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1例阴沟肠杆菌碳青霉烯类抗生素 耐药的机制研究
目的 对浙江省瑞安市人民医院临床分离的1株碳青霉烯类抗生素耐药的阴沟肠杆菌的耐药机制进行研究.方法 通过E-test检测阴沟肠杆菌及接合菌株的低抑菌浓度,Hodge试验检测碳青霉烯酶,采用接合实验、聚合酶链反应(PCR)、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳及耐药基因克隆测序分析细菌的耐药机制.结果 接合试验显示阴沟肠杆菌中的碳青霉烯类耐药基因位于质粒上,基因扩增、测序、比对等方法测得此耐药基因为BlaKPC-2型.结论 阴沟肠杆菌碳青霉烯类药物耐药由质粒介导的KPC-2酶引起.
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一起由阴沟肠杆菌引起食物中毒的病原学检测
目的 确定病原,为食物中毒处理提供依据.方法 对采集到的食物中毒样品依据检测标准进行致病菌检测.结果 从15件食物中毒样品中检出4株阴沟肠杆菌.其中,中毒病人便1株,剩余食品3株.结论 确定此起食物中毒的病原菌为阴沟肠杆菌.
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阴沟肠杆菌的感染部位与耐药特性
目的:研究阴沟肠杆菌的感染部位及耐药特性,指导临床合理运用抗生素.方法:用K-B纸片扩散法对从临床各部位标本中分离出的122株阴沟肠杆菌作20种抗生素的药敏试验.结果:阴沟肠杆菌的感染部位广泛,以呼吸道感染率高,达51.6%;122株阴沟肠杆菌对头孢霉素类抗生素、β-内酰胺类抗生素、含β-内酰胺酶抑制剂类抗生素以及对氨基糖甙类抗生素等的耐药率较高,对氟喹诺酮类及四代头孢菌素等抗生素表现出较低的耐药率,对碳青霉烯类抗生素表现出极低的耐药率.结论:阴沟肠杆菌的感染部位广泛,对呼吸道的感染率高;阴沟肠杆菌对临床常用的抗生素表现为高耐药和多重耐药;环丙沙星、左氟沙星、头孢吡肟等抗生素可作为治疗其感染的首选药物,亚胺培南可作为二线用药来治疗其混合感染及其高耐药菌株的感染.
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阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药性监测
超广谱β-内酰胺酶是一类对包括第三代头孢菌素及氨曲南在内的β-内酰胺类抗生素具有水解作用的酶[1],由质粒介导的大多数肠杆菌科细菌均可产生ESBLs,常见于大肠埃希氏菌和肺炎克雷白氏菌,亦可见于阴沟肠杆菌,弗劳地枸橼酸杆菌,大多源于TEM-1,TEM-2和SHV-1的突变[2].为了解我院阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药状况,我室对我院临床分离出的169株阴沟肠杆菌进行超广谱β-内酰胺酶的检测并进行药敏分析,现报告如下.
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阴沟肠杆菌临床分离株armA基因分布与分子分型研究
目的 调查某医院阴沟肠杆菌临床分离株的耐药性和armA基因分布情况,探索armA阳性菌株与耐药性的关系及其分子分型特征.方法 采用微量肉汤稀释法对51株临床分离的阴沟肠杆菌进行药敏试验;荧光定量PCR方法检测16S rRNA甲基化基因armA;脉冲场凝胶电泳试验(PFGE)分析armA阳性菌株间的亲缘关系.结果 阴沟肠杆菌临床分离株对阿米卡星和庆大霉素的耐药率分别为39.2％和54.9％,armA基因阳性率为23.5％,arm A阳性菌株对阿米卡星和庆大霉素均耐药;12株携带armA基因菌株主要分为5型,无明显优势菌株.结论 产16S rRNA甲基化酶armA的阴沟肠杆菌菌株对氨基糖苷类药物耐药,应加强对该基因监测,合理指导临床抗生素应用.
