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一株产碳青霉烯酶IMP-26阴沟肠杆菌的分离鉴定
在过去的几年中,产碳青霉烯酶的肠杆菌科细菌不断被发现,这引起了临床工作者的强烈担忧.我院发现一株碳青霉烯类抗菌药物耐药的阴沟肠杆菌,此临床菌株分离自一位9个月的哮喘患儿,对亚胺培南和厄他培南表现为耐药,其低抑菌浓度分别为4 μg/ml和16μg/ml.对青霉素类,头孢类及头孢与酶的复合制剂都表现为耐药.进一步的实验显示此菌株的Hodge试验阳性,确定该菌株产碳青霉烯酶.通过对亚胺培南与亚胺培南+EDTA的纸片的抑菌圈直径的比较,发现此种碳青霉烯酶能被EDTA抑制.通过PCR扩增,发现此阴沟肠杆菌含有blaInt11、blaIMP和blaTEM基因,通过测序和比对确定blaIMr的基因型为blaIMP-26,balTEM基因的基因型为blaTEM-104.通过等电聚焦电泳,也证实此阴沟肠杆菌产IMP和TEM酶.
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对《替加环素体外药敏试验操作规程专家共识》一文的更正
中华检验医学杂志2013年7月第36卷第7期584页发表的《替加环素体外药敏试验操作规程专家共识》一文中,表2(替加环素的抑菌圈直径和MIC药敏判定标准),肠杆菌科细菌根据FDA的折点判定标准,纸片扩散法抑菌圈直径应为:敏感≥19 mm,中介15~18 mm,耐药≤14 mm。由于作者疏忽,错误地写成了敏感≥16 mm,中介13~15 mm,耐药≤12 mm。特此更正,对大家工作中造成的不便,深表歉意。附更正后的表2。
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外科住院患者大肠埃希菌耐药性分析和菌株-聚类分析
大肠埃希菌是肠杆菌科中常见的菌种,该菌若侵入肠道以外的组织器官,可引起菌血症、脑膜炎和尿路感染等[1],该菌在医院内感染中占重要地位[2].特别是近年来产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株引起的医院内感染.调查大肠埃希菌临床分离株的耐药性现状,阐明菌株间的相关性,对医院内感染的监控具有实际意义.本文就广西医科大学第一附属医院2001年外科住院患者分离的大肠埃希菌进行耐药性分析,并以菌株对抗菌药物抑菌圈直径作为变量进行聚类分析,探讨大肠埃希菌临床分离株的相关性.
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粪肠球菌的耐药性分析和聚类分析在流行病学研究中的应用
粪肠球菌已成为人类重要的条件致病菌,可引起心内膜炎、菌血症、尿道和盆腔感染等.由于该菌固有的对多种抗生素的耐药性,使其不易从感染部位清除,而导致病死率增加.此外,由粪肠球菌引起的感染在医院内感染中也占有相当的比例[1].因此,调查和研究住院患者分离菌株的同源性关系,对于医院内感染的监控具有重要的作用.本文就北京友谊医院2001年1月1日至2001年12月31日收集的粪肠球菌临床分离株进行耐药性分析,并对内科病房住院患者分离菌株以多种抗菌药物抑菌圈直径为变量进行聚类分析,以探讨聚类分析在粪肠球菌流行病学研究中的可行性.
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抗生素微生物检定法操作体会
<中国药典>抗生素微生物检定法测定抗生素含量,此方法经典成熟,能直接显示抗生素的抗菌效价,而且成本不高,还有相当一部分抗生素药品采用此法测定含量.相关药厂和地市级药检所都能开展此项检验方法.笔者采用二剂量法(中国药品生物制品检定所制培养基,ZY-300A多功能抑菌圈自动测试仪), 在做一批含量测定时发现同一剂量所产生的抑菌圈直径误差有时很大,特提出,与同行探讨.
