首页 > 文献资料
-
脓毒症常见病原菌多重实时PCR检测方法的建立
目的 建立可同时检测脓毒症患者血液中肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和白假丝酵母菌的多重实时PCR方法.方法 根据各病原菌基因组保守序列设计引物和探针,建立多重实时PCR检测方法.对建立的多重实时PCR检测方法进行特异性、敏感性和灵敏度分析,并使用该法对112份脓毒症血培养阳性标本进行验证.结果 成功建立脓毒症常见病原菌的多重实时PCR检测方法.此方法特异性、敏感性良好,灵敏度达10-5 ng/μl,与标准检测方法(血培养加生化鉴定)相比,缩短了20 h.112份临床血培养阳性标本中,目标病原菌83例,多重实时PCR检出80例阳性;非目标病原菌29例,多重实时PCR检测均为阴性.检测结果显示,该方法特异性达100%,敏感性达96.39%.结论 该多重实时PCR检测方法具有快速、高效、灵敏、特异的优点,可用于临床重症监护室患者血液常见感染病原菌的诊断.
-
产粘质凝固酶阴性葡萄球菌的耐药性
目的了解医院内感染标本产粘质凝固酶阴性葡萄球菌(PSCNS)的耐药状况.方法用刚果红琼脂法检测CNS产生的粘质,药敏试验采用K-B纸片扩散法和Vitek微生物自动分析仪检测MIC,按NCCIS规定的标准进行.结果58株PSCNS β-内酰胺酶产生率为91.4%.产粘质的表皮葡萄球菌占PSCNS的72.4%;对苯唑西林耐药率为53.4%,对奈替米星和万古霉素全部敏感;对青霉素全部耐药,对磷霉素和庆大霉素的耐药率分别为12.1%和24.1%.结论表皮葡萄球菌产粘质的能力强,粘质的产生与产酶及耐药性密切相关.万古霉素和奈替米星是治疗耐甲氧西林PSCNS感染的首选药物,对重症感染也可根据药敏结果联合应用磷霉素及庆大霉素等有效的抗菌药物.
-
外科预防应用抗感染药物的原则和方法(二)
神经外科手术预防用药通常仅适用于操作时间延长的开颅术、再探查、显微外科手术或植入假体(如丙烯酸板),而不适用于外伤后脑脊液漏.常见的病原菌包括金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和类白喉杆菌.
-
耐药菌感染的治疗
针对现阶段细菌耐药情况,采用以下药物治疗耐药菌感染.链阳霉素类主要产品是奎奴普丁与达福普汀马30:70(w/w)组成的制剂.奎奴普丁/达福普汀与细菌核糖体50s亚基结合,抑制细菌蛋白质的合成.后者还能引起核糖体构型改变,增强前者与核糖体的亲合力,两者并用有明显协同作用,并能增大水溶性,可注射使用.奎奴普丁/达福普汀对革兰阳性细菌有很强抗菌作用.抗MRSA的活性比万古霉素强,MIC为0.13~1mg/L.抗凝固酶阴性葡萄球菌作用也强于万古霉素,MIC为0.25~1mg/L.抗屎肠球菌活性较强,4mg/L时可抑制97.8%的菌株,但抗粪肠球菌作用较差,4mg/L时仅抑制1/3的菌株.对部分厌氧菌如消化链球菌属、脆弱拟杆菌和个别的革兰阴性菌如卡他莫拉菌、奈瑟菌属、流感嗜血杆菌等也有作用,但对肠杆菌科细菌、铜绿假单胞菌无效.
-
凝固酶阴性葡萄球菌感染的耐药现状调查分析
目的:了解凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的耐药状况,为临床合理使用抗菌药物提供实验室依据.方法:对从患者临床标本中分离到的216株CNS,采用ATB鉴定系统鉴定到种,用纸片扩散法(K-B法)做体外药敏试验,参考CLSI2006年标准判断药敏结果.结果:216株CNS中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为53.2%.MRCNS对抗菌药物的耐药率明显高于甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS).并呈现多药耐药性,但未发现对万古霉素耐药和中介的菌株.结论:CNS正成为医院感染主要的病原菌之一.MRCNS检出率较高,实验室应做好CNS的耐药性监测,为合理使用抗菌药物提供依据.