关键词： 阴沟肠杆菌 16SrRNA甲基化酶 armA基因 耐药性 -
ICU与普通科室医院感染阴沟肠杆菌的耐药性比较研究
目的：比较医院重症监护病房（ ICU）与普通病房患者感染的阴沟肠杆菌的耐药性，为临床合理应用抗生素提供科学依据。方法通过临床病原学标本检测和药敏试验方法，对某教学医院临床送检病原学标本检测结果进行比较分析。结果该医院在2011年12月-2014年4月，从临床送检标本中共分离出阴沟肠杆菌197株，ICU占16.75%，临床普通科室占83.25%。197株阴沟杆菌中有68.52%分离自病人的痰标本，其次为感染切口分泌物和外伤伤口分泌物，构成比分别7.61%和5.58%，分居2、3位。ICU患者标本中分离出的阴沟肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药率明显高于其他普通临床科室患者标本分离者，且耐药谱不同。结论该医院ICU患者标本分离的阴沟肠杆菌对抗菌药物耐药率明显高于非ICU患者分离者，应当加强耐药菌监测和药敏试验，严格管控抗菌药物使用。
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产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌耐药特性及耐药基因分析
目的 调查某医院阴沟肠杆菌中产碳青霉烯酶菌株耐药性及基因型分布.方法 分离鉴定2015年10月-2017年6月期间临床送检标本中阴沟肠杆菌,运用纸片扩散法(K-B法)检测抗菌药物敏感性;应用改良-Hodge试验检测阴沟肠杆菌产碳青霉烯酶表型,采用PCR方法检测阳性株携带相关酶基因情况.结果 分离出的298株阴沟肠杆菌中33.2%来源于呼吸科,21.8%来源于重症医学科.共鉴定出26例产碳青霉烯酶的阴沟肠杆菌菌株.碳青霉烯酶阳性菌株对头孢拉定、头孢美唑等头孢类抗生素和亚胺培南、美罗培南等耐药率为100%;对哌拉西林/他唑巴坦复合制剂和阿米卡星耐药率较高,分别为88.5%和76.9%,对复方新诺明耐药率相对较低,为30.8%;26株产酶菌株携带的碳青霉烯酶基因以blaKPC为主,blaIMP和blaNDM-1也有检出.结论 该院分离的产碳青霉烯酶阴沟肠杆菌主要为产KPC、VIM和NDM-1酶菌株,且耐药性较强,提示临床医生应重视抗菌药物合理应用,强化耐药菌监控.
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阴沟肠杆菌临床分布特征与耐药情况
目的 分析265例阴沟肠杆菌的临床分布和耐药情况,以指导临床合理用药.方法 使用法国梅里埃全自动细菌鉴定仪鉴定分离菌株,采用K-B纸片扩散法对其进行药敏实验,运用whonet 5.4软件对结果进行统计处理.结果 265例阴沟肠杆菌菌株主要来源于神经外科、肝胆外科、ICU及呼吸内科的痰液及尿液标本.耐药结果显示阴沟肠杆菌对抗生素耐药性较高的为头孢拉啶、头孢西丁、哌拉西林和头孢呋辛,耐药率依次为94.72%、93.96%、55.10%和48.68%;对氨基糖苷类抗生素阿米卡星敏感性较高,达到94.34%;对碳青霉烯类亚胺培南和美洛培南敏感率均为100%.结论 阴沟肠杆菌对常用抗生素仍具有较高耐药率,对阿米卡星、亚胺培南和美洛培南高度敏感,为杜绝耐药现象进一步加重,需认真做好耐药率监测,临床医师应严格根据实验结果用药.
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肺结核患者合并下呼吸道阴沟肠杆菌感染的临床特点与耐药性分析
目的 调查某院肺结核患者合并下呼吸道阴沟肠杆菌感染的临床特点及其对常用抗菌药物的耐药性,为临床诊断及治疗提供依据.方法 回顾性分析2012年1月-2013年12月共136例阴沟肠杆菌引起肺结核患者下呼吸道感染病例,采用微生物鉴定仪进行病原菌鉴定,K-B纸片扩散法进行药敏试验.结果 检出阴沟肠杆菌的标本主要分布在痰液(74.26％)和咽拭子(17.65％)中;药敏试验表明,阴沟肠杆菌对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星敏感,耐药率均＜10％,可作为临床治疗该菌感染的首选药物.结论 阴沟肠杆菌易致肺结核患者下呼吸道感染,对抗菌药物耐药性严重,临床应引起高度关注,及早进行微生物学检测,并根据药敏试验结果合理选用抗菌药物.
