是需要保持足够好的弹性,才能辅助心脏将心脏射出的血液及时、足量地输送到目的地.因此,动脉血管的功能又称弹性功能.随着年龄的增长,动脉血管逐渐硬化,因而弹性功能逐渐下降,会导致器官、组织与细胞供血不足.如果缺血发生在心、脑、肾等重要脏器,将会直接影响这些脏器的功能或导致结构病变,因而出现严重疾病.近年来,随着科学技术的发展,建立了无创的动脉弹性功能检测技术,可准确检测出动脉的早期功能病变,为早期干预、预防心脑血管并发症创造了诊断条件.本文主要介绍大动脉功能检测的意义、方法、临床应用以及仍待解决的问题.
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在探索中发现困惑 在困惑中寻找希望
本期杂志有关股骨头坏死(osteonecrosis of the femeral head,ONFH)的诊治专题,作为组稿人,有幸首先拜读同道雅作,欣喜之余,又对现有研究中的种种问题深感忧虑与困惑.由于ONFH的发病机制尚不明确,临床上无法实现针对病因的治疗.目前,常用的外科保头术武包括髓芯减压术、骨移植术、钽棒植入术、干细胞移植术、血管束植入术、截骨术等.这些术式确实在临床上取得了巨大的成功,但仍有一些困惑让我不吐不快.单纯髓芯减压似乎对早期患者十分有效,可显著缓解患髋疼痛,但有没有直接证据证明股骨头髓腔内的压力确实升高?有什么方法可以准确检测髓腔内压力?坏死区压力过高吗,坏死区需要减压么?
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BACs-on-Beads:一种快速可靠的产前诊断技术
传统的细胞遗传学分析方法主要为体外细胞培养及染色体核型分析,可以准确检测出染色体非整倍体以及染色体倒位、易位、大于5 Mb的重复和缺失等结构异常[1],但完成该过程需7~10 d,时间较长。随着分子遗传学技术的发展,定量荧光聚合酶链反应(quantitative fluorescence polymerase chain reaction,QF-PCR)、多重连接依赖的探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplifi-cation,MLPA)、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)等技术可进行快速非整倍体筛查(rapid aneuploidy testing,RAT)[1-3]。但目前这些RAT技术只针对13、18和21号染色体以及性染色体的非整倍体检测,若要检测其他染色体异常,需要进行额外操作,增加了检测成本和时间[2-5]。染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis,CMA)技术分为基于微阵列的比较基因组杂交(array-based comparative genomic hybridization,aCGH)技术和单核苷酸多态性微阵列(single nucleotide polymorphism array,SNP array)技术两大类,采用比较基因组杂交的方法可检测染色体微缺失和微重复[6-9],但成本相对昂贵,且检测结果可能出现临床意义不明的拷贝数变异(copy number variant,CNV)[6,8]。
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原子荧光光谱法同时测定深井水中砷和汞
原子荧光光度计同时测定生活饮用水中As、Hg的技术,就仪器本身的性能、佳氢化反应条件、干扰等方面进行了测试,同时就检测过程中应注意的问题,供同行参考并提出建议.在正常情况下有害元素含量很低,对人体无害,但当有害元素含量达到一定量时,就会对人体造成伤害,所以对生活饮用水的准确检测就非常重要.
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的特点、分布与检测
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌不仅是院内感染的重要病原体之一,并且近年来其在社区感染中占的比例也在呈逐年上升的趋势.MRSA感染已与艾滋病、乙型肝炎并列为世界三大严重感染性疾患.MRSA的迅速发展,造成治疗上的困难及病死率增高,已成为全球关注的严重感染症.如何快速、准确检测出MRSA对于控制MRSA感染具有重要意义.