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芦荟-丹参复方凝胶对痤疮主要致病菌的体外抑菌研究
目的:探讨两种中药材主要有效成分对痤疮主要致病菌体外的协同抑菌作用,并寻找佳配比。方法:测定不同比例混合的芦荟-丹参复方凝胶及单方凝胶对痤疮主要致病菌的抑菌圈大小及低抑菌浓度(MIC)。结果:芦荟-丹参复方凝胶抑菌效果优于单方凝胶,配比以1:2为佳,复方凝胶对金黄色葡萄球菌的MIC为37.5 mg/L,对痤疮丙酸杆菌的MIC为75 mg/L。结论:芦荟-丹参复方凝胶对痤疮主要致病菌有较强的抑制作用,且两者的作用可以相互促进。
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太原地区感染性腹泻2 714例致病菌群及耐药性变迁的调查
为了解太原地区感染性腹泻的主要致病菌及对常用抗生素耐药情况的变化,对1994—1998年 我院感染性腹泻住院病人大便标本进行细菌培养,并做10余种抗生素敏感试验,对其耐药性 进行统计学处理。1 资料与方法 研究对象为1994—1998年我院感染性腹泻住院患者,共2 714例。年龄介于7个月~83岁。取 就诊当日新鲜大便脓血部分立即进行培养,用麦康凯琼脂平板及山梨醇培养基,亚硝酸盐培 养基分离及增菌培养,并做血清学及生物化学鉴定。对培养阳性细菌,1994—1997年做氟 哌酸等11种抗生素,1998年加做环丙沙星,羟氨苄青霉素及羧苄青霉素敏感试验。纸片法判 定结果,根据抑菌圈直径大小分高、中、低度敏感及不敏感,不敏感者视为耐药。2 结 果 2 714例大便标本培养出阳性致病菌707株,菌种分布见表1。对707株致病菌做氟哌酸等10余 种抗生素药敏试验,其耐药情况见第29页表2。5 a中氟哌酸、痢特灵、先锋霉素V、卡那霉 素、庆大霉素、丁胺卡那霉素、氨苄青霉素、抗菌优、氧哌嗪青霉素9种常用抗生素耐药性 的动态变化见第29页表3。1994年与1998年耐药性的比较见第30页表4。
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论药敏结果与合理使用抗生素
体外抗菌药物敏感试验包括试验所测得的客观数据(MIC值,抑菌圈直径等),以及对所得数据的判读(敏感,中介,耐药),合理判读是根据抗菌药物研究领域的新发展,尤其是耐药机制方面的研究,协调上述两者间的关系,使实验室的药敏报告结果能提供更准确的信息、测出细菌的耐药性,尤其是低水平耐药.
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双纸片协同法和推测法检测ESBL效果探讨
产超广谱β—内酰胺酶(ESBL)细菌的检测对指导临床用药有重要的意义。目前,检测方法较多,赵霞等认为,推测法只要4种药物中的2种及2种以上抑菌圈直径达到可疑标准,即可考虑在检测报告上提示该菌为产ESBL菌株。双纸片协同法既有较高检出率,又易于一般医院开展。我们……
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11味中药对痤疮丙酸杆菌的体外抑制作用研究
通过研究11味中药对痤疮丙酸杆菌的体外抑制作用,筛选出用于治疗痤疮的中药单方与复方.采用牛津杯法测定了11味中药的水提液与醇提液的抑菌圈直径,发现同种中药的水提液与醇提液的抑菌效果相近,且痤疮丙酸杆菌对黄连高敏,对黄柏、黄芩、丹参、半枝莲中敏,对其余6味中药耐药.将黄连分别与其它4味有效中药复配,所得复方水提液中,黄连丹参复方抑菌效果较好,当黄连∶丹参(w/w)=1.5∶8.5时,其抑菌圈直径较大,达23.5mm.提示黄连以及黄连丹参复方对痤疮丙酸杆菌有较好的抑制作用,为研制治疗痤疮的新药提供了依据.
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浅谈抗生素微生物检定--管碟法操作注意要点
抗生素管碟测定法是利用抗生素在摊布特定实验菌的固体培养基内呈球面形扩散,形成含一定浓度抗生素球形区,抑制了实验菌的繁殖而呈现出透明的抑菌圈.根据抗生素在一定浓度范围内,对数剂量与抑菌圈直径(面积)呈线性关系,比较标准品与供试品两者对接种的实验菌产生抑菌圈的大小,计算出供试品的效价.本文根据实践工作经验,对抗生素效价检定操作过程中应注意的要点作一总结简述.
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冰冻保存M-H琼脂的质量评价
目的 评价冰冻(-20℃)保存对M-H琼脂培养基的质量效果及有效期.方法 1将预先制好并经灭菌后的M-H琼脂培养基置于-20℃保存,在1月、3月、6月、1年、2年后取出,隔水加热浇制成平板,用标准质控菌株做质量监测;2将预先制好并经灭菌后的M-H琼脂培养基置于-20℃保存,1个月后取出,加热融解浇制一部分平板后再冰冻2天,如此反复6次,每次均用标准质控菌株来鉴定其质量.结果 1用标准质控菌株鉴定各期限冰冻保存的M-H琼脂培养基的质量,均与新鲜时一样,用丁胺卡那霉素或庆大霉素药敏试纸监测的抑菌圈直径均符合质量控制鉴定标准.2用标准质控菌株鉴定反复冻融6次以内的M-H琼脂培养基的质量均与新鲜时一样,均符合质量控制鉴定标准.结论 冰冻保存不影响M-H琼脂培养基的质量,其有效期长达2年,且可反复冻融6次,该保存法适用于基层医院,也为商品化批量生产提供了长期保存方式,值得推广应用.