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某医院感染阴沟肠杆菌分布及耐药性变迁
目的 了解某医院感染阴沟肠杆菌分布及耐药性变迁,指导临床合理用药.方法 通过细菌分离培养和药敏试验方法,对某医院患者送检病原学标本进行检测和分析.结果 共收集该医院临床分离阴沟肠杆菌454株,有45.15％阴沟肠杆菌分离自痰液,居首位;临床分离的阴沟肠杆菌主要来自老年医学科和骨科,分别占21.37％和18.94％;检出产β-内酰胺酶株菌187株,占41.18％;产β-内酰胺酶菌株对抗菌药物的耐药率明显高于非产酶菌株;5年共检测出对碳青霉烯类耐药菌株26株,占5.73％.结论 阴沟肠杆菌耐药性呈增长趋势,尤其对碳青霉烯类耐药性明显增加,应加强耐药性监测,防止其在医院内流行.
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不动杆菌高活性β-内酰胺酶的检测及耐药分析
1.材料与方法:(1)菌株来源:所试菌株均来自白求恩国际和平医院住院患者留取的各种标本(排除同一患者同一部位重复分离的菌株),其中痰标本115份、脓性分泌物11份、尿液7份、关节液1份;患者年龄在10～100岁之间,平均72岁;男性90例、女性44例;134株不动杆菌中鲍曼不动杆菌100株,占74.6%;洛菲不动杆菌29株,占21.7%;乙酸钙不动杆菌3株,占2.2%;溶血不动杆菌2株,占1.5%;大肠埃希菌ATCC 25922作为三维试验指示菌,试验用质控菌株有肺炎克雷伯菌ATCC 700603为ESBLs阳性对照,阴沟肠杆菌029M为AmpC酶阳性对照(均由北京医院馈赠).
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质粒介导的喹诺酮耐药基因qnr分子流行病学研究
目的 了解武汉大学人民医院分离的革兰阴性杆菌中qnr基因及其所携带的广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因的流行情况.方法 采用聚合酶链反应(PCR)方法对129株大肠埃希菌、29株肺炎克雷伯菌和10株阴沟肠杆菌进行qnr基因检测.对qnr阳性株,检测Ⅰ类整合酶基因及SHV-1、TEM-1、CTX-M、OXA-Ⅰ、OXA-Ⅱ、OXA-Ⅲ、DHA、EBC型ESBLs基因.KB纸片法检测对16种抗菌药物的体外抗菌活性,美国临床实验标准委员会表型筛选和确证试验检测产ESBLs株.质粒接合试验分析qnr基因的水平转移能力,ERIC-PCR进行DNA同源性分析.结果 6株菌株检出qnr基因(5株大肠埃希菌和1株阴沟肠杆菌),肺炎克雷伯菌中未检出;6株菌仅对亚胺培南全部敏感且对多种抗生素耐药,Ⅰ类整合酶基因扩增全为阳性,其中有2株大肠埃希菌对环丙沙星敏感,4株菌携带TEM-1型ESBLs基因、1株菌携带OXA-Ⅲ型ESBLs基因、2株菌携带EBC型AmpC酶;每株菌至少携带2种以上ESBLs基因.qnr基因介导的喹诺酮类耐药具有水平转移性,DNA同源性分析有2株指纹图谱一致.结论 武汉地区存在qnr基因的流行,qnr阳性株多重耐药严重,且携带多种ESBLs基因.