关键词: 凝固酶阴性葡萄球菌 耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌 耐药性 -
凝固酶阴性葡萄球菌抗药基因检测及其对消毒剂抗性研究
目的 研究医院分离的凝固酶阴性葡萄球菌抗药基因携带情况及其对消毒剂的抗性关系.方法采用PCR方法和肉汤稀释法,分别对凝固酶阴性葡萄球菌qacA基因及其对消毒剂抗性进行了检测.结果从医院环境和医务人员手上分离的63株凝固酶阴性葡萄球菌中,检出12株携带qacA基因,检出率为19.05%.聚维酮碘对12株携带抗药基因的菌株MIC值在250~500 mg/L之间,对其中3株菌的MBC为1 000 mg/L,超过标准菌株的500 mg/L.12株携带抗药基因的凝同酶阴性葡萄球菌中,二氯异氰尿酸对其中3株菌的MIC值为500 mg/L、对其中5株菌的MBC值为500 mg/L;三氯异氰尿酸对其中7株菌的MIC值介于500~1000 mg/L之间、有3株MBC值为1 000 mg/L,均超过标准菌株的250 mg/L.结论凝固酶阴性葡萄球菌抗药基因携带率为19.05%,携带qacA基因的凝固酶阴性葡萄球菌部分菌株分别对含碘消毒剂和含氯消毒剂的抗性有所增加.
-
凝固酶阴性葡萄球菌对苯扎溴铵消毒剂的抗力观察
目的 研究医院环境分离凝固酶阴性葡萄球菌分布及其对苯扎溴铵消毒液抗力的变化情况.方法 采用细菌检测和肉汤稀释法,对医院环境标本进行了细菌分离鉴定并测定分离的凝固酶阴性葡萄球菌对苯扎溴铵的小抑菌浓度(MIC).结果 从841份医院环境表面和医护人员手标本中共分离出63株凝固酶阴性葡萄球菌,分离率为7.49%;从中检出12株携带qacA基因的凝固酶阴性葡萄球菌.苯扎溴铵对携带qacA基因的12株凝固酶阴性葡萄球菌MIC值范围为0.7 mg/L~2.8 mg/L,其中11株的MIC值均高于金黄色葡萄球菌标准株.结论 携带qacA基因的凝固酶阴性葡萄球菌对苯扎溴铵的抗力普遍高于金黄色葡萄球菌消毒试验标准菌株.
-
携带抗药基因的 CNS 对醋酸氯己定的抗力研究
目的 研究凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)抗药基因携带及其对氯己定类消毒剂抗力变化情况.方法 采用细菌分离鉴定方法和基因扩增技术,对医院环境和医务人员手上采样标本进行了分离培养和检测.结果 在841份标本中,检出63株CNS,检出率为7.49%.63株CNS中,有12株检出qacA基因,检出率为19.05%.醋酸氯己定对12株CNS小抑菌浓度范围在0.24 mg/L~1.96 mg/L,其中有7株CNS的小抑菌浓度高于标准菌株者;小杀菌浓度范围在7.81 mg/L~500 mg/L,其中有9株CNS的小杀菌浓度明显高于标准菌株.结论 医院环境表面和医务人员手上CNS检出率较高,多数携带qacA基因的菌株对醋酸氯己定消毒剂抗力有增加的趋势.
-
292株凝固酶阴性葡萄球菌的临床分布及耐药性
目的 了解某医院住院患者感染凝固酶阴性葡萄球菌分布特征及其耐药情况,为控制感染提供依据.方法 采用回顾性调查方法,对某医院临床病原学标本检验诊断的凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)感染患者的临床资料进行统计分析.结果 该医院连续3年从临床送检病原学标本中共检出葡萄球菌属651株,其中CNS 292株,占葡萄球菌属的44.9%.在CNS中,溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌和人型葡萄球菌的构成比依次为37.7%、29.1%和9.9%,其他葡萄球菌占23.3%.临床分离的CNS对药敏试验的26种抗菌药物中耐药率超过50%的达21种,仅对利奈唑胺全部敏感,对呋喃妥因、替考拉宁和万古霉素比较敏感.结论 该医院临床分离的CNS比例大,耐药严重,应加强监测和药敏试验,指导抗菌药物的选择和应用.
-
消毒液中污染的凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因定位研究
对分离自使用中消毒液的29株CNS,进行了质粒消除前后的耐药性研究.结果,消除质粒前,29株CNS耐药重数为138,消除质粒后减至25,即由质粒介导的耐药性占81.9%(113/138),由染色体编码者占18.1%(25/l 38).结果显示同一质粒可同时携带多个耐药基因.表明质粒介导在CNS耐药中起主要作用.