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中药黄连对临床常见耐药菌株的体外抑菌活性分析
目的:观察中药黄连浸提液对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、产广谱β-内酰胺酶(ESBL)肺炎链球菌(S.pneumoniae)、耐亚胺培南铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)、产ESBL大肠埃希菌(E.coli等4种常见临床耐药菌株的体外抑菌活性分析.方法:选取中药黄连制备水浸提液,依据CLSI标准,初步采用纸片琼脂扩散法(K-B法)测算黄连浸提液对MRSA、产ESBL的E coli和S.peneumoniae、耐亚胺培南P.aeruginosa等菌株的抑菌直径并参考相应的标准菌株实验结果,再采用肉汤稀释法观察黄连浸提液对其相应抑菌活性,测定其相应的小抑菌浓度(MIC).结果:黄连浸提液对S.peneumoniae、MR-SA、E.coli和P.aeruginosa等耐药菌株的抑菌直径分别为21,17,15,10 mm;MIC分别为15.63,62.50,125,250 mg· ml-1.结论:黄连水浸提液对4种临床常见的耐药菌都有较好的抑菌效果,其中产ESBL的S.peneumoniae的抑菌效果为明显,MRSA效果次之,其次为产ESBL的E.coli和耐亚胺培南P.Aeruginosa.本研究结果对肺炎链球菌及MRSA感染治疗具有重要的参考价值.
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木糖氧化产碱杆菌致尿路感染1例
患者,男,65岁,因排尿困难5年,排尿不出12 h于2012年2月6日入院.既往长期留置尿管、长期卧床、反复使用广谱抗生素史.入院当天即出现发热,体温高达39.0℃.入院检查,血常规:WBC 16.06×109·L-1,GRA 92.4%.生化:CRP 130.2 mg/L,hs-CRP 156.1 mg/L.尿液常规:LEU(++),WBC 180/μL.中段尿培养:木糖氧化型木糖氧化产碱杆菌(菌落计数≥10×5 cfu),对头孢他啶、氧哌嗪青霉素/他唑巴坦、替卡西林/克拉维酸、左旋氧氟沙星、丁胺卡那霉素、多黏菌素B均耐药,仅对美罗培南敏感,抑菌圈直径18 mm(中敏值14~15 mm);亚胺培南为中敏.
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如何提高抑菌试验速度的探讨
目的 探讨基层检验机构如何进行快速、准确的抑菌试验.方法 用庆大霉素标准药敏纸片对ATCC25922、ATCC25923进行K-B法操作,观察结果分4个试验组和1个对照组,每组操作重复10次,4个试验组分别培养4h,4.5h,5h,5.5h,使用普通光学显微镜放大160倍观察细菌生长情况,根据抑菌圈直径进行初步判断,对照组培养20h肉眼观察,根据抑菌圈直径进行终判断.结果 第4h,4.5h观察的结果与其他各组比较差异有显著性(P<0.05); 第5h,5.5h和20h观察的抑菌直径相比差异无显著性(P>0.05),说明第5h,5.5h的初步判断与第20h的终判断吻合.结论 普通光学显微镜放大160倍观察细菌生长可以加快药敏诊断速度.
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富血小板血浆对痤疮丙酸杆菌的体外抑菌实验研究
目的 通过体外实验探索富血小板血浆(PRP)对痤疮丙酸杆菌的抑菌作用.方法 采用纸片扩散法(简称“改良K-B法”)来进行PRP体外抑菌的实验,设置红霉素溶液阳性对照药,贫血小板血浆(PPP)为阴性对照药,后测定抑菌圈直径.结果 PRP对痤疮丙酸杆菌有较强的敏感性,在纸片扩散法实验中的抑菌圈直径为(15.37±0.747 0)mm,与PPP相比差异有统计学意义(P<0.05).参考抗生素药敏实验等级划分的判断标准,PRP对痤疮丙酸杆菌的抑菌效果属于高敏.结论 PRP对痊疮的主要致病菌座疮丙酸杆菌有良好的抑菌效果.