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阴沟肠杆菌16S rRNA甲基化酶基因及氨基糖苷类修饰酶基因研究
目的 了解临床分离的40株阴沟肠杆菌中16S rRNA甲基化酶基因及氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因存在状况.方法 在2003年9月至2004年11月从解放军第98医院住院患者中分离40株阴沟肠杆菌,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析5种16S rRNA甲基化酶基因(armA、rmtA、rmtB、rmtC和rmtD)和9种AMEs基因[aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、aac(6')-Ⅰ b、aac(6')-Ⅱ、ant(3'')-Ⅰ、ant(2'')-Ⅰ和aph(3')-Ⅵ].结果 40株阴沟肠杆菌中,6种基因rmtB、aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰ b、ant(3'')-Ⅰ、ant(2'')-Ⅰ和aph(3')-Ⅵ的阳性株数分别为5株(12.5%)、11株(27.5%)、29株(72.5%)、13株(32.5%)、2株(5.0%)和2株(5.0%);其余8种基因均阴性;AMEs基因总阳性率为85.0%(34/40).对29株aac(6')-Ⅰ b基因PCR阳性产物进行测序,证实有7株(24.1%)单独携带aac(6')-Ⅰ b-cr双功能酶基因(GenBank:EF375620、EU159121),18株(62.1%)单独携带aac(6')-Ⅰ b-Snzhou(苏州型,EU085533),3株(10.3%)同时携带aac(6')-Ⅰ b-Suzhou及aac(6')-Ⅰ b-cr 2种亚型,仅1株(3.4%)为aac(6')-Ⅰ b经典型.结论 临床分离的40株阴沟肠杆菌中16S rRNA甲基化酶基因阳性率较低而AMEs基因阳性率很高,至少存在5种AMEs基因.
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阴沟肠杆菌的临床分布及耐药性分析
目的 分析2010至2012年广州医学院第二附属医院阴沟肠杆菌的临床分布及耐药情况.方法 收集2010年8月至2012年8月本院细菌室检测的痰、尿、脓液或创口分泌物、胆汁、血液及其他体液样本,从中分离出97株阴沟肠杆菌并经VITEK 2 Compact细菌鉴定仪鉴定.分析阴沟肠杆菌在各科的分布情况.采用K-B纸片法进行药敏试验,再用双纸片法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBL).结果 阴沟肠杆菌主要分布于呼吸科、肝胆外科和新生儿科,分别占12.4％、11.34％、2.06％；其中46株来自于痰,占47.42％,其次为尿、脓液或创口分泌物,均为12株,各占12.37％.标本中阴沟肠杆菌ESBL阳性株对亚胺培南耐药率低为0,对头孢吡肟、丁胺卡那耐药率为14.29％、4.76％,与ESBL阴性株耐药率差异无统计学意义；对氨苄西林、头孢噻肟、氨曲南耐药率为100％、95.24％、100％,明显高于ESBL阴性株的耐药率.结论 阴沟肠杆菌多药耐药现象较为严重,应加强耐药性监测,指导临床医师合理使用抗菌药物.
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阴沟肠杆菌裂解性噬菌体Pyg1生物学特性及补体对其杀菌作用的研究
目的 明确阴沟肠杆菌噬菌体Pyg1的生物学特性及补体对其杀菌作用的影响.方法 电镜观察Pyg1形态,分析Pyg1噬菌谱、生长曲线及理化稳定性;比较Pyg1在不同补体活性血清中与阴沟肠杆菌临床分离株YG7作用1h后存活的细菌数.结果 Pyg1为肌尾型噬菌体,其感染YG7的潜伏期为20 min,爆发量为100 PFU/cell.Pyg1在pH5～9的环境中具有较好的稳定性,在50℃的环境中活性也无明显变化.Pyg1在56℃、30 min热灭活的鼠血清中和在营养肉汤中均具较强的杀菌能力(P＞0.05),存活细菌数＜ 100 CFU/ml.但在新鲜未灭活鼠血清和补体活性为25U/ml的液体中对YG7的杀菌能力减弱,存活细菌数＞105 CFU/ml.当补体活性超过50 U/ml时,Pyg1完全失去对YG7的抗菌活性,存活细菌数与无噬菌体对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05),均达107 CFU/ml以上.结论 Pyg1是一株裂解性噬菌体,在自然条件下其杀菌作用强且稳定,故在减少医院环境中对其敏感的多重耐药阴沟肠杆菌方面有潜在的应用前景.但因Pyg1对YG7的杀菌作用受血清中不耐热物质补体的干扰,因此不适于治疗YG7引起的全身感染.