-
Ⅱ期翻修治疗凝固酶阴性葡萄球菌假体周围感染的临床观察
目的:探讨Ⅱ期翻修治疗凝固酶阴性葡萄球菌假体周围感染失败的危险因素.方法:回顾2005年1月至2015年6月就诊的57例因凝固酶阴性葡萄球菌造成的髋、膝关节假体周围感染而行Ⅱ期翻修患者,平均年龄(61.3± 11.9)岁.根据甲氧西林是否耐药分为甲氧西林敏感(MSCoN)组及甲氧西林耐药(MRCoN)组,其中MSCoN 组患者25例(9膝16髋,男12例,女13例),MRCoN组患者32例(11膝21髋,男14例,女18例);随访至少2年,比较两组炎症指标、窦道发生率和症状持续时间,以及Ⅱ期翻修治疗后再感染或持续感染率.结果:MSCoN组和MRCoN组分别经过(81.7±38.3)个月及(65.9±33.8)个月的随访,各治疗成功23例和27例,两组差异无统计学意义(P=0.643).既往有手术史患者比无手术史患者失败的可能性高4.04倍[OR=4.04,95%CI(0.62,26.5)].既往有窦道的患者比无窦道的患者失败的可能性高4.26倍[OR=4.26,95%CI(0.7,25.9)].结论:在治疗甲氧西林耐药与敏感的凝固酶阴性葡萄球菌引起的假体周围感染方面,Ⅱ期翻修能取得良好的效果.甲氧西林耐药的凝固酶阴性葡萄球菌引起的假体周围感染并非Ⅱ期翻修治疗失败的危险因素,窦道及既往手术史可能是Ⅱ期翻修治疗失败的原因.
-
基因芯片快速检测脑脊液常见病原菌的应用研究
目的 探讨采用基因芯片方法在疑似颅内细菌感染患者的脑脊液标本中直接检测常见致病菌的可行性和临床意义,以期提高微生物检测的速度,将检验结果快速回馈给临床.方法 收集2015年3月至2016年7月疑似颅内感染患者脑脊液标本,从中筛检出30例阴性标本和77例阳性标本,从原始脑脊液标本中提取DNA,经PCR扩增后产物在基因芯片上杂交,其结果与同份标本的临床培养结果进行比较.结果 阴性标本中芯片法与培养法符合率为96.7%,阳性标本中芯片法与培养法符合率为41.6%,而剔除凝固酶阴性葡萄球菌后芯片法与培养法的符合率为78.1%.结论 基因芯片检测原始脑脊液标本对早期筛查具有一定的临床意义,提示临床初步抗生素的用药方向,减少用药的盲目性,减少耐药菌株的出现,有很好的发展前景.
-
艾滋病合并细菌性肺炎病原菌分布及耐药研究
目的 研究艾滋病合并细菌性肺炎患者的病原菌分布及耐药情况,为临床疾病防控提供指导. 方法 收集艾滋病合并细菌性肺炎患者痰液等标本,分离鉴定病原菌,并对病原菌进行耐药性分析. 结果 分离鉴定出106株病原菌,其中革兰阴性菌66株,革兰阳性菌40株;革兰阴性菌中大肠埃希菌29株,肺炎克雷伯菌18株,阴沟肠杆菌10株,铜绿假单胞菌2株,鲍曼不动杆菌1株,其他革兰阴性菌6株;革兰阳性菌中凝固酶阴性葡萄球菌20株,金黄色葡萄球菌11株,肺炎链球菌5株,其他革兰阳性菌4株.大肠埃希菌对氨苄西林、庆大霉素、头孢他啶、左氧氟沙星、阿米卡星的耐药率分别为51.72%、37.93%、31.03%、24.14%和10.34%;肺炎克雷伯菌对庆大霉素、氨苄西林、左氧氟沙星、阿米卡星、头孢他啶的耐药率分别为55.56%、44.44%、33.33%、27.78%和16.67%,主要革兰阴性菌对美罗培南均敏感;凝固酶阴性葡萄球菌对庆大霉素、苯唑西林、利福平、阿奇霉素、克林霉素的耐药率分别为75.00%、50.00%、40.00%、30.00%和25.00%;金黄色葡萄球菌对庆大霉素、阿奇霉素、苯唑西林、克林霉素、利福平的耐药率分别为63.64%、54.55%、45.45%、45.45%和27.27%;肺炎链球菌对苯唑西林、庆大霉素、阿奇霉素、克林霉素、利福平的耐药率分别为40.00%、20.00%、20.00%、20.00%和20.00%,主要革兰阳性菌对利奈唑胺均敏感. 结论 艾滋病合并细菌性肺炎患者感染病原菌以革兰阴性菌为主,其中以大肠埃希菌为常见.治疗革兰阴性菌感染患者时首选美罗培南;治疗革兰阳性菌感染患者时首选利奈唑胺.