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产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药性及RAPD分型分析
目的 了解医院感染阴沟肠杆菌的现状、耐药与流行状况.探讨产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的耐药机制与基因分型.方法细菌的药敏试验采用K-B法;产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶检测分别采用双纸片确证试验和三维试验;基因分型采用随机扩增多态性DNA(RAPD)法.结果 60株阴沟肠杆菌中产超广谱β-内酰胺酶、AmpC酶分别为23株和32株,产新型β-内酰胺酶株14株.RAPD将60株阴沟肠杆菌分为7种株型.其中Ⅰ、Ⅱ型、Ⅲ型占68.3%,是主要的流行株.产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌对11种常用抗生素的耐药率为21.3%～100%.结论 医院感染阴沟肠杆菌对不同抗生素具有较高的耐药性,不同产酶类型对抗生素的耐药性不同.产新型β-内酰胺酶阴沟肠杆菌的出现与流行是阴沟肠杆菌多重耐药与高耐药的重要原因.
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阴沟肠杆菌医院感染分布及耐药性分析
目的 探讨阴沟肠杆菌(ECL)在临床标本中的分布及耐药性,为临床医师合理用药提供科学依据. 方法 采用微量稀释法对临床送检标本分离的ECL菌株进行药敏试验,分析其耐药性. 结果 136株ECL菌株主要分布在重症监护病房(ICU)(37株)、呼吸内科(36株)、肾内科(18株)、血液内科(1 4株)和神经内科(14株)等科室；主要来源于痰液(75株),占55.1％.ECL对IPM的敏感率为97％；对头孢吡肟、环丙沙星、庆大霉素、左旋氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦的敏感率在70％～81％,对哌拉西林、妥布霉素的敏感率在60％ ～70％之间,对头孢他啶、头孢曲松、氨曲南的敏感率在50％～60％,且均呈下降趋势；对氨苄西林、头孢唑啉、氨苄西林/舒巴坦敏感率仅为5.9％、2.2％和27.9％.结论 阴沟肠杆菌耐药性已十分严重,临床应根据药敏结果合理使用抗生素.
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土生克雷伯菌中发现16S rRNA甲基化酶基因rmtB
近年来,有关临床分离的革兰阴性杆菌产生16S rRNA甲基化酶导致对临床上常用的几乎所有氨基糖苷类抗生素耐药情况备受国内外学者关注[1-3]引.我们曾先后报道了临床分离的阴沟肠杆菌[1]、鲍曼不动杆菌[4]、肺炎克雷伯菌[5]中16SrRNA甲基化酶基因存在与分布状况.
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阴沟肠杆菌及其糖蛋白组分的抑瘤效应
从河水中分离得到一株细菌(FD102),经鉴定为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae),初步研究发现该菌制剂对小鼠S180有一定的抑制作用.以FD102湿菌体加溶菌酶和无菌水,37℃,20分钟,再加20% SDS,37℃ 30分钟,然后70℃ 2小时,得无菌制剂.用此制剂给荷瘤S180小鼠腹腔注射,连续9天,对照组注射生理盐水,每天注射37.75mg/kg,抑瘤率为35.78%,18.88mg/kg为42.65%,9.44mg/kg为24.51%.各组用药小鼠在实验中没有明显毒性反应和死亡.
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一株产碳青霉烯酶IMP-26阴沟肠杆菌的分离鉴定
在过去的几年中,产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌不断被发现,这引起了临床工作者的强烈担忧.我院发现一株碳青霉烯类抗菌药物耐药的阴沟肠杆菌,此临床菌株分离自一位9个月的哮喘患儿,对亚胺培南和厄他培南表现为耐药,其低抑菌浓度分别为4 μg/ml和16μg／ml.对青霉素类,头孢类及头孢与酶的复合制剂都表现为耐药.进一步的实验显示此菌株的Hodge试验阳性,确定该菌株产碳青霉烯酶.通过对亚胺培南与亚胺培南+EDTA的纸片的抑菌圈直径的比较,发现此种碳青霉烯酶能被EDTA抑制.通过PCR扩增,发现此阴沟肠杆菌含有blaInt11、blaIMP和blaTEM基因,通过测序和比对确定blaIMr的基因型为blaIMP-26,balTEM基因的基因型为blaTEM-104.通过等电聚焦电泳,也证实此阴沟肠杆菌产IMP和TEM酶.