-
凝固酶阴性葡萄球菌生物膜形成与检测的研究进展
凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative staphylococci,CONS)是人体皮肤和黏膜上定居的正常菌群之一,因其几乎不产生对人体有毒性的酶和毒素,故一般认为是非致病菌.20世纪70年代以前,关于CoNS引起的感染仅有个别报道,20世纪80年代后,由于革兰阳性菌的抗生素广泛使用,以及介入性治疗、留置导管和组织器官移植等治疗手段的应用,CoNS成为医院感染的重要机会致病菌之一,并出现多重耐药株.本文就CoNS生物膜的形成与检测进展进行了综述.
-
凝固酶阴性葡萄球菌胞外多糖蛋白复合物的检测
凝固酶阴性葡萄球菌(coagulasenegative Staphylococci,CNS)属人体正常菌群.随介人性治疗和免疫抑制剂的使用,现成为院内感染的条件致病菌.本研究通过刚果红黏附试验和刚果红-阿利新蓝联合染色,对采自临床的CNS标本进行胞外多糖蛋白复合物检测,以胞外多糖毒力指标作为确定CNS致病性的一个可能性依据,可为医院有效控制CNS感染提供实验基础.
-
聚合酶链反应检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌mecA和femB基因
近年来耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染率逐年上升,已成为全世界医源性感染的重要病原菌之一.目前国内多采用PCR方法检测编码耐药菌特异的青霉素结合蛋白(PBP2a)的mecA基因来鉴定MRSA,但近缘的细菌难以区分.如凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中也发现具有修饰PBP2a的mecA基因.该基因具有属内种间的一致性, 耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)与MRSA mecA基因之间的DNA序列有99%以上是一致的.
-
阴沟肠杆菌B8提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用
阴沟肠杆菌B8分离自水稻叶片.临床分离菌株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)87株,MSSA(不耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)38株,MRSCON(耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌)16株,MSSCON(不耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌)5株,大肠杆菌10株,铜绿假单胞菌25株,阴沟肠杆菌14株,不动杆菌26株,肺炎克雷伯菌8株,共229株.阴沟杆菌O29和O29M作标准菌株.
-
盐酸小檗碱对表皮葡萄球菌生物被膜形成的影响
表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis,SE)是人体皮肤和黏膜的主要共生菌之一,属于凝固酶阴性葡萄球菌,是一种常见的条件致病菌.近年来随着临床上插管、人工瓣膜、透析等医疗技术和一次性材料的使用增多,表皮葡萄球菌现已是医院感染的重要致病菌,而表皮葡萄球菌对常见抗菌药物耐药率已成为医院感染和临床治疗的棘手问题.生物被膜(biofilm,BF)可以保护细菌抵抗宿主免疫力和抗生素杀灭作用,造成感染难以治愈和反复发作.
-
16种常见凝固酶阴性葡萄球菌的快速分子鉴定
目的 建立对16种常见凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)的快速分子鉴定.方法 用gap基因对16种常见CNS进行扩增和测序,获得序列在GenBank进行比对,构建进化树进行同源分析,同时与16S rRNA基因比较.结果 16种常见CNS中,gap基因相似率介于39% ~ 98%,人葡萄球菌和与人葡萄球菌亚种相似率高(98%),腐生葡萄球菌与木糖葡萄球菌相似率低(39%),16SrRNA基因相似率介于96% ~ 99%,至少2种细菌99%以上相似率,多4种葡萄球菌99%以上相似率;进化树同源分析显示,两种方法在检测缓慢葡萄球菌与松鼠葡萄球菌、产色葡萄球菌与中间葡萄球菌和人葡萄球菌与人葡萄球菌亚种时,都有很高的可信度(99%以上),而对于其他10种细菌,gap基因同源分析有较少的不可靠信度(49%,56%),16S rRNA基因同源分析有较多不可靠信度(43%、43%、50%、56%、63%、65%、76%).结论 gap基因序列分析能够对16种常见CNS进行准确鉴定,同源分析可信度要明显优于16S rRNA基因.
-
基因多态性分析在凝固酶阴性葡萄球菌菌种鉴定中的应用
凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative Staphylococcus, CNS)是定居在人体皮肤和黏膜表面的正常菌群.随着大量介入性医疗技术的发展和广谱抗生素的应用,CNS已成为儿科医院感染性疾病常见的致病原,尤其是抵抗力低下的新生儿败血症的常见病原.因此,建立快速及可靠的菌种鉴定方法,对于早期预测每一种临床细菌菌株的潜在致病性或抗生素的敏感性是非常必要